熊本大学学術リポジトリ Kumamoto University Repository System
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7-4)ヒトメラ’一マ細胞株におけるSPARCmMA<br />
および蛋白質の発現<br />
・11種類のメラノーマ細胞株と1種類の培養メラノサイト細胞における、SPAR幻<br />
mRNACD発現をQuantitativeRT-PCRにて確認した(図9A)。その結果､調べた11<br />
種類中10種のメラノーマ細胞株と培養メラノサイト細胞株においてSPARC遺伝子<br />
の発現が観察された。<br />
さらに、同じ細胞株におけるSPARC蛋白質心発現をVVesternblot法にて確認し<br />
た(図,B)。その結果、RT-PCR法と同様に、11種類中10種のメラノーマ細胞株<br />
と培養メラノサイト細HfZMi栄においてSPARC蛋白質の発現を認めた。<br />
図少<br />
A<br />
2515 ひ<br />
1 0<br />
(E芯平二○匹江こい)轡扇巨⑩〕巨一⑩シ渭一⑩世<br />
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¯戸Illllll----■<br />
詩山一の昼<br />
臓如、錘毎一コ⑩一<br />
野エニ鱒六○<br />
m印、障句『。⑪一.<br />
鍔○コF一m割嬉<br />
卑、不二mF‐岬、<br />
劃二頓曼口<br />
興⑦噂四<br />
鱒伽不二mF上鍾<br />
一房。。一.色、<br />
宝、エニ鐘▲<br />
】鱒エ、三コ<br />
‐可<br />
且」<br />
SPARC蕊鯉<br />
1234567BglO1112<br />
三<br />
円<br />
譲議…。<br />
6口蘭域i 』蕊?q･UUUv:SF 45四、<br />
図9.メラノーマ細胞株におけるSHRCmRNAおよび蛋白質の発現<br />
(A)real-timeRT-PCR法によるヒトメラノーマ細胞株〔LancSl-11)および培養メラノサイト<br />
(HEMn;Lanel2)におけ患SPARCmRNA②発現解析。SPARCmRNAの相対比はSPARC/pactin比として算出したoLanesl:164,2:888meL3:HM3K0,4:CRL1579,5:S26meL6:G361,7:<br />
MWVo,8;8K-11匹L-28,9;SK-通L-19,10:Cclo38,11:H邸V-L1Z:HEIVIn(B)杭ヒトSPARCモ<br />
ノクローナル抗体を用いたウエスタンプロット法によるヒトメラノーマ細胞株(LanesL11)および培<br />
養(HEnln;Lanel2)におけるSPARC蛋白質②発現解析。Laneは図Aと同様。<br />
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