010-000 bis 400 Handbuch-Rev.02 - Biometra

6.3 SDS-Probenpufferfür SDS-PAGE-Gele unter denaturierenden Bedingungen2 ml O,625 M Tris/HCl pH 6,80,2 g SDS5 ml Glycerin0,5 ml ß-Mercaptoethanol0,1 ml Bromphenolblau (1%ige Lsg. in Ethanol)2,4 ml bidest. H 2 ODen SDS-Probenpuffer im Verhältnis 1:1 mit der Probe vermischen. Die Proben gegebenenfalls 5Minuten im kochenden Wasserbad erhitzen.6.4 Laufpuffer pH 8,3 (für 5 Liter)15,1 g Tris-Base72,0 g Glycin5,0 g SDS6.5 Färbelösung (1 Liter)2,0 g Coomassie Brilliant Blau R 2500,5 g Coomassie Brilliant Blau G 250425 ml Ethanol50 ml Methanol100 ml Essigsäure425 ml bidest. WasserÜber Nacht unter rühren lösen, in dunkler Flasche aufbewahren, vor dem Gebrauch filtrieren.6.6 Entfärbelösungschnelles Entfärben mit:45% Ethanol10% Essigsäure45% bidest. Wasserlangsames Entfärben mit:25% Isopropanol10% Eisessig65% bidest. Wasserabschließende Entfärbung mit:7% Essigsäure in bidest. Wasser15