Etude d'un vaccin contre la rage animale, à virus inactivé ... - OIE

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totalité de leur encéphale est aussitôt extraite selon les méthodes classiques (4)
puis soit traitée immédiatement, soit conservée à - 30 °C durant les quelques
jours qui précèdent le traitement.
Troisième étape : Inactivation du virus, préparation finale du vaccin
Les encéphales*, frais ou congelés, prédécoupés en petits fragments de
quelques grammes, sont pré-broyés dans un volume de soluté tamponné stérile
frais (4 °C) égal à trois fois leur poids. Ce pré-broyage s'effectue à l'Ultra-
Turrax dans un récipient de la hauteur de la tige, à la vitesse maxima (20 000
tours/minute) et durant trois minutes.
La sécurité de ce broyage, générateur d'aérosols de virus, est assurée par
une double enveloppe plastique (Figure 2). A l'issue de ce pré-broyage, un
titrage est effectué par inoculation intracérébrale à la souris et exprimé en dose
létale pour 50 p. 100 des souris par voie intracérébrale (DL 50
/i.c. / souris).
Le pré-broyat est alors additionné d'une quantité de soluté tamponné**
préchauffé à 37° telle que la suspension finale contienne 5 parties d'encéphale
pour 95 de soluté. Cette suspension est filtrée aseptiquement sur gaze stérile et
inactivée aussitôt par addition d'une partie pour cent d'une solution de B.P.L.
à 1/40 réalisée extemporanément. L'inactivation se poursuit alors durant une
heure à 37 °C puis 12 heures à + 4 °C, sous agitation constante, le pH étant
rectifié à 7 si nécessaire en fin d'inactivation. Le vaccin est alors complété par
addition de 2,5 p. 1000 de phénol et d'une partie d'hydroxyde d'alumine pour
trois parties de vaccin inactivé phénolé.
RÉSULTATS
Les résultats des essais faits sur divers lots de vaccins expérimentaux peuvent
être résumés par l'étude des trois critères les plus importants pour un vaccin
antirabique destiné au chien :
— le titre de la suspension virale avant inactivation,
— la valeur antigénique de la suspension après inactivation (test N.I.H.),
— le titre d'anticorps élaborés par les chiens vaccinés.
TITRE DE LA SUSPENSION VIRALE
AVANT INACTIVATION
Ce titre apparaît comme très différent selon que le virus provient du
broyage de l'encéphale d'un ovin adulte (poids moyen d'environ 90 grammes,
après « toilette » des méninges, tissus conjonctifs, vaisseaux, etc.) ou de celui
d'un agneau de 1 à 2 mois (poids moyen de 75 grammes).
* L'encéphale est constitué, dans nos essais, du cerveau, du cervelet et du bulbe rachidien.
** La formule de ce soluté est celle décrite par P. Lépine et coll. (5).