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VIRULÊNCIA DE SALMONELLA ENTERICA SOROVAR ENTERITIDIS NO ESTADO VIÁVEL NÃO CULTIVÁVEL (VNC) Camila Pinheiro do Carmo*, Míriam Teresinha dos Santos *cpbioufv@yahoo.com.br Universidade Federal de Viçosa –Av. PH Rolfs s/n - 36570-000 - Viçosa, MG – Brasil UFV Salmonella é o mais importante agente etiológico de doenças de origem alimentar dentre as bactérias gram-negativas, causando desde doenças severas como febre entérica a doenças brandas como gastroenterites. Tal patógeno, possui uma estratégia de sobrevivência que é a entrada no estado viável não cultivável (VNC). O estado VNC é um estado fisiológico no qual os micro-organismos não conseguem crescer em meios de cultura de rotina utilizados em laboratório, mas permanecem metabolicamente ativos. A entrada no estado VNC leva a alterações morfológicas e fisiológicas, todavia, a síntese de mRNA não cessa, confirmando que as células continuam metabolicamente ativas. Quanto à manutenção da virulência, há controvérsia nos dados encontrados, em alguns trabalhos os patógenos mantêm sua virulência, porém, em outros, os patógenos não permanecem virulentos. Como a expressão de fatores de virulência é observada em patógenos no estado VNC, é de grande importância o estudo de patógenos no estado VNC principalmente para a segurança alimentar. Neste trabalho será avaliado a expressão de fatores de virulência, a capacidade de invasão e aderência em células HeLa e a capacidade de sobrevivência no interior de macrófagos em Salmonella no estado VNC. Para a obtenção de células na fase log, a estirpe será cultivada em caldo BHI a 37°C até alcançar a densidade óptica de 0,3. Células no estado VNC serão obtidas após inoculação em solução fosfato de Butterfield (KH2PO4 7,35 mmol/L) acrescida de 1,2 mol/L de NaCl e incubação por 70 dias a 4°C, constatando-se a perda total da culturabilidade por técnicas de cultivo e a manutenção da viabilidade celular pelo kit LIVE/DEAD. A expressão dos genes fimF, invAe ssaB será avaliada por qRT-PCR e a manutenção da virulência será avaliada por ensaios de aderência e invasão com células HeLa e sobrevivência no interior de macrófagos. Apoio: CNPq e CAPES 17
ACUMULAÇÃO E ACESSIBILIDADE DE FERRO EM COGUMELOS DE Pleurotusostreatus Laélia S. Assunção 1 *, Patrícia Aparecida F. Vieira 1 , Denise Mara S. Bazzolli 1 , Maria Cristina D. Vanetti 1 , Maria Catarina M. Kasuya 1 . *laeliasp2001@yahoo.com.br 1 Universidade Federal de Viçosa, Rua Dona Gertrudes n° 297, Viçosa, Minas GeraisViçosa – MG Cogumelos de Pleurotusostreatusconstituem um alimento com excelente valor nutritivo que podem ser enriquecidos, contribuindo para a mobilidade, biodisponibilidade e transferência de diversos elementos químicos do ambiente para outros organismos. Suplementos minerais e alimentos enriquecidos têm sido utilizados com o intuito de garantir a quantidade necessária de minerais essenciais que possam estar em deficiência na dieta. O ferro (Fe) é um mineral importante para a saúde humana, e sua deficiência é um problema de saúde pública que afeta aproximadamente 24,8 % da população mundial, sendo considerada a desordem nutricional mais comum no mundo, segundo a OMS. Dessa maneira, o enriquecimento de cogumelos de P. ostreatus com Fe pode ser útil na obtenção de uma fonte concentrada e biodisponível desse microelemento. Os objetivos deste trabalho serão enriquecer cogumelos de P. ostreatus cultivados em substratos à base de casca de café suplementados com Fe, avaliar a capacidade de acumulação desse elemento nos cogumelos e verificar a acessibilidade do Fe no cogumelo em relação ao suplemento mineral comercial à base de Fe.Os cogumelos serão produzidos em substrato à base de casca de café adicionado de diferentes concentrações de sulfato ferroso (FeSO4) (0; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0 ou 2,0 mg kg -1 ). Serão determinados a eficiência biológica (EB), o teor de proteínas, as concentrações de Fe e também de Mn, K, P, Ca, Cu, Pb, Cd, S, Cr, Mg,Zn, Li, Ni e Al, em três colheitas consecutivas. Para verificar a acessibilidade do Fe, duas metodologias serão realizadas, a extração sequencial e a digestibilidadein vitro. Amostras dos cogumelos enriquecidos com FeSO4serão avaliadas em comparação ao suplemento mineral comercial contendo FeSO4. Apoio: CAPES e CNPq. 18
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