teljice trudnica mlađe i starije životne dobi

160
ORIGINAL ARTICLE
Stereološka analiza sinciciotrofoblasta resorpcijske resice posteljice
trudnica mlađe i starije životne dobi
Sergije Marković 1 , Zlata Žigić 1 , Suada Ramić 1 , Jasminka Hadžihalilović 2
1 Zavod za histologiju i embriologiju, Medicinski fakultet, Univerzitet u Tuzli; 2 Prirodno-matematički fakultet, Univerzitet u Tuzli; Tuzla,
Bosna i Hercegovina
Corresponding author:
Sergije Marković,
Univerzitet u Tuzli, Medicinski fakultet,
Univerzitetska 1, 75000 Tuzla,
Bosna i Hercegovina
Phone: +387 35 320 640;
fax: +387 35 320 601
E-mail: sergije.markovic@untz.ba
Originalna prijava:
22. januar 2009.;
Korigirana verzija:
08. mart 2010..;
Prihvaćeno:
01. april 2010.
SAŽETAK
Med Glas Ljek komore Zenicko-doboj kantona 2010; 7(2):160-165
Cilj Odrediti kvantitativne parametre volumenske gustoće i apsolutnog
volumena sinciciotrofoblasta resorpcijske resice kontrolne
i eksperimentalne skupine, te dobijene rezultate uporediti i ustanoviti
postoje li statistički značajne razlike analiziranih strukturnih
parametara resorpcijskih resica u zavisnosti od životne dobi
trudnice.
Metode Istraživanje je izvršeno na 60 humanih posteljica terminske
trudnoće, podijeljenih u dvije skupine: 30 posteljica trudnica
od 20. - 34. godine životne dobi (kontrolna skupina) i 30 posteljica
trudnica od 35. godine životne dobi i više (eksperimentalna skupina).
Stereološka analiza izvršena je mnogonamjenskim testnim
sistemom M-42, uz povećanje objektiva 40x.
Rezultati Prosječna volumenska gustoća sinciciotrofoblasta resorpcijskih
resica eksperimentalne skupine iznosila je Vvss =
(0,489 ± 0,032) mm 0 , a kontrolne grupe Vvsm = (0,389 ± 0,078)
mm 0 . Statistička analiza rezultata Studentovim t-testom pokazala
je kako je volumenska gustoća sinciciotrofoblasta resorpcijskih
resica eksperimentalne skupine bila značajno veća u odnosu na
kontrolnu skupinu (p

UVOD
Optimalna životna dob žene za trudnoću i rađanje
je između 20. i 29. godine života, a trudnoće žena
starijih od 35. godine smatraju se rizičnim (1, 2).
Promjene unutar placentne membrane kroz koju
se vrši razmjena materija između krvi majke i krvi
ploda, u zavisnosti od intenziteta i dužine trajanja
promjene, mogu dovesti do intrauterine patnje i
poremećenog razvoja ploda (3). Ove promjene
mogu imati za posljedicu rađanje hipotrofične i
nedonešene djece, pojavu respiratornog distresa,
akutnu ili hroničnu hipoksiju, povišen perinatalni
morbiditet i mortalitet (4, 5).
Do sada provedena kvantitativna istraživanja
trofoblasta posteljice terminske trudnoće i poroda
odnosila su se na cjelokupni trofoblast
resorpcijskih resica (6-9). Analize strukturnih
komponenti (sinusoidni kapilari, stroma, sinciciotrofoblast)
resorpcijskih resica posteljice,
pokazale su kako su one mjesto najvećih morfoloških
promjena u posteljici za vrijeme desetog
lunarnog mjeseca (8). Kako rizik za djecu raste
kod trudnica starije životne dobi, poznavanje
veličine površina dostupnih za transport tvari
važno je za ocjenjivanje količine hranidbenih
tvari koje mogu biti prenesene fetusu za njegov
normalan rast i razvoj.
Zbog velikog značenja koje se u cijelom svijetu
pridaje utjecaju starije životne dobi na tok i
ishod trudnoće, a zbog nedostatka ispitivanja
kompenzatorne uloge strukturnih dijelova trofoblasta,
sprovedeno je istraživanje u cilju kvantitativnog
određivanja vrijednosti fetomaternalne
izmjene tvari, volumenske gustoće i apsolutnog
volumena sinciciotrofoblasta resorpcijske resice,
posteljice trudnica mlađe i trudnica starije
žđivotne dobi.
MATERIJAL I METODE
Istraživanje je izvršeno na 60 humanih posteljica
terminske trudnoće na Ginekološko-akušerskoj
klinici UKC-a Tuzla, u periodu od decembra
2005. do decembra 2006. godine. Ispitanice su
bile podijeljene u dvije skupine: trudnice od 20.
- 34. godine životne dobi (kontrolna skupina) i
trudnice od 35. godine životne dobi i više (eksperimentalna
skupina). U svakoj skupini istraživalo
se po 30 posteljica. Dob trudnoće određivana
je prema prvom danu zadnje menstruacije kod
Marković et al Stereološka analiza sinciciotrofoblasta
trudnica s redovnim menstruacionim ciklusom,
a potvrđena je UZ pregledom u prvom trimestru
trudnoće.
Sa svake istraživane posteljice najprije su odstranjeni
ovoji i pupkovina. Masa posteljice određivana
je vaganjem (u gramima), a njen je volumen
određivan indirektno, mjerenjem istisnute tekućine
(mm3 ). Za histološku obradu uzimani su uzorci
tkiva debljinom čitavog organa, od horionske do
bazalne ploče (parenhimski dio). Tkivo je fiksirano
u 10% vodenoj otopini neutralnog formalina,
uklopljeno u parafin i rezano na rezove debljine 8
µm. Deparafinizirani rezovi su obojeni hemalaunom
i eozinom.
Za stereološku analizu referentni prostor bila je
resorpcijska resica posteljice, a stereološka analiza
izvršena je na histološkim preparatima. Veličina
uzorka, odnosno potreban broj stereoloških
mjerenja za svaku istraživanu varijablu, u obje
skupine trudnica, određen je postupkom po de
Hoffu (Slika 1) (10). Dobijeni broj ''n'' predstavlja
broj testnih polja koje je trebalo stereološki
analizirati pri 95% intervalu povjerenja, kako rezultat
ne bi odstupao od stvarne vrijednosti prosjeka
populacije za više od 10%.
Slika 1. Formula 1. Postupak po de Hoffu (10)
Stereološka analiza izvršena je mnogonamjenskim
testnim sistemom M-42, uz povećanje
objektiva 40x, te je obuhvatila relativne i apsolutne
varijable. Od relativnih stereoloških varijabli
određena je volumenska gustoća sinciciotrofoblasta
(Vvs). Volumenska gustoća je relativna
stereološka varijabla koja predstavlja udio ispitivane
strukture u jedinici volumena (Slika 2):
Slika 2. Formula za izračunavanje volumenske gustoće (10)
161

