Lymphozytentransformationstest (LTT) für ... - IMD Berlin

Institut für Medizinische Diagnostik Berlin – Potsdam MVZ GbR
Laboratoriumsmedizin
• Mikrobiologie • Infektionsepidemiologie • Humangenetik • Transfusionsmedizin
Privatpatient
Lymphozytentransformationstest (LTT) für Infektionserreger
Dr. med. Volker von Baehr
Dr. med. Volker von Baehr
Diagnostik-Info 190
Mit serologischen Methoden kann eine stattgefundene
Infektion mit fakultativ persistierenden Bakterien
relativ sicher nachgewiesen werden. Es kann aber
nicht sicher auf den aktuellen Aktivitätsgrad der persistierenden
Infektionserkrankung geschlossen werden.
Es hat sich erwiesen, dass die Lücken der serologischen
Diagnostik zum großen Teil durch zelluläre Verfahren
wie den LTT geschlossen werden können.
bitte wenden
Patient
Geburtsdatum Tagesnummer
Mustermann-Mappe, LTT-HER
01.01.2001 0326130000
Privatpatient
Eingang 05.04.2013 Ausgang 05.04.2013 Versicherung gratis Ken
Mit dem Lymphozytentransformationstest (LTT) werden nach erfolgter Primärinfektion in der Regel lebenslang
antigenspezifische T - Lymphozyten im Blut nachge- Untersuchung positiv sind / Material - unabhängig :
von der Aktivität der Viren.
wiesen. Die Spezifität des LTT muss durch die Auswahl Serologisch kann meist nur im frühen Infektionsstadium
von geeigneten
und Chargen - abhängig geprüften
zwischen einer latenten
und einer aktiven Infektion unterschieden
werden.
Im Unterschied zu den fakultativ
SI Hinweise zur Untersuchungsm
Testantigenen gesichert sein. Für infektiologische Fragestellungen
Patient
Herpes-simplex
Die Zahlen rechts neben der Ba
Privatpatient
Geburtsdatum Tagesnummer I
5,0
finden dafür aufgereinigte Lysate, isolierte persistierenden Infektionen (siehe unten) ist der Stimulationsindizes LTT bei (SI) für das
Mustermann-Mappe, Privatpatient
LTT-HER 01.01.2001 0326130000
Patientenzellen zugesetzt wird (
spezifische Bestandteile von Infektionserregern und rekombinant
hergestellte 05.04.2013 Ausgang
den Herpesviren nach erfolgter Primärinfektion meist
Herpes-simplex II
Der Stimulationsindex ist der Qu
Eingang
Erregerantigene 05.04.2013 Versicherung
Verwendung. lebenslang gratis Kennz. OI/II/III
4,9
positiv. Hier gibt die Stärke der Antigeninduzierten- Reaktion und der uns
(Leerwert in cpm, angegeben is
Auskunft darüber, ob sich das Immunsystem häufig
Untersuchung / Material :
LTT auf Herpesviren
Cytomegalievirus ( Heparinblut )
27,4 Paralleluntersuchungen). Ein SI
oder aktuell verstärkt mit dem Erreger auseinandersetzt.
Epstein-Barr-Virus
Daher ist ein hoher Stimulationsindex 7,0 im Allergen-spezifischen LTT ein T-Zellen im
dreifache zelluläre Aktivierung d
zum Leerwert und beweist die E
Besonders
Patient
wichtig ist der erregerspezifische
GeburtsdatumLTT bei
Tagesnummer
Patient
Geburtsdatum
Hinweis auf eine endogene Reaktivierung oder
Ergebnis).
eine
Ein SI < 2 gilt als sich
SI
obligat latenten Infektionen (z.B. CMV, EBV oder an-
Tagesnummer Hinweise zur Untersuchungsmethode:
Mustermann-Mappe, LTT-HER 01.01.2001 0326130000
zwischen 2 und 3 sind als grenz
Mustermann-Mappe, Herpes-simplex I LTT-HER 01.01.2001 5,00326130000
Die Zahlen persistierend Varizella rechts
zoster neben Virus der aktive Balkengrafik Infektion.
sind die
4,8 bzw. fragliche Sensibilisierung),
deren Herpesviren), Eingang 05.04.2013 da die Ausgang Antikörpernachweise
05.04.2013 Versicherung Stimulationsindizes gratis(SI) für das Kennz. jeweilige OI/II/III Antigen, das den
Eingang 05.04.2013 Ausgang 05.04.2013 Versicherung Patientenzellen gratis zugesetzt wird Kennz. (Mittelwert OI/II/IIIvon 3-fach Ansätzen).
