DNA Extraction & Inhibition Control Real-Time PCR - Diagenode ...

DIA-EIC/DNA-050
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Matériel non fourni
• Pipettes
• Tips stérils avec filtres
• Powder-free gloves
• Vortex
• Centrifugeuse de paillasse
• Tubes pour microcentrifugeuse) RNase/Dnase-free (1,5 and/or 2 ml)
• Eau RNase/DNase-free
• Kit d’isolation d’ADN (voir : échantillon Extraction/Isolation d’ADN)
• Consommables et accessoires (tubes, microcentrifugeuse, plaques, plastique adhésif)
pour un ABI 7000 ou un Biorad ICycler.
• Taqman® Universal PCR Master Mix, Applied Biosystems (Roche)
• Instrumentation PCR temps réel : ABI 7000 or Biorad ICycler.
Collection de l’échantillon, stockage et transport
I. Collection de l’échantillon
Echantillons respiratoires:
Les échantillons respiratoires humains tels que le lavage broncho-alvéolaire, crachat et
écouvillon nasopharyngé peuvent être collectés.
Echantillon sanguin:
Les Echantillons sanguin tels que le sang total et/ou plasma peuvent être collectés.
Echantillon urinaire.
II. Stockage de l’échantillon
L’échantillon humain peut être stocké à 4°C pendant un maximum de 24h ou de -20°C à -80°C
pour une plus longue période.
L’échantillon humain doit être stocké dans des tubes en polypropylène RNA/DNAse free. La
sensibilité de la PCR peut être réduite suivant les répétions de cycles congélationdécongélation.
III. Transport de l’échantillon
L’échantillon humain doit être transporté dans un conteneur adapté. L’échantillon doit être
transporté suivant les instructions locales et nationales sur le transport de matériel pathogène.
• Les échantillons respiratoires humains et de plasma doivent être transportés à
-20° C.
• Les échantillons de sang total et d’urine doivent être transportés à +4° C.
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