Centrifree® Ultrafiltratie units - Millipore

Hoe dient u Centrifree® Ultrafiltratie units te gebruiken, vervolg
3. Equilibreer de unit en het monster op de temperatuur die voor uw applicatie nodig is.
4. Draai de unit op 1000-2000 x g zolang als nodig is om het gewenste filtraatvolume te verkrijgen.
Raadpleeg voor richtlijnen met betrekking tot centrifugetijd de paragraaf over ‘Ultrafiltratiesnelheid’.
5. Verwijder de unit voorzichtig uit de centrifugerotor en maak de filtraatbeker met het ultrafiltraat los.
Dek de filtraatbeker af met het meegeleverde deksel totdat het ultrafiltraat kan worden geanalyseerd.
WAARSCHUWING: Zorg er bij het weggooien van gebruikte componenten voor dat u de
voorzorgsmaatregelen volgt voor het afvoeren van zaken die besmet zijn met
mogelijk infectueus of gevaarlijk biologisch materiaal.
Prestatie
De volgende paragrafen gaan over de verschillende prestatiekenmerken, waaronder polarisatiecontrole,
ultrafiltratiesnelheid, membraanprestatie, pH-controle en niet-specifieke adsorptie.
Polarisatiecontrole
Gebruik van een rotor met vaste hoek biedt polarisatiecontrole en minimaliseert de kans op artefacten
door eiwit-eiwitinteractie. De hoek neutraliseert de opbouw van achtergebleven eiwit op het membraanoppervlak,
omdat deze dichte laag naar buiten glijdt en zich ophoopt aan de rand van het membraan. In
een bucket rotor wordt de polarisatielaag over het gehele membraanoppervlak samengepakt, waardoor de
doorstroom van oplosmiddel wordt beperkt.
Eiwitvrij
ultrafiltraat
Ultrafiltratiesnelheid
Doorstroomsnelheid hangt af van de eiwitconcentratie in het monster, startvolume, relatieve centrifugale
kracht (RCK), rotortype en temperatuur. Hoge doorstroomsnelheden worden veroorzaakt door maximaal
membraanoppervlak, polarisatiecontrole en optimale transmembraandruk die wordt bereikt met
monstervolumes groter dan 300 µl. Optimale filtratiesnelheden worden bereikt met 1000–2000 × g. Een
hogere centrifugale kracht verhoogt de doorstroomsnelheid niet significant en wordt niet aanbevolen.
Vergelijking van centrifuge met vaste hoek rotors en met b
Rotor RCK (× g) Typisch ultrafiltraatvolume (µl)
Vaste hoek (33°) 1000 160–170
Bucket 1000 115–120
1 ml normaal menselijk serum, 10 minuten draaien
Krachtvector
Serum of
plasma
4 Centrifree® Ultrafiltratie units