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Abb. 3.4.6 Inaktivierung der TLMs führt zu einem Infektiositätsverlust.
Ergebnisse und Diskussion
PDHs wurden mit den rekombinanten Viren (100 MGE) infiziert und drei Tage
später die Etablierung einer produktiven Infektion mit Hilfe indirekter
Immunfluoreszenzfärbung (A) und Immunblot (B) für das virale L-Protein
untersucht.
Die Immunfärbung der Kulturen mit einem L-spezifischen Antikörper zeigte,
dass nur im Falle der mit wt-DHBV infizierten Kulturen de novo-Synthese des
viralen Oberflächenproteins nachgewiesen werden konnte (Abb. 3.4.6 A).
Dieses Ergebnis wurde durch die Immunblotanalyse der zellulären Lysate mit
einem L-spezifischen Antikörper bestätigt (Abb. 3.4.6 B). Im Falle der wt-
infizierten Zellen waren signifikante Signale nachweisbar, während in den
Lysaten der mit DHBV-D2 oder DHBV-D1/2-infizierten Zellen keine L-
spezifischen Signale sichtbar waren, die auf eine produktive Infektion
hingedeutet hätten. Dies könnte entweder dadurch bedingt sein, dass der
verwendete Antikörper die mutierten L-Proteine schlecht erkannte oder dass
tatsächlich sehr wenig L-Protein vorhanden war. Um daher die Etablierung
einer Infektion direkt zu analysieren, wurde die cccDNA-Etablierung und
Amplifikation in den infizierten Zellen untersucht.
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