线粒体证据揭示秦陵修陵劳工的来源 - 现代人类学通讯

袁 媛 等 : 线 粒 体 证 据 揭 示 秦 陵 修 陵 劳 工 的 来 源
研 究 报 告
表 2 用 于 数 据 比 较 的 32 个 现 代 中 国 人 群
Tab. 2 Modern Chinese populations used for
comparison with Qin samples
群 体 编 号 样 本 量 来 源
陕 西 1 53 [6]
青 海 2 44 [6]
北 方 汉 内 蒙 古 3 45 [6]
(NH) 西 安 4 85 [8]
辽 宁 5 51 [6]
甘 肃 6 45 [6]
浙 江 7 61 [6]
云 南 8 59 [6]
南 方 汉
(SH)
北 方 少
数 民 族
(NM)
南 方 少
数 民 族
(SM)
台 湾 9 66 [9]
四 川 10 70 [6]
上 海 1 56 [6]
江 西 12 23 [6]
江 苏 13 67 [6]
湖 南 14 16 [6]
广 西 15 29 [6]
福 建 16 54 [6]
长 沙 17 82 [8]
安 徽 18 42 [6]
广 东 19 29 [10]
蒙 古 20 48 [11]
朝 鲜 21 48 [11]
哈 萨 克 22 53 [12]
鄂 温 克 23 47 [11]
藏 24 56 [13]
维 吾 尔 25 47 [12]
彝 26 56 [14]
土 家 27 96 [13]
瑶 28 395 [14]
苗 29 142 [14]
傣 30 38 [10]
白 31 55 [13]
壮 32 83 [10]
图 1 秦 俑 劳 工 墓 和 32 个 现 代 中 国 人 群 的 地 理 位 置
虚 线 表 示 秦 朝 的 边 疆 , 群 体 的 编 号 见 表 2, 劳 工 墓 位
置 以 实 心 圆 表 示 。
Fig.1 The geographical locations of Qin Mausoleum
worker tomb and the 32 Chinese populations. The dot
line indicates the border of Qin Dynasty; the numbers
are the same as in Table 2, and the big dot indicates the
location of mausoleum worker tomb.
弃 。 在 所 得 的 19 个 样 本 中 随 机 挑 取 两 个 (M54
和 M57) 在 吉 林 大 学 进 行 独 立 重 复 实 验 , 结 果
具 有 一 致 性 。 此 外 , 这 19 个 样 本 的 DNA 显
示 了 各 种 古 DNA 的 分 子 特 性 , 且 与 实 验 人 员
的 序 列 不 同 , 因 此 我 们 认 为 这 19 个 样 本 的 序
列 信 息 是 可 靠 的 。
1. 实 验 过 程 的 控 制
所 有 样 品 都 是 新 近 挖 掘 的 , 且 尽 可 能 避
免 触 摸 ( 研 究 表 明 博 物 馆 收 藏 的 材 料 有 高 比
例 的 污 染 [19], 且 污 染 水 平 多 样 [20])。 所 有 的
PCR 前 操 作 都 在 一 个 隔 离 的 古 DNA 专 用 实
验 室 中 进 行 。 此 外 , 实 验 人 员 保 持 (PCR 前 →
PCR→PCR 后 ) 的 单 向 流 动 , 以 防 止 外 源 DNA
通 过 粘 附 在 衣 物 和 皮 肤 上 进 入 古 DNA 实 验
室 ; 长 时 间 紫 外 照 射 和 次 氯 酸 钠 的 使 用 [21]
是 行 之 有 效 的 消 除 污 染 的 方 法 ; 使 用 一 次 性
手 套 、 口 罩 和 带 滤 芯 的 移 液 头 等 避 免 样 品 间
的 交 叉 污 染 。
三 段 PCR 目 的 产 物 首 尾 有 重 叠 区 域 , 这
样 可 以 减 小 误 扩 增 到 核 mtDNA 的 可 能 性
[17,22,23]( 表 1)。 为 检 测 可 能 的 污 染 , 在 抽 提
和 PCR 时 , 都 引 入 阴 性 对 照 , 与 样 品 的 比 例
为 1:1。
理 论 上 , 一 个 克 隆 序 列 代 表 一 个 DNA 片
段 分 子 的 插 入 , 即 序 列 是 唯 一 的 , 若 存 在 杂
合 , 很 可 能 是 交 叉 污 染 , 将 此 克 隆 剔 除 。 如
果 某 一 信 息 位 点 有 6 个 或 6 个 以 上 的 克 隆 序 列
显 示 同 样 的 碱 基 , 则 认 为 该 位 点 是 可 靠 的 ( 图
2)。 将 所 得 序 列 与 rCRS 比 对 , 逐 一 检 验 各 个
位 点 , 最 后 确 定 该 样 品 的 单 倍 型 。
图 2 中 rCRS[3] 为 参 照 标 准 序 列 ;“.” 表
示 该 位 点 与 rCRS 一 致 ;a、b、c 分 别 代 表
HVRI 上 的 三 段 不 同 片 段 (16053-16158 、
16154-16265、16263-16366)。 克 隆 测 序 反 应
了 PCR 产 物 中 单 分 子 的 序 列 信 息 , 可 以 通 过
不 同 的 克 隆 观 察 到 多 聚 酶 的 低 保 真 度 所 造 成
的 某 一 位 点 的 假 象 、 测 序 错 误 以 及 跳 跃
PCR[24,25]。 在 大 多 数 的 克 隆 中 , 位 点 16223、
16239、16298、16327 和 16357 上 都 出 现 了
转 换 , 因 而 可 以 认 为 样 品 M54 的 mtDNA
HVRI 的 可 靠 单 倍 型 为 16233-16239-
16298-16327。C7 和 C8 不 同 于 C1-C6, 被 认
为 是 外 源 污 染 DNA, 但 和 实 验 人 员 的 DNA
序 列 不 同 ( 表 3), 因 此 并 不 是 源 于 实 验 人 员 。
16079、16089、16107、16109、16148、16172、
16211、16227、16259、16306 和 16313 位 点
上 的 碱 基 置 换 被 认 为 是 散 在 的 碱 基 错 配 , 是
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