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Ergebnisse und Diskussion
Da die TLM-defektiven Viren in die Zellen aufgenommen wurden, jedoch
keine cccDNA gebildet wurde, kann gefolgert werden, dass der Infektionsblock
der Viren auf dem Weg von der Zelloberfläche zum Nukleus liegt, denn nur die
rcDNA eintretender Viren, die zum Nukleus gelangt, kann in cccDNA
umgewandelt werden.
Werden die viralen Partikel durch einen endozytischen Weg in die
Wirtszellen aufgenommen, liegen sie nach der Aufnahme in Endosomen vor.
Da der endosomale Aufnahmeweg oft zum Abbau der aufgenommenen
Substanzen führt, muss das aufgenommene Virus aus diesem Weg austreten.
In Endosomen könnten die TLMs nach einem bestimmten Signal exponiert
werden. Dies könnte zur Freisetzung der Viren aus dem endosomalen
Kompartiment führen. Die Exposition eines Fusionssignals während der
Infektion von Wirtszellen wurde für andere Viren beschrieben. So haben z.B.
Homotrimere des Hämagglutinins von Influenza-Viren fusogene Aktivität (als
HA0-Vorläuferproteine). Nach einer endolytischen Spaltung durch eine Furin-
ähnliche Protease entstehen HA1 und HA2. Dieser Spaltungsschritt ermöglicht
die HA-vermittelte Fusion durch Freisetzung bestimmter Sequenzen, die durch
Konformationsveränderungen Membranfusionen induzieren können [133]. Im
Falle des Poliovirus führt die Interaktion des Virus mit seinem Rezeptor zur
Freisetzung des N-myristylierten VP4-Peptids und der Exposition einer
amphipatischen Sequenz von VP1, die in die Wirtsmembran inseriert und so
den Eintritt des Virus in das Zytoplasma ermöglicht [187].
Interessanterweise benötigt die Infektiosität von DHBV die Integrität
beider TLMs. Ein Defekt in TLM2 kann nicht durch ein intaktes TLM1
kompensiert werden. Experimente mit zellpermeablen Kapsiden mit TLM-
HBcAg-Fusionsproteinen zeigten, dass die Zellpermeabilität dieser Partikel
durch die Verwendung zweier TLMs, die in einem ähnlichen Abstand liegen wie
im preS-Teil des DHBV-L, im Vergleich zu nur einem TLM stark verbessert wird
(B. Brandenburg, persönliche Mitteilung). Dies deutet darauf hin, dass beide
TLMs für eine effiziente Permeation benötigt werden und einen synergistischen
Effekt ausüben.
Die oben beschriebenen Ergebnisse könnten durch einen ähnlichen
Mechanismus bei Hepadnaviren erklärt werden. Nach einer Rezeptor-
vermittelten Endozytose des viralen Partikels und dem Eintritt in den
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