Die Antigenkontrolle dient aussc
Der Stimulationsindex Humanes Herpesvirus ist der Quotient 6 aus der
4,9 Reaktionsfähigkeit der Lymphoz
Untersuchung
Herpes-simplex
/ Material
II
:
4,9
Antigeninduzierten- und der unstimulierten
( Heparinblut
Thymidineinbaurate
)
Untersuchung / Material : ( Heparinblut )
Influenza / Candida -Mischantig
(Leerwert in cpm, angegeben ist der Mittelwert von 3
verwendet, bei dem eine T-zellu
Cytomegalievirus
27,4 Paralleluntersuchungen). Ein SI > 3 bedeutet eine mehr als
vorhanden ist.
dreifache zelluläre Aktivierung durch das Antigen im Vergleich
PWM ist als Mitogen Indikator fü
SI zum Hinweise Leerwert zur und Untersuchungsmethode:
beweist die Existenz von zirkulierenden
bei Probeneingang im Labor.
Epstein-Barr-Virus
7,0 SI Allergen-spezifischen Hinweise zur Untersuchungsmethode:
T-Zellen im Patientenblut (positives
Herpes-simplex I
5,0 Die Zahlen rechts neben der Balkengrafik sind die
Leerwert (Negativkontrolle) 1654 ( Normalwert < 4000 cpm)
Herpes-simplex I
5,0 Ergebnis). Die Stimulationsindizes Zahlen Ein rechts SI < neben 2 (SI) gilt für als der das sicher Balkengrafik jeweilige negativ. Antigen, sind Ergebnisse die das den
zwischen Patientenzellen Stimulationsindizes 2 und zugesetzt 3 sind (SI) als für wird grenzwertig das (Mittelwert jeweilige anzusehen Antigen, von 3-fach das (schwache Ansätzen). den
Varizella zoster Virus
4,8 bzw. fragliche Positivkontrolle Sensibilisierung), (Antigen) die ggf. 36411 kontrolliert cpmwerden sollte. 22,0
Herpes-simplex II
4,9 Patientenzellen Der Stimulationsindex zugesetzt ist der wird Quotient (Mittelwert aus von der 3-fach Ansätzen).
Herpes-simplex II
4,9 Der Antigeninduzierten- Stimulationsindex
Mitogenkontrolle
und ist
(PWM)
der der unstimulierten Quotient aus der
52334
Thymidineinbaurate
cpm
Die Antigenkontrolle dient ausschließlich dem Nachweis der
31,6
Antigeninduzierten- (Leerwert in cpm, angegeben und der unstimulierten ist der Mittelwert Thymidineinbaurate
von 3
Humanes Herpesvirus 6
4,9
Cytomegalievirus
27,4 Reaktionsfähigkeit (Leerwert Paralleluntersuchungen). Ergebnisse in cpm, von angegeben > der 8 bei Lymphozyten. der Ein Mitogenkontrolle SI ist > der 3 bedeutet Mittelwert Hier wird PWM eine von eine und mehr 3 Tetanus > 3 bei als der / Antigenkontrolle (Tetanus/Candida/Influenza) sichern die Aus
Cytomegalievirus
27,4 Influenza Paralleluntersuchungen). dreifache / zelluläre Candida Aktivierung -Mischantigenprobe Ein SI durch > 3 bedeutet das als Antigen Recall-Antigen
eine im mehr Vergleich als
verwendet, dreifache zum Leerwert zelluläre bei und dem beweist Aktivierung eine T-zelluläre die Existenz durch Sensibilisierung das von Antigen zirkulierenden im Vergleich immer
Epstein-Barr-Virus
7,0 vorhanden zum Allergen-spezifischen Leerwert ist. und beweist
Auf alle aufgeführten T-Zellen die Existenz im Viren Patientenblut von zirkulierenden
der Herpesgruppe (positives
Epstein-Barr-Virus
zeigen sich positive Reaktionen. Dieses ist
7,0 PWM Allergen-spezifischen Ergebnis). ist als Ein Mitogen SI < 2 Indikator gilt T-Zellen als sicher für im die Patientenblut negativ. Vitalität Ergebnisse der (positives Immunzellen
