Candida - SunHope.it
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<strong>Candida</strong> dubliniensisE’ sempre più spesso isolata dal cavo orale di pazienti HIV-pos<strong>it</strong>ivied è spesso implicata in casi di infezione ricorrente a segu<strong>it</strong>o d<strong>it</strong>erapia antimicotica.Test di germinazione in sieroE’ un saggio morfologico microscopico che viene ab<strong>it</strong>ualmentepraticato e che consente di porre in evidenza la formazione di tubuligerminativi dopo2-3 ore di incubazione a 37°C di cellule di <strong>Candida</strong>,provenienti da una colonia, in siero umano o bovinoIn CHROMagar <strong>Candida</strong>,dopo 48 h di incubazione allatemperatura di 37° C lecolonie di C. albicans uncolore verde chiaro, mentrequelle di C. dubliniensisappaiono verde scuro,C.albicans e C.stellatoidea producono tubigerminativi senza restringimento nel puntod’origine, mentre C.tropicalis può presentare,anche se raramente, tubi germinativi conrestringimento nel punto d’origineProfilo biochimicoLo studio della capac<strong>it</strong>à di fermentare o assimilarecarboidrati diversi rappresenta ancora oggi un mezzoparticolarmente idoneo per l’identificazione di biotipi indiverse specie <strong>Candida</strong>MYCOTUBEMediante un conten<strong>it</strong>ore a penna divisoin scomparti, vengono insemenzatisimultaneamente 8 substratiLa lettura avviene dopo 24-48 ore diincubazione a 35 o C mediante decodificadi un codice numericoTest di assimilazionedi composti di carbonioBIOTIPIZZAZIONE MOLECOLAREI caratteri genotipici di numerosi ceppi di <strong>Candida</strong> sono oggistudiati grazie all’impiego di tecniche di biologia molecolarePulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE)L’impiego della tecnica di elettroforesi a campi elettrici alternati evidenziaesistenza di cariotipi differenti all’interno della stessa specieStudio delle sequenze dei geni 16S e 23S dell’RNA ribosomico.L’rDNA contiene regioni altamente conservate ma anche sequenze variabili il cu<strong>it</strong>asso di mutazione rimane costante nel tempo e ciò ne permette l’utilizzo a fin<strong>it</strong>assonomici, per la definizione su base genetica di generi e specie.Restriction Fragments Length Polymorphism Analysis (RFLP)Analisi di lunghezza e polimorfismo di frammenti di DNA prodotti da enzimi direstrizioneRandom Amplified Polymorphic DNA (RAPD)Analisi di polimorfismo del DNA amplificato in Polymerase Chain Reaction (PCR)casualmente