Immunisation passive du poulet de chair vis-Ã -vis des ... - FACW

9 ème Journée des Productions porcines et avicoles
14 octobre 2009 - Gembloux - Belgique
Immunisation passive du
poulet de chair vis-à-vis des
salmonelles à l’aide
d’anticorps du jaune d’œd
’œuf
Christopher Marcq 1 , A. Thewis 1 D. Portetelle 2 ,
et Y. Beckers 1
Université de Liège – Gembloux Agro-Bio Tech (GxABT)
1 Unité de Zootechnie, 2 Unité de Biologie Animale et Microbienne
Passage des Déportés, 2 B-5030 Gembloux

La problématique : Salmonella
• Enjeux
• Sanitaire : santé publique
• Economique : exigence du législateurl
• Complexe
Décembre 2010 : Règlement R
2160/2003/CE
tolérance zéro z
!
• Salmonellose = zoonose MAIS ≠ maladie animale
• Méthodes de lutte « classiques » insuffisantes
Besoin d’alternatives
d
efficaces

Quelles options ?
• Cycle de transmission complexe
• Plusieurs niveaux d’action d
possible
approche intégr
grée souhaitable !
• Pas simple transit mais capacité de fixation !
empêcher l’adhl
adhésion
et/ou le développement
Source : Gabriel et al., 2005

Notre approche : Immunisation
passive à l’aide d’IgYd
• Jaune d’œd
’œuf : source d’anticorpsd
1
260 à 300 œufs / an
Jusqu’à 60 g d’IgY/an
IgY antisalmonelles
pour
immuniser le
poulet de chair ?
2
Antigène vaccinal
issus d’un agent
infectieux
IgY dirigés contre
l’agent infectieux
3
IgY spécifiques
Introduction
dans l’aliment
Réduction du portage au
niveau du TD

Stratégie expérimentale
• 3 étapes
1. Vaccination de poules pondeuses
2. Conditionnement : additif alimentaire pour poulets
3. Evaluation des effets
In vitro
Effet sur l’adhésion
Effet sur la
croissance
In vivo
Effet sur l’infection
Effet sur les
performances

Potentiel in vitro
• Capacité à contrecarrer le processus
d’adhésion
des salmonelles
(d’apr
après Chalghoumi et al., 2009a)
Nombre de bactéries
adhérantes par
champs microscopique
500
400
300
200
100
Effet des IgY
spécifiques dont
la cible est
Salmonella
0
15.625 31.25 62.5 125 250 500
Titre en IgY totaux (µg/ml)
Specific IgY
Negative control

Potentiel in vitro
• Capacité à ralentir la croissance des
salmonelles (d’apr
après Chalghoumi et al., 2009a)
11
log 10
CFU/ml
log 10
CFU/ml
10
9
8
7
6
11
10
9
8
7
6
Avec 125 µg/ml IgY
0 2 4 6
Avec 250 µg/ml IgY
0 2 4 6
log10 CFU/ml
11
10
9
8
7
6
Avec 500 µg/ml IgY
0 2 4 6
Temps (h)
Specific IgY
Control

Et chez l’animal l
???

Essai d’immunisation d
passive
• Challenge bactérien
• 2 sérotypes
: S. Enteritidis et S. Typhimurium
• Infection expérimentale
à J4 (2 x 10 6 ufc / poussin)
• Facteur dose – Aspect prophylactique
Travail en condition de biosécurité classe 2
Suivi des performances
D’après Chalghoumi et al., 2009b
Administration de JEL dans l’aliment
J0
éclosion
J4
inoculation
Suivi de la charge en salmonelles
J28

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Essai d’immunisation d
passive (2)
• Traitements expérimentaux
Traitement
T1
T2
T3
T4
T5
TP
TN1
TN2
Apport
en JEL
(%MF)
5
5
5
5
5
0
5
5
Apport
en JEL-HI
(%MF)
5
3,75
2,50
1,25
0
0
5
0
IgY
totaux
(%MF)
0,06
0,06
0,06
0,06
0,06
0
0,06
0,06
Teneurs en IgY
IgY anti-
SE*
0,57
0,53
0,44
0,35
0,15
0
0,56
0,19
IgY anti-
ST*
0,53
0,55
0,45
0,38
0,20
0
0,56
0,20
* Densité optique à la dilution 500 fois lue à 450 nm

Influence sur les performances
zootechniques
1600
• Notre modèle expérimental
impact sur les performances
• Déficit de croissance
important
Poids à 28 jours (g)
1400
1200
1000
800
600
400
200
• Chute d’ingestiond
• Réaction
à la charge en
salmonelles ?
• Autres causes ?
• Impact négatif n
sur l’ICl
MSi (g/poulet/jour)
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0
TP
TN

Influence sur les performances
zootechniques (2)
1600
1400
• Ajout de jaune à la ration
• Permet de combler
partiellement le déficit d
!
• Pourquoi pas plus ?
• Ajout d’IgY d
spécifiques
• absence d’effet d
significatif !
MSi (g/poulet/jour)
Poids à 28 jours (g)
1200
1000
800
600
400
200
0
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
TP JEL TN

Elimination des salmonelles ?
• Bactériologie dans les fientes
• Réduction significative de l’excrl
excrétion
à J7
• Effet linéaire de la dose d’IgY d
spécifiques
• Ensuite, grande variabilité : NS
8
6
4
2
5% Jaune HI
5% Jaune NI
Contrôle
0
3 10 24
Jours post- infection

Elimination des salmonelles ? (2)
• qPCR dans les contenus caecaux
• Effet linéaire de la dose d’IgY d
spécifiques
à J7
• Grande variabilité ! : NS
8
6
4
2
5% Jaune HI
5% Jaune NI
Contrôle
0
3 10 17 24
Jours post-infection

Essai d’immunisation d
passive
• Conclusions
• Résultats mitigés
• Notamment, pas de liaison claire à la dose d’IgY d
distribuée
• Hypothèses
• Potentiel anti-Salmonella
du jaune NI
• Impact des IgY non spécifiques ?
• Autres composés s bénéfiques b
du jaune d’œd
’œuf ?
• Dégradation
trop importante en amont de
l’intestin ?

Sensibilité des IgY à la digestion
• Approches
• In vitro : incubations
• In vivo : essai de gavage
• Conclusions
• Résistance
partielle des IgY à la digestion
• Même si effet protecteur du jaune d’œd
’œuf
Recherche de protections additionnelles
pour maximiser le potentiel anti-salmonelles
de l’additifl

Conclusions
• Potentiel in vitro certain
• Résultats
in vivo moins consistants
• Améliorations
encore à trouver
• Protection en priorité !
• Composantes économiques…

Remerciements
Pour toute information complémentaire :
Email : marcq.c@fsagx.ac.be ; Tél : 081/62.21.33
Web : www.fsagx.ac.be/zt.
• ATISA a.s.b.l. et BIOPOLE
s.a.,
• Le Centre Wallon de Biologie
Industrielle (CWBI)
• Le Ministère de l’Agriculture
l
de la Région R
Wallonne (Service
Public de Wallonie, Direction générale
opérationnelle “Agriculture, Ressources
naturelles et Environnement”)