bei Ergebnis). zwischen Probeneingang latente 2 Ein und Infektionen SI 3 < sind im 2 gilt Labor. als als grenzwertig mit sicher diesen negativ. anzusehen Viren. Ergebnisse (schwache
Varizella zoster Virus
4,8 zwischen bzw. Auf fragliche HSV 2 und Sensibilisierung), I, 3 sind HSV als II, grenzwertig EBV, die Varizella-zoster-Virus ggf. anzusehen kontrolliert (schwache werden sollte. und HHV-6 sind die Stimulationsindizes nu
Leerwert Varizella (Negativkontrolle)
zoster Virus 1654 ( Normalwert < 4000 cpm) 4,8 bzw. ausgefallen. fragliche Sensibilisierung), Dieses spricht die ggf. gegen kontrolliert eine werden aktuelle sollte. Auseinandersetzung des Immunsystems
Positivkontrolle (Antigen) 36411 cpm
22,0 Die Antigenkontrolle aktuelle Aktivität). dient ausschließlich Die Reaktionen dem Nachweis auf Cytomegalievirus der
Humanes Herpesvirus 6
4,9
(CMV) ist dagegen deutlich stärk
Die Reaktionsfähigkeit Antigenkontrolle der dient Lymphozyten. ausschließlich Hier dem wird Nachweis eine Tetanus der /
Humanes Herpesvirus 6
4,9 anderen Viren. Hier kann eine derzeitige Reaktivierungen nicht ausgeschlossen werden,
Mitogenkontrolle (PWM) 52334 cpm
31,6 Reaktionsfähigkeit Influenza / Candida der -Mischantigenprobe Lymphozyten. Hier als wird Recall-Antigen
eine Tetanus /
Influenza verwendet, klinische / Candida bei dem Symptomatik eine -Mischantigenprobe T-zelluläre vorliegt. Sensibilisierung als Recall-Antigen immer
Ergebnisse von > 8 bei der Mitogenkontrolle PWM und > 3 bei der Antigenkontrolle (Tetanus/Candida/Influenza) verwendet, vorhanden ist. bei dem sichern eine T-zelluläre die Auswertbarkeit Sensibilisierung der Untersuchung immer .
vorhanden PWM ist als ist. Mitogen Indikator für die Vitalität der Immunzellen
PWM bei Probeneingang ist als Mitogen im Indikator Labor. für die Vitalität der Immunzellen
Auf alle aufgeführten Viren der Herpesgruppe zeigen sich positive bei Probeneingang Reaktionen. im Dieses Labor. ist typisch für bestehende
Leerwert (Negativkontrolle) 1654 ( Normalwert < 4000 cpm)
latente Leerwert Infektionen (Negativkontrolle) mit diesen 1654 Viren. ( Normalwert < 4000 cpm)
Auf Positivkontrolle HSV I, HSV (Antigen) II, EBV, Varizella-zoster-Virus 36411 cpm und HHV-6 22,0 sind die Stimulationsindizes nur schwach bis mittelgradig
Positivkontrolle (Antigen) 36411 cpm
ausgefallen. Dieses spricht gegen eine aktuelle Auseinandersetzung
22,0
des Immunsystems mit diesen Erregern (keine
Mitogenkontrolle (PWM) 52334 cpm
31,6
aktuelle Mitogenkontrolle Aktivität). (PWM) Die Reaktionen 52334 cpm auf Cytomegalievirus 31,6 (CMV) ist dagegen deutlich stärker im Vergleich zu den
anderen Ergebnisse von Viren. > 8 bei Hier der Mitogenkontrolle kann eine derzeitige PWM und > 3 Reaktivierungen bei der Antigenkontrolle nicht (Tetanus/Candida/Influenza) ausgeschlossen sichern werden, die Auswertbarkeit falls eine der entsprechende
Untersuchung . Dr. med. Vo
Ergebnisse von > 8 bei der Mitogenkontrolle PWM und > 3 bei der Antigenkontrolle (Tetanus/Candida/Influenza) sichern die Auswertbarkeit der Untersuchung .
klinische Symptomatik vorliegt.
