27.06.2013 Views

DENEYSEL İNTRATİMPANİK STEROİD

DENEYSEL İNTRATİMPANİK STEROİD

DENEYSEL İNTRATİMPANİK STEROİD

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

çözeltisine konuldu. Temporal kemik diseksiyonları Trakya Üniversitesi Tıp Fakültesi Deney<br />

Hayvanları Birimi’nde yapıldı.<br />

Işık Mikroskobisi<br />

Işık mikroskobisi ile incelenmesi planlanan koklealar %10 formalin çözeltisinde, ilk<br />

hafta 4 0 C, ikinci hafta oda sıcaklığında muhafaza edilerek fiksasyon işlemi yapıldı.<br />

Dekalsifikasyon işleminden önce fiksatif madde artıklarını temizlemek için kemikler 2 hafta<br />

tamponlanmış fosfat solüsyonunda bekletildi. Bundan sonra 0.1 M Etilen Diamin Tetra-<br />

Asetik Asit (EDTA-Sigma) solüsyonu hazırlandı ve pH’ı 7.4 olarak ayarlandı. Yaklaşık 3<br />

hafta dekalsifikasyon işlemi sonrasında dokular, derecesi giderek artan alkol serileri ile<br />

dehidrate edildi. Dehidrate edilen dokular, ksilen ile şeffaflaştırıldıktan sonra, parafine<br />

gömülerek rutin parafin takip protokolü tamamlandı (Tablo 2). Fiksasyon ve dekalsifikasyon<br />

işlemleri boyunca bütün solüsyonlar haftalık olarak değiştirildi. Elde edilen parafin bloklardan<br />

4 mikronluk kesitler alınarak, deparafinize ve rehidrate edildikten sonra, Hematoksilen–Eosin<br />

boyası ile boyandı ve Axioplan 2 imaging - Zeiss ışık mikroskobu ile değerlendirildi. Işık<br />

mikroskobisi incelemeleri Trakya Üniversitesi Tıp Fakültesi Patoloji Anabilim Dalı’nda<br />

gerçekleştirildi.<br />

Tablo 2. Rutin parafin takip protokolü<br />

İşlem Kullanılan madde Süre<br />

Tespit %10 formalin 2 hafta<br />

Dekalsifikasyon 0.1 M EDTA 3 hafta<br />

%70 alkol<br />

%70 alkol<br />

%90 alkol<br />

Dehidratasyon<br />

%90 alkol<br />

%96 alkol<br />

%96 alkol<br />

%100 alkol<br />

%100 alkol<br />

%100 alkol<br />

Ksilen<br />

Şeffaflaştırma<br />

Ksilen<br />

Ksilen<br />

Parafin<br />

Emdirme (% 60°C etüv)<br />

Parafin<br />

Gömme Parafin<br />

32<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

1 saat<br />

15 dk<br />

15 dk<br />

15 dk<br />

1 saat<br />

1 saat

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!