162
Medicinski Glasnik, Volumen 7, Number 2, August 2010
Od apsolutnih varijabli određen je apsolutni volumen
(V), kojim je označen ukupni volumen
istraživanih strukturnih komponenti unutar volumena
čitavog organa (mm 3 ) (Slika 3):
Vf =Vvf ·Vo
Slika 3. Formula za izračunavanje apsolutnog volumena (10)
Dobijeni rezultati obrađeni su slijedećim statističkim
metodama: izračunate su aritmetička sredina
(x), standardna devijacija (s) i standardna greška
(SE). Značaj razlike rezultata između posteljica u
odnosu na starost trudnice, određena je Studentovim
t-testom. Koeficijent varijabilnosti (KV)
izračunat je za relativne i apsolutne vrijednosti
istraživanih varijabli u navedenim posteljicama.
REZULTATI
Relativne stereološke varijable
Volumenska gustoća sinciciotrofoblasta (Vvs)
resorpcijskih resica posteljica trudnica mlađe životne
dobi (Vvsm), za istraživane posteljice, kretala
se u rasponu 0,25 - 0,58 mm 0 , a kod trudnica
starije životne dobi (Vvss) u rasponu 0,43 - 0,56
mm 3 . Učestalost volumenske gustoće sinciciotrofoblasta
(Vvs) resorpcijskih resica istraživanih
posteljica trudnica mlađe i starije životne dobi
prikazana je na Grafikonu 1. Prosječna volumenska
gustoća sinciciotrofoblasta resorpcijskih resica
posteljica trudnica mlađe životne dobi iznosila
je Vvsm = (0,389 ± 0,078 mm 0 ), dok je kod trudnica
starije životne dobi iznosila Vvss = (0,489
± 0,032 mm 0 ). Prosječna vrijednost i standardna
devijacija volumenske gustoće sinciciotrofoblasta
(Vvs) resorpcijskih resica istraživanih posteljica
trudnica mlađe i starije životne dobi (mm 0 )
Grafikon 1. Frekvencija rezultata volumenske gustoće sinciciotrofoblasta
(Vvs) resorpcijskih resica istraživanih posteljica trudnica
mlađe i starije životne dobi
Grafikon 2. Prosječna vrijednost i standardna devijacija volumenske
gustoće sinciciotrofoblasta (Vvs) resorpcijskih resica
istraživanih posteljica trudnica mlađe i starije životne dobi (mm 0 )
prikazana je na Grafikonu 2. Volumenska gustoća
sinciciotrofoblasta resorpcijskih resica posteljica
trudnica starije životne dobi imala je značajno
veću vrijednost u odnosu na trudnice mlađe životne
dobi (p

Grafikon 4. Prosječna vrijednost i standardna devijacija apsolutnog
volumena sinciciotrofoblasta (Vs) resorpcijskih resica
posteljica trudnica mlađe i starije životne dobi (cm 3 )
životne dobi (cm 3 ) prikazana je na Grafikonu 4.
Apsolutni volumen sinciciotrofoblasta resorpcijskih
resica posteljica trudnica starije životne dobi
bio je značajno veći u odnosu na trudnice mlađe
životne dobi (p