Auf alle aufgeführten Viren der Herpesgruppe zeigen sich positive Reaktionen. Dieses ist typisch für bestehende
Auf latente alle Infektionen aufgeführten mit Viren diesen der Viren. Herpesgruppe zeigen sich positive Reaktionen. Dieses ist typisch für bestehende Abb. 1 Befundbeispiel: LTT-Herpesviren
latente Auf HSV Infektionen I, HSV II, EBV, mit diesen Varizella-zoster-Virus Viren. und HHV-6 sind die Stimulationsindizes nur schwach bis mittelgradig
Auf ausgefallen. HSV I, HSV Dieses II, EBV, spricht Varizella-zoster-Virus gegen eine aktuelle und Auseinandersetzung HHV-6 sind die Stimulationsindizes des Immunsystems nur mit schwach diesen bis Erregern mittelgradig
LTT auf fakultativ (keine
aktuelle ausgefallen. persistierende
Aktivität). Dieses Die spricht Reaktionen gegen Bakterien
Abhängig von der Erregerspezies und vom Infekeine
auf Cytomegalievirus aktuelle Auseinandersetzung (CMV) ist dagegen des Immunsystems deutlich stärker mit im diesen Vergleich Erregern zu den (keine
aktuelle anderen Aktivität). Viren. Hier Die kann Reaktionen eine derzeitige auf Cytomegalievirus Reaktivierungen (CMV) nicht ausgeschlossen ist dagegen tionsstadium deutlich werden, stärker ist in
falls im 5
eine Vergleich - 15% der
entsprechende zu den Fälle mit seronegativen
Eine weitere klinische anderen wichtige Viren. Symptomatik Hier Indikation kann vorliegt. eine derzeitige für den Reaktivierungen erregerspezi- nicht ausgeschlossen Verläufen werden, zu rechnen falls eine entsprechende
(v.a. bei der Borreliose und Yersiniose).
Dr. Zudem med. Volker ist von ein Baehrpositiver serologischer Befund
fischen LTT klinische sind Symptomatik fakultativ vorliegt. persistierende Infektionen
mit z.B. Chlamydien (trachomatis und pneumoniae), nicht beweisend für ein aktuell mit einem entsprechenden
Erreger assoziierten Krankheitsbild sondern
Yersinien, Borrelia burgdorferi, Helicobacter oder Lamblien.
Bei den genannten Erregern sind die Symp- häufig Folge einer (manchmal unbemerkten) früheren
tome der Erkrankung meist unspezifisch. Der Labornachweis
einer Infektion erfolgt mit der Bestimmung ren auch nach ausgeheilter Infektion, z.B. nach
Infektion. Die erregerspezifischen Antikörper persistie-
einer
erregerspezifischer IgG-, IgM- und zum Teil auch
IgA - Antikörper im Blut (serologische Diagnostik).
Der direkte Erregernachweis mittels mikrobiologischer
Kulturverfahren oder DNA - Nachweis (z.B. Borrelien-
PCR) ist selten hilfreich, da sich die genannten Erreger
kaum im Blut aufhalten. Hier ist allenfalls ein positives
Ergebnis wertvoll. Negative Resultate hingegen können
eine aktive Infektion nicht ausschließen. Die serologische
Diagnostik ist ebenfalls mit Problemen behaftet.
Spezifische Antikörper treten erst 2 bis 6 Wochen
oder noch später nach einer Infektion auf.
adäquaten antibiotischen Behandlung, über Jahre.
Berlin
Nicolaistraße 22, 12247 Berlin (Steglitz)
Tel (030) 77 001 220, Fax (030) 77 001 236
info@imd-berlin.de, www.imd-berlin.de
Potsdam
Friedrich-Ebert-Straße 33, 14469 Potsdam
Tel (0331) 28095 0, Fax (0331) 28095 99
info@imd-potsdam.de, www.medlab-pdm.de
www.inflammatio.de

Der LTT ist nur dann positiv, wenn eine erhöhte Anzahl von
erregerreaktiven Effektor - T-Lymphozyten im Blut vorhanden
ist. Dieses wiederum ist nur dann der Fall, wenn
eine
aktive Auseinandersetzung des Immunsystems mit
dem Erreger stattfindet. Es ist bekannt, dass die Anzahl erregerspezifischer
T - Zellen im Blut nach antibiotischer
Therapie deutlich zurückgeht, was
an einem rück-
läufigen LTT-Ergebnis zumeist sehr gut
erkennbar ist.
Abb. 2 Befundbeispiel: LTT-Borrelien
Nach umfangreichen Arbeiten zur Standardisierung
und Validierung können
derzeit zusätzlich zur Serologie
folgende erregerspezifischen LTT - Untersuchungen angeboten
werden:
Für obligat latente Infektionen:
LTT- Herpesvirus 1 (HSV 1, Herpes labialis)
LTT- Herpesvirus 2 (HSV 2, Herpes genitalis)
LTT- EBV (Epstein-Barr Virus)
LTT- CMV (Cytomegalievirus)
LTT- VZV (Varizella zoster Virus)
LTT- Herpesvirus 6 (HSV 6)
Auf diese Viren kann einzeln getestet werden oder im
Profil (LTT-Herpesviren). Letzteres hat den Vorteil, dass
die T-Zellreaktivität vergleichend betrachtet werden
kann, was den Vorteil hat, dass Auffälligkeiten bei einzelnen
Viren besser erkannt werden.
