Projet de l'UMR EPOC - Environnements et paléoenvironnements ...
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mo<strong>de</strong> d’action <strong>et</strong> les eff<strong>et</strong>s <strong>de</strong>s polluants sur<br />
<strong>de</strong>s modèles cellulaires non mammifères (cf.<br />
axe 1). Ils sont susceptibles à terme <strong>de</strong><br />
constituer <strong>de</strong>s alternatives à l’expérimentation<br />
animale. Dans c<strong>et</strong>te optique, nous proposons<br />
également <strong>de</strong> développer <strong>de</strong>s tests<br />
d’écotoxicité sur <strong>de</strong>s embryons <strong>et</strong> <strong>de</strong>s prolarves<br />
<strong>de</strong> poissons. Des tests <strong>de</strong> ce type<br />
existent déjà pour l’évaluation <strong>de</strong> la toxicité <strong>de</strong><br />
polluants hydrophiles ou d’effluents liqui<strong>de</strong>s<br />
(OCDE TG210 <strong>et</strong> TG212). En revanche, aucun<br />
test satisfaisant n’existe à l’heure actuelle pour<br />
l’évaluation <strong>de</strong> l’écotoxicité <strong>de</strong>s substances<br />
hydrophobes ou <strong>de</strong>s matrices sédimentaires.<br />
Nous proposons <strong>de</strong> développer un test embryolarvaire<br />
sur un poisson modèle ainsi que sur<br />
une ou <strong>de</strong>ux espèces autochtones. Nous<br />
privilégierons un mo<strong>de</strong> d’exposition réaliste<br />
d’un point <strong>de</strong> vue environnemental (sédimentcontact)<br />
<strong>et</strong> une approche multi-marqueurs<br />
perm<strong>et</strong>tant <strong>de</strong> prendre en compte les eff<strong>et</strong>s<br />
induits à différents niveaux d’organisation<br />
biologique <strong>et</strong> ceci pour <strong>de</strong>s molécules toxiques<br />
à mo<strong>de</strong>s d’action variés. Outre le<br />
développement <strong>et</strong> la validation du protocole <strong>de</strong><br />
contamination du sédiment <strong>et</strong> d’exposition <strong>de</strong>s<br />
embryons, nous définirons les marqueurs<br />
d’eff<strong>et</strong>s les plus sensibles <strong>et</strong> les plus pertinents<br />
<strong>et</strong> optimiserons leur mesure sur les embryons<br />
<strong>et</strong>/ou les larves.<br />
Nous souhaitons m<strong>et</strong>tre à profit ces tests<br />
embryo-larvaires pour l’étu<strong>de</strong> <strong>de</strong>s polluants<br />
organiques tels que les HAP, les pestici<strong>de</strong>s, les<br />
alkyl-phénols ou les substances pharmaceutiques,<br />
en relation avec les thèmes<br />
développés dans les axes 1 <strong>et</strong> 2. Ils doivent<br />
également perm<strong>et</strong>tre d’évaluer <strong>et</strong> <strong>de</strong><br />
caractériser les eff<strong>et</strong>s <strong>de</strong> polluants en mélange<br />
<strong>et</strong> d’étudier les eff<strong>et</strong>s matriciels sur la<br />
biodisponibilité <strong>et</strong> la toxicité <strong>de</strong> ces substances.<br />
Nous développerons pour cela <strong>de</strong>s métho<strong>de</strong>s<br />
d’analyse :<br />
1. <strong>de</strong>s polluants ou <strong>de</strong> leurs métabolites dans<br />
les embryons <strong>et</strong> larves ainsi que,<br />
2. <strong>de</strong>s marqueurs d’eff<strong>et</strong>s pour différentes<br />
fonctions <strong>et</strong> à différents niveaux<br />
d’intégration biologique.<br />
Les mo<strong>de</strong>s d’actions <strong>de</strong>s polluants pouvant être<br />
très variés, nous développerons une approche<br />
<strong>de</strong> type protéomique pour une caractérisation<br />
plus fine <strong>et</strong> précise <strong>de</strong>s eff<strong>et</strong>s à l’échelle<br />
moléculaire. Par ailleurs, <strong>de</strong>s analyses par RT-<br />
PCR quantitative <strong>et</strong> hybridation in situ seront<br />
également utilisées pour suivre l’expression <strong>de</strong><br />
gènes impliqués dans <strong>de</strong>s processus<br />
biologiques variés (biotransformation <strong>et</strong><br />
élimination <strong>de</strong>s toxiques, réparation <strong>de</strong>s lésions<br />
<strong>de</strong> l’ADN, stress oxydatif, métabolisme<br />
général, stéroïdogénèse).<br />
ACTION 3.3 : ETUDE DES EFFETS AU<br />
NIVEAU DU CYCLE DE VIE<br />
Un autre proj<strong>et</strong> <strong>de</strong> recherche concernera la<br />
caractérisation <strong>de</strong>s eff<strong>et</strong>s <strong>de</strong>s polluants<br />
organiques sur l’ensemble du cycle <strong>de</strong> vie <strong>de</strong><br />
quelques espèces modèles (medaka japonais,<br />
poisson zèbre, truite, huître creuse) en<br />
associant <strong>de</strong>s mesures d’eff<strong>et</strong>s du niveau<br />
moléculaire jusqu’au niveau physiologique.<br />
Les principales fonctions biologiques<br />
(croissance, reproduction, intégrité génétique,<br />
immunité …) seront examinées afin <strong>de</strong> dresser<br />
un diagnostic fiable <strong>de</strong> l’état <strong>de</strong> santé <strong>de</strong>s<br />
animaux exposés. L’objectif ultime consiste<br />
d’une part à déterminer les sta<strong>de</strong>s <strong>de</strong><br />
développement les plus vulnérables <strong>et</strong> d’autre<br />
part à modéliser les conséquences <strong>de</strong> c<strong>et</strong>te<br />
exposition à l’échelle d’une population en<br />
utilisant notamment <strong>de</strong>s modèles d’allocation<br />
d’énergie (DEB) ou <strong>de</strong> dynamique <strong>de</strong>s<br />
populations (individu centré). Ces recherches<br />
seront menées en collaboration avec<br />
IFREMER (Dr. V. Loizeau).<br />
Enfin, dans le but <strong>de</strong> prédire les conséquences<br />
<strong>de</strong>s changements hydro-climatiques futurs à<br />
l’échelle locale ou planétaire sur l’état <strong>de</strong> santé<br />
<strong>de</strong>s espèces aquatiques, il nous paraît essentiel<br />
d’étudier les eff<strong>et</strong>s combinés <strong>de</strong> la pollution <strong>et</strong><br />
<strong>de</strong> l’augmentation <strong>de</strong> température <strong>et</strong>/ou <strong>de</strong> la<br />
réduction <strong>de</strong>s teneurs en O 2 dissous dans les<br />
eaux sur les espèces aquatiques <strong>et</strong> plus<br />
particulièrement sur les espèces piscicoles dont<br />
tout ou partie du développement embryonnaire<br />
est réalisé au contact du sédiment. Dans un<br />
premier temps, ces travaux seront conduits sur<br />
une ou <strong>de</strong>ux espèces modèles dans les<br />
conditions contrôlées <strong>de</strong> laboratoire. Ils seront<br />
ensuite étendus à <strong>de</strong>s espèces autochtones<br />
(salmonidés, esturgeon) au sein d’un ou <strong>de</strong>ux<br />
sites ateliers.<br />
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