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Das INFORS Kochbuch: Grundwissen, Rezepte und Strategien für mikrobielle Prozesse

Dieser Leitfaden liefert Ihnen eine Orientierung und begleitet Sie Schritt für Schritt an den Bioprozess heran

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Inhalt<br />

Einleitung<br />

Einleitung 3<br />

1. Bioreaktor-Gr<strong>und</strong>lagen 5<br />

1.1 Wozu ein Bioreaktor? 5<br />

1.2 Aufbau <strong>und</strong> Komponenten 5<br />

1.3 Funktionsweise 6<br />

Gerührt oder geschüttelt? 6<br />

Temperaturmessung <strong>und</strong> -regelung 7<br />

pH-Messung <strong>und</strong> -Regelung 7<br />

Nährstoffe hinzufügen 8<br />

Begasung 8<br />

Druckmessung <strong>und</strong> -kontrolle 9<br />

Schaumbildung vermeiden 9<br />

2. Bioprozess-Gr<strong>und</strong>lagen 11<br />

2.1 Mikroorganismen 11<br />

Bakterien 11<br />

Hefe 12<br />

Pilze 12<br />

2.2 Der Bioprozess 12<br />

2.3 Was geschieht nach dem Bioprozess? 15<br />

3. Aufbau, Vorbereitung <strong>und</strong><br />

Durchführung eines Bioprozesses 19<br />

3.1 Bioreaktor vorbereiten 19<br />

3.2 Nährmedium hinzufügen 22<br />

3.3 Wenn der Spass dann vorüber ist... 23<br />

4. Bioprozessstrategien <strong>und</strong><br />

deren Steuerung 25<br />

4.1 Batch 25<br />

4.2 Fed-Batch 25<br />

4.3 Kontinuierlicher Kulturbetrieb 26<br />

4.4 Weitere Sonderformen der<br />

Prozessführung 26<br />

4.5 Massstabsübertragung bei der Prozess<strong>und</strong><br />

Medienentwicklung 27<br />

5. Anwendungsbeispiele 29<br />

5.1 Saccharomyces cerevisiae-<br />

Kultivierung 29<br />

5.1.1 Gr<strong>und</strong>aufbau 29<br />

5.1.2 Workflow 29<br />

5.2 Escherichia coli-Kultivierung 33<br />

5.2.1 Gr<strong>und</strong>aufbau 33<br />

5.2.2 Workflow 33<br />

5.3 Pichia pastoris-Kultivierung 38<br />

5.3.1 Gr<strong>und</strong>aufbau 38<br />

5.3.2 Workflow 38<br />

6. Tipps <strong>für</strong> einen erfolgreichen<br />

Bioprozess 45<br />

6.1 Kontaminationen vermeiden 45<br />

6.2 Wachstumsmaximierung durch Messung<br />

der Gelöstsauerstoffkonzentration 45<br />

6.3 Kulturvolumen beibehalten 45<br />

6.4 Schaumbildung vermeiden 45<br />

6.5 Funktionsfähiger Abgasfilter 46<br />

6.6 Konstante Pumpengeschwindigkeit 46<br />

6.7 Erfolgreiche Biomasseausbeute 46<br />

6.8 Erfolgreiche Proteinausbeute 46<br />

6.9 Tipps <strong>für</strong> Fed-Batch-<strong>Prozesse</strong> 47<br />

7. Weiterführende Literatur 49<br />

7.1 Biotechnologie 49<br />

7.2 Bioprozesstechnik 49<br />

7.3 Mikrobiologie 49<br />

7.4 Praktische Laborarbeit 49<br />

7.5 Populärwissenschaftliche Publikationen 49<br />

8. Glossar 50<br />

Nun ist es also soweit.<br />

Endlich stehen Sie im Labor vor einem Bioreaktor <strong>und</strong> sind hochmotiviert, allerlei Experimente<br />

mit dem Gerät zu starten.<br />

Apropos starten: Wie schaltet man so einen Bioreaktor überhaupt an? Und dann? Mit<br />

einem Blick ins Handbuch kann diese Frage geklärt werden, aber was ist mit der gr<strong>und</strong>sätzlichen<br />

Funktionsweise, zusätzlichen Tipps zur Vorbereitung <strong>und</strong> zur Durchführung<br />

eines Bioprozesses? Womöglich wurde das eine oder andere Experiment schon einmal<br />

durchgeführt. Könnte man dieses nicht am Anfang schlichtweg «nachkochen» anstatt<br />

sich gleich in neuen Kreationen zu verlieren?<br />

Darüber haben wir uns auch Gedanken gemacht. Schliesslich ist noch kein Bioprozess-<br />

Experte vom Himmel gefallen.<br />

Mit diesem Leitfaden möchten wir Ihnen eine Orientierung geben <strong>und</strong> Sie Schritt <strong>für</strong><br />

Schritt an den Bioprozess heranführen. Wir erklären, wie ein Bioreaktor funktioniert <strong>und</strong><br />

was darin passiert, wenn man Mikroorganismen mit Nährstoffen zusammenbringt. Wir<br />

schauen uns die Gr<strong>und</strong>lagen des Bioprozesses <strong>und</strong> die <strong>Strategien</strong> an, mit denen ein Bioprozess<br />

zum gewünschten Erfolg geführt werden kann. Und wir werfen einen Blick auf<br />

die üblichen Beteiligten, die Mikroorganismen. An dieser Stelle sei darauf hingewiesen,<br />

dass dieses Dokument auf Bioreaktoren mit 0,5 L bis 10 L Arbeitsvolumen sowie aerobe,<br />

<strong>mikrobielle</strong> Bioprozesse eingeht, auch wenn einige Erläuterungen durchaus auf grössere<br />

oder kleinere Experimente anwendbar sind.<br />

Wie in allen guten Kochbüchern befinden sich in diesem Dokument <strong>Rezepte</strong>.<br />

Es sind <strong>Rezepte</strong>, die zur bestmöglichen Kultivierung von Mikroorganismen ausgelegt sind,<br />

um jedes Missverständnis hinsichtlich Verwechslungen mit einem konventionellen <strong>Kochbuch</strong><br />

auszuschliessen. Klare Anleitungen, einen Ausblick auf das zu erwartende Ergebnis<br />

<strong>und</strong> einige Tipps sollen helfen wunschgemäss auch genau dieses Ziel zu erreichen.<br />

Natürlich ist es mit einem kleinen Leitfaden nicht getan. Der Bioprozess an sich ist nur ein<br />

Schritt, dem <strong>Prozesse</strong> vorangehen, die sich mit der Vorbereitung der Mikroorganismen,<br />

Kulturmedien, <strong>und</strong> Korrekturmittel beschäftigen. Und es gibt viele nachgelagerte Prozeduren,<br />

bei denen das Ernten <strong>und</strong> das Weiterverarbeiten des Bioprozess-Ergebnisses im<br />

Fokus stehen. Wir hoffen jedoch, dass wir Ihnen mit diesem «<strong>Kochbuch</strong>» den Schritt in<br />

die Bioverfahrenstechnik erleichtern, die Neugierde wecken <strong>und</strong> die Angst vor vermeintlich<br />

«dummen» Fragen nehmen – die wir uns im Übrigen beim Schreiben selbst gestellt<br />

haben.<br />

Wir freuen uns auf Rückmeldungen, die das <strong>Kochbuch</strong> verbessern <strong>und</strong> erweitern. Hinweise<br />

<strong>und</strong> konstruktive Kritik nehmen wir gerne unter marketing@infors-ht.com entgegen.<br />

Wir wünschen eine angenehme Lektüre!<br />

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