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Das INFORS Kochbuch: Grundwissen, Rezepte und Strategien für mikrobielle Prozesse

Dieser Leitfaden liefert Ihnen eine Orientierung und begleitet Sie Schritt für Schritt an den Bioprozess heran

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5. Anwendungsbeispiele<br />

Im folgenden Kapitel sollen praxisnahe Anwendungsbeispiele <strong>für</strong> aerobe, <strong>mikrobielle</strong><br />

Bioprozesse vorgestellt werden. Wie es sich <strong>für</strong> ein <strong>Kochbuch</strong> gehört, finden sich hier<br />

anfängergerechte Anleitungen zum einfachen Nachkochen. Dies beinhaltet nicht nur die<br />

<strong>Rezepte</strong> <strong>für</strong> die Medien, sondern auch die genauen Bedingungen <strong>und</strong> Mengen sowie,<br />

welcher Strategie gefolgt wird. Zudem finden sich am Ende des jeweiligen Bioprozesses<br />

noch Hinweise, um Rezept zu verfeinern, indem zum Beispiel mehr Phasen der Fütterung<br />

eingefügt werden oder andere Gr<strong>und</strong>rezepte <strong>für</strong> Medien herangezogen werden. Alle aufgeführten<br />

<strong>Rezepte</strong> sind auch in eve ® , der Plattform-Software <strong>für</strong> Bioprozesse, zu finden.<br />

Den Beginn macht die Bäckerhefe Saccharomyces cerevisiae, deren Biomasse wir in einem<br />

Batch-Verfahren heranzüchten wollen.<br />

Als zweites folgt ein Vorschlag zur Fed-Batch-Kultivierung von Escherichia coli, welches<br />

häufig als prokaryotisches Expressionssystem zur Produktion von Proteinen eingesetzt<br />

wird.<br />

Zu guter Letzt wird noch die Methanol-verwertende Hefe Pichia pastoris <strong>für</strong> den Einsatz<br />

in einem Hochzelldichte-Fed-Batch-Verfahren auf zwei Substraten vorgestellt, welches<br />

als eukaryotisches Expressionssystem <strong>für</strong> rekombinante Proteine komplexerer Struktur<br />

eingesetzt werden kann.<br />

5.1 Saccharomyces cerevisiae-Kultivierung<br />

5.1.1 Gr<strong>und</strong>aufbau<br />

Name<br />

Beschreibung<br />

Rezept A in eve ®<br />

Geräteauswahl<br />

Vorkultur<br />

Parameter<br />

Anzucht von Backhefe (Saccharomyces cerevisiae)<br />

Zur Einführung in die Bioprozesstechnik wird ein Bioprozess zur<br />

Erzeugung von Hefebiomasse durchgeführt. Dies dient dem<br />

Kennlernen der einzelnen Komponenten eines Bioreaktors, des<br />

Handlings sowie der gr<strong>und</strong>legenden Prozesssteuerung in einem<br />

t>8 h<br />

Batch-Bioprozess.<br />

t>16 h<br />

S. cerevisiae B cultivation C<br />

A <strong>und</strong> Inokulum B Inkubationsschüttler, Batch-Kultur C Bioreaktor im Minifors 2<br />

siehe separate Beschreibung <strong>für</strong> A, B <strong>und</strong> C<br />

5.1.2 Workflow<br />

A<br />

Vorkultur<br />

t>12 h t>24 h<br />

B<br />

Inokulum<br />

C<br />

Batch-Kultur im Minifors 2<br />

Feed<br />

Zugabeschema<br />

50 % Glucose 0,5 l<br />

Batch<br />

aus Bioreaktoren<br />

pO 2<br />

Fed-Batch 1<br />

Feed 4.5 ml h –1<br />

t>2 h t>2 h t>2 h<br />

Fed-Batch 2<br />

Feed 9.0 ml h –1<br />

29<br />

Fed-Batch 3<br />

Feed 13.5 ml h –1<br />

Ende

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