Funktionelle Regulation des Clathrin Adaptor Komplexes 2 (AP2)

Einleitung
(Hirst et al., 2000). GGAs haben einen dreigliedrigen Aufbau mit einer N-terminalen
VHS-Domäne (abgeleited von ihrem Vorkommen in Vps27p/Hrs/STAM), die durch
einen kurzen, unstrukturierten Linker mit der GAT-Domäne (GGA and Tom1)
verbunden ist. Eine zweite, längere und ebenfalls unstrukturierte Hinge-Sequenz
verbindet die GAT-Domäne mit der -Ear-Domäne. Cargo-Membranproteine, wie
Mannose-6-Phosphat-Rezeptoren (MPRs) (Puertollano et al., 2001) und Sortilin
(Nielsen et al., 2001) binden über Dileucinsignale (DxxLL) an die VHS-Domäne. Hier
soll angemerkt werden, dass sich diese Dileucinsignale (DxxLL) von den sauren
Dileucinsignalen ([ED]xxxL[LI]) unterscheiden, an die AP2 bindet (siehe Kapitel
1.3.4.). Im Rahmen der Rekrutierung an die Membran binden GGAs über die GAT-
Domäne an Arf1 in GTP gebunder Form (Collins et al., 2003; Shiba et al., 2003).
Über die -ear Domäne von GGA binden andere Proteine, die an der Vesikelbildung
am Golgi beteiligt sind, wie z. B. EpsinR, Eps15 und -Synergin mit der
Erkennungssequenz [DE]nG[PDE)] (Kent et al., 2002; Hirst et al., 2003).
1.2.4. Heterotetramere Adaptorkomplexe (APs)
Bis dato konnten vier heterotetramere Adaptorkomplexe identifiziert werden. Bereits
1984 konnten durch die Arbeit von Pearse und Robinson AP1 und AP2 aus
Rinderhirn aufgereinigt und identifiziert werden (Pearse and Robinson, 1984). Die
Identifizierung von AP3 (Dell'Angelica et al., 1997; Simpson et al., 1997) und AP4
(Dell'Angelica et al., 1999; Hirst et al., 1999) gelang 1997 bzw. 1999. Alle 4
Adaptorkomplexe kommen in Säugetieren vor und werden ubiquitär exprimiert. Die
Adaptorkomplexe AP1-3 werden in allen eukaryotischen Zellen exprimiert, während
AP4 in S. cerevisiae, D. melanogaster, C. elegans und S. pombe nicht vorkommt
(Boehm and Bonifacino, 2001). AP4 besitzt als einziger Vertreter der
heterotetrameren Adaptorkomplexe keine typische Clathrin-Box-Sequenz (1.3.1.),
weshalb die Beteiligung von AP4 an der Bildung von CCVs umstritten ist. Die genaue
Lokalisation der Adaptorkomplexe, d.h. die Membran, an die sie binden, sowie die
Transportroute an der sie beteiligt sind, konnte bislang nur für AP2 eindeutig geklärt
werden. AP2 bindet an die Plasmamembran und vermittelt dort die Internalisierung
von Membranproteinen. Für AP1, AP3 und AP4 konnten ähnliche Transport- und
Sortierungsfunktion am TGN und/oder den Endosomen gezeigt werden (Tab.1.1.).
Der Nachweis solcher interner Transportrouten ist aber, bedingt durch die Vielzahl
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