164
Medicinski Glasnik, Volumen 7, Number 2, August 2010
LITERATURA
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Miletić T, Aberle N, Mikulandra F. Perinatal outcome
of pregnancies in women aged 40 and over. Coll
Antropol 2002; 26:251-8.
Abu-Heija AT, Jallad MF, Abukteish F Maternal and
perinatal outcome of pregnancies after the age of 45.
J Obstet Gynaecol Res 2000; 26: 27-30.
Lawlor D, Shaw M, Johns S. Interpregnancy
interval and risk of preterm birth and neonatal
death:retrospective cohort study. BMJ 2007;
327:313-27.
Jauniaux E, Watson AL, Hempstock J, Bao Y-P, Skepper
JN, Burton GJ. Onset of maternal arterial blood
flow and placental oxidative stress. A possible factor
in human early pregnancy failure. Am J Pathol 2000;
157:2111-22.
Hellström M, Gerhardt H, Kalén M, Li X, Eriksson
U, Wolburg H, Betsholtz C. Lack of pericytes leads
to endothelial hyperplasia and abnormal vascular
morphogenesis. J Cell Biol 2001; 153:543-53.
Van der Velde WJ. Structural changes in the placenta
of smoking mothers: A quantitative study. Placenta
1983; 4:231-40.
Boyd PA Quantitative structure of the normal human
placenta from 10 weeks of gestation to term.
Early Hum Dev 1984; 9: 297-307.
Grbeša Đ, Živković BD. Does the human placenta
differentiate structurally during the 10th lunar month.
Acta Med Croatica 1994; 48:117-21.
Bogdanović G. Uticaj pušenja u trudnoći na morfometrijska
svojstva posteljice i stanje novorođenčeta.
Doktorska disertacija. Tuzla: Medicinski fakultet
Univerziteta u Tuzli, 2005;14-24.
10. Kališnik M.
Temelji stereologije. Ljubljana: Društvo
za stereologijo in kvantitativno analizo slike:
DSKAS, 2002:14-47.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
Mayhew TM. Stereological studies on fetal vascu-
lar development in human placental villi. Placenta
2004; 25: 226-33.
Burton GJ, Reshetnikova OS, Milovanov AP, Teles-
hova OV. Stereological evaluation of vascular adaptations
in human placental villi to differing forms of
hypoxic stress. Placenta 1996; 17: 49-55.
Battistelli M, Burattini S, Pomimi F. Ultrastructural
study on human placenta from intrauterine growth retardation
cases. Microsc Res Tech 2004; 65:150-8.
Vogt Isaksen C. Maternal smoking, intrauterine
growth restriction, and placental apoptosis. Pediatr
Dev Pathol 2004; 7:433-42.
Ramić S, Žigić Z, Alečković M. Stereological anal-
ysis of mature human placenta of pregnant women
of different age. BJBMS 2006; 6:7-10.
Teasdale F, Jean - Jacques G. Morphometric evalu-
ation of the microvillous surface enlargment factor
in the human placenta from midgestation to term.
Placenta 1985; 6:375-81.
Yamada Z, Kitagawa M, Takemura T, Hirokawa K.
Effect of maternal age on incidences of apoptotic and
proliferative cells in trophoblasts of full-term human
placenta. Mol Hum Reprod 2001; 7:1779-85.
Sheiner E, Shoham-Vardi I, Hallak M (2003) Pla-
cental abruption in term pregnancies: Clinical significance
and obstetric risk factors. J Matern Fetal
Neonatal Med 2003; 13: 45-9.

Stereological analysis of syncytiotrophoblast in resorption villi of
placentas of young and older pregnant women
Sergije Marković1 , Zlata Žigić1 , Suada Ramić1 , Jasminka Hadžihalilović2 1 2 Department of Histology and Embryology, School of Medicine, School of Natural Sciences; University of Tuzla, Tuzla, Bosnia and
Herzegovina
ABSTRACT
Marković et al Stereološka analiza sinciciotrofoblasta
Aim To determine quantitative parameters of volume density and absolute volume of syncytiotrophoblast
in resorption villi of control and experimental group, compare the results and search for correlation
between structural parameters of resorption villi and pregnancy age.
Metods The research was performed on 60 human placentas of term pregnancy: 30 placentas of pregnant
women of age 20 - 34 (control group), and 30 placentas of pregnant women of age 35 and older
(experimental group). Stereological analysis was performed on multipurpose testing system M42 with
40 times objective magnification.
Results Average volume density of syncytiotrophoblast in resorption villi of experimental and control
group was Vvss = (0,489 ± 0,032) mm 0 and Vvsm = (0,389 ± 0,078) mm 0 , respectively. Statistical analysis
of results using Student t-test indicated a significantly higher volume density of syncytiotrophoblast
of resorption villi in the experimental than in the control group (p