Die Entwicklung des Innenohrs

Inhaltsverzeichnis
I
Inhaltsverzeichnis
I
II
Inhaltsverzeichnis.............................................................................................. I-III
Zusammenfassung.................................................................................................IV
1. Einleitung.................................................................................................................1
1.1 Bau und Funktion des Innenohrs.............................................................................1
1.2 Das Innenohr entwickelt sich aus einer ektodermalen Plakode. .............................3
1.3 Gewebeinteraktionen und Genaktivitäten induzieren die Ohrplakode
und steuern frühe Musterbildungsprozesse.............................................................5
1.3.1 Mesendodermale Signale induzieren die Ohrplakode.............................................5
1.3.2 Der Einfluß des Hinterhirns auf die Ohrentwicklung. ............................................8
1.3.3 Spezifizierung von Regionen und Zellschicksalen ...............................................10
1.4 Zielsetzung der Arbeit...........................................................................................13
2. Material und Methoden........................................................................................15
2.1 Bezugsquellen .......................................................................................................15
2.2 Puffer und Stammlösungen...................................................................................16
2.3 Antibiotika ............................................................................................................17
2.4 Bakterienstämme...................................................................................................17
2.5 Verwendete Plasmidkonstrukte zur Generierung von in situ-
Hybridisierungsproben..........................................................................................18
2.6 Allgemeine gentechnische Verfahren ...................................................................19
2.7 Arbeiten mit Hühnchenembryonen .......................................................................20
2.7.1 Inkubation von befruchteten Hühnereiern ............................................................20
2.7.2 Präparation von Hühnchenembryonen..................................................................20
2.7.3 Isolierung von Spendergewebe für Transplantationsexperimente ........................20
2.7.4 In ovo Manipulationen an Hühnchenembryonen ..................................................21
2.7.5 Explantation von embryonalem Hühnchengewebe...............................................22
2.8 Zellbiologische Methoden.....................................................................................23
2.8.1 Passagierung und Kryokonservierung von Zellen ................................................23
2.8.2 Kultivierung und Aggregation von Wachtel-Q2bn Zellen....................................23
2.8.3 Kultivierung und Aggregation von CHO.B3.A4-Zellen.......................................24
2.9 Immunohistochemische Arbeitsmethoden ............................................................25
2.9.1 Whole mount in situ Hybridisierung.....................................................................25
2.9.2 Herstellung von Gewebeschnitten mit dem Vibratom ..........................................29
2.9.3 Herstellung von Gefrier-Gewebeschnitten............................................................29