Für fakultativ persistierende Infektionen:
Eine Sonderstellung nimmt der LTT-Candida albicans
ein. Ähnlich wie bei Herpesviren ist hier durch die physiologische
Auseinandersetzung des Immunsystems
mit intestinalen Candida-Antigenen eine (moderat)
positive LTT-Antwort normal.
Der LTT auf Candida albicans wird einerseits durchgeführt
bei Verdacht auf einen Defekt der Candida-
Immunabwehr (dann negatives LTT-Ergebnis) oder
bei Verdacht auf eine chronisch aktive Auseinandersetzung
mit Candida, die in der Regel auf einer gesteigerten
Darmpermeabilität (leaky gut) beruht. In diesem
Fall zeigt der LTT ein deutlich erhöhtes LTT-Resultat.
Wissenschaftliche Literatur
1. Dattwyler RJ et al, Seronegative Lyme disease. Dissociation of
specific T- and B-lymphocyte responses to Borrelia burgdorferi.
N Engl J Med 1988; 319:1441-6
2. Zoschke DC et al, Lymphoproliferative responses to Borrelia
burgdorferi in Lyme disease. Ann Intern med 1991; 17:151-8
3. Dressler F et al, The T-cell proliferative assay in the diagnosis of
Lyme disease. Ann Intern Med 1991; 115:533-9
4. Krause et al, T cellproliferation induced by Borrelia burgdorferi in
patients with Lyme borreliosis. Autologous serum required for opti
mum stimulation. Arthritis Rheum 1991; 34:393-402
5. Schempp et al, Comparison of Borrelia burgdorferi ultrasonicate
and whole B. burgdorferi cells as a stimulus for T-cell proliferation
and GM-CSF secretion in vitro. Zentralbl Bakteriol 1993; 279:417-25
6. Buechner SA et al, Lymphoproliferative responses to Borrelia burgdorferi
in patients with erythema migrans, acrodermatitis chronica
atrophicans, lymphadenosis benigna cutis, and morphea.
Arch Dermatol 1995; 131:673-7
7. Breier F et al, Lymphoproliferative responses to Borrelia burgdorferi
in circumscribed scleroderma. Brit J Dermatol 1996, 134:285-91
8. Huppertz HI et al, Lymphoproliferative responses to Borrelia burgdorferi
in the diagnosis of Lyme arthritis in children and adolescents.
Eur J Pediatr 1996; 155:297-302
9. Rutkowski S et al, Lymphocyte proliferation assay in response to
Borrelia burgdorferi in patients with Lyme arthritis: analysis of lymphocyte
subsets. Rheumatol Int 1997; 17:151-8
10. Valentine-Thon E et al, A novel lymphocyte transformation test
(LTT-MELISA®) for Lyme borreliosis. Diagn Microbiol Infect Dis 2007;
57:27-34
11. von Baehr V. et al. The lymphocyte transformation test for borrelia
detects active lyme borreliosis and verifies effective antibiotic tre
atment. Open Neurol J. 2012; 6: 104-12.
12. Gupta R, Srivastava P, Vardhan H, Salhan S, Mittal A. Host immune
responses to chlamydial inclusion membrane proteins B and C in
Chlamydia trachomatis infected women with or without fertility
disorders. Reprod Biol Endocrinol. 2009 28:38.
LTT- Borrelien
LTT- Chlamydia trachomatis
LTT- Chlamydia pneumoniae
LTT- Yersinien
LTT- Giardia lamblia (Lamblien)
LTT- Helicobacter pylori
LTT- Streptokokken
LTT- Staphylokokken
13. Vats V, Agrawal T, Salhan S, Mittal A. Primary and secondary immune
responses of mucosal and peripheral lymphocytes during
Chlamydia trachomatis infection. FEMS Immunol Med Microbiol.
2007;49:280-7.
Die meisten klinischen Studien liegen zur Anwendung
des LTT auf Borrelienantigene vor. Auf Grund der ähnlichen
Immunpathogenese können die Ergebnisse
allerdings auf andere fakultativ persistierende Bakterien
übertragen werden, da bei allen Bakterien die
Anzahl erregerreaktiver T - Effektorzellen im Blut zur Aktivität
der Infektion korreliert.
Für Rückfragen stehen wir Ihnen unter (030) 77 001 - 220 gerne zur Verfügung.
Diag-Info: 190 Version: 2