DENEYSEL İNTRATİMPANİK STEROİD
DENEYSEL İNTRATİMPANİK STEROİD
DENEYSEL İNTRATİMPANİK STEROİD
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
çözeltisine konuldu. Temporal kemik diseksiyonları Trakya Üniversitesi Tıp Fakültesi Deney<br />
Hayvanları Birimi’nde yapıldı.<br />
Işık Mikroskobisi<br />
Işık mikroskobisi ile incelenmesi planlanan koklealar %10 formalin çözeltisinde, ilk<br />
hafta 4 0 C, ikinci hafta oda sıcaklığında muhafaza edilerek fiksasyon işlemi yapıldı.<br />
Dekalsifikasyon işleminden önce fiksatif madde artıklarını temizlemek için kemikler 2 hafta<br />
tamponlanmış fosfat solüsyonunda bekletildi. Bundan sonra 0.1 M Etilen Diamin Tetra-<br />
Asetik Asit (EDTA-Sigma) solüsyonu hazırlandı ve pH’ı 7.4 olarak ayarlandı. Yaklaşık 3<br />
hafta dekalsifikasyon işlemi sonrasında dokular, derecesi giderek artan alkol serileri ile<br />
dehidrate edildi. Dehidrate edilen dokular, ksilen ile şeffaflaştırıldıktan sonra, parafine<br />
gömülerek rutin parafin takip protokolü tamamlandı (Tablo 2). Fiksasyon ve dekalsifikasyon<br />
işlemleri boyunca bütün solüsyonlar haftalık olarak değiştirildi. Elde edilen parafin bloklardan<br />
4 mikronluk kesitler alınarak, deparafinize ve rehidrate edildikten sonra, Hematoksilen–Eosin<br />
boyası ile boyandı ve Axioplan 2 imaging - Zeiss ışık mikroskobu ile değerlendirildi. Işık<br />
mikroskobisi incelemeleri Trakya Üniversitesi Tıp Fakültesi Patoloji Anabilim Dalı’nda<br />
gerçekleştirildi.<br />
Tablo 2. Rutin parafin takip protokolü<br />
İşlem Kullanılan madde Süre<br />
Tespit %10 formalin 2 hafta<br />
Dekalsifikasyon 0.1 M EDTA 3 hafta<br />
%70 alkol<br />
%70 alkol<br />
%90 alkol<br />
Dehidratasyon<br />
%90 alkol<br />
%96 alkol<br />
%96 alkol<br />
%100 alkol<br />
%100 alkol<br />
%100 alkol<br />
Ksilen<br />
Şeffaflaştırma<br />
Ksilen<br />
Ksilen<br />
Parafin<br />
Emdirme (% 60°C etüv)<br />
Parafin<br />
Gömme Parafin<br />
32<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
1 saat<br />
15 dk<br />
15 dk<br />
15 dk<br />
1 saat<br />
1 saat