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Plant Binary VectorpRI 201-ON DNACode No. 3265Size: 10 μg (0.2 OD)Lot No.Concentration:Volume:Description: pRI 201-ON DNA is a binary vector for expressing foreigngene in monocotyledonous plant cells. This vector has both a 5’noncodingregion of rice alcohol dehydrogenase (ADH) gene as a translationalenhancer and a terminator of Arabidopsis heat shock protein (HSP)gene as a highly efficient terminator. Having MCS2 at the downstreamof HSP terminator allows the simultaneous expression of multiple genes,by inserting the expression cassette including a different gene into theMCS2. The 5’-UTR of rice ADH functions as a translational enhancer inmonocotyledonous plants such as rice, and also in dicotyledonous plantssuch as tobacco or Arabidopsis.pRI 201-ON DNA is a shuttle vector, and replicates autonomously inE. coli and Rhizobium (Agrobacterium).* This product was developed by TaKaRa Bio Inc. to which Nara Instituteof Science and Technology provided supports and samples.Form: 10 mM Tris-HCl, pH 8.01 mM EDTAPreparation: Purification by column treatmentBase pairs: 10,475 bpShipping at - 20℃Stored at - 20℃0.5 μg/μl20 μlRegarding protocol, please refer to the productmanual supplied with this vector.Shelf life: 2 years from date of receipt under proper storage conditions.Quality control:1. Contains over 70% double-stranded covalently closed circular form I(RFI).2. Shown to retain cloning sites by dideoxy sequencing method.3. Shown to be cleavage at a single site by restriction enzymes specificto these sites.Usage: This is a vector for transformation of plants such as Rice, usingRhizobium (Agrobacterium) which is available for binary vector method.Vector map of pRI 201-ON DNA: ColE1 ori: Replication origin in E. coliRi ori: Replication origin in Rhizobium (Agrobacterium)RB, LB: T-DNA border sequencesNOS promoter, NOS terminator: Promoter or Terminator for expression ofselectable marker gene in plantNPT II: Selectable marker gene in plantHSP terminator: Terminator for expression of foreign gene in plantOsADH 5’-UTR: 5’non-coding region of Rice Alcohol dehydrogenase(translational enhancer)35S promoter: Cauliflower mosaic virus (CaMV) promoter for expressionof target gene in plantNPT III: Selectable marker gene in E. coli or Rhizobium (Agrobacterium)Cloning site: See the other side of this sheet.Reference:1) T. Sugio, J. Satoh, H. Matsuura, A. Shinmyo and K. Kato (2008) : J. Bioscienceand Bioengineering, 105 (3), 300-3022) S. Nagaya, K. Kawamura, A. Shinmyo and K. Kato (2010): Plant & CellPhysiology, in press. doi: 10, 1093/pcp/pcp1883) R. Nishiguchi, M. Takanami, and A. Oka (1987) : Molecular and GeneralGenetics, 206, 1-84) J. Satoh, K. Kato and A. Shinmyo (2004) : J. Bioscience and Bioengineering,98 (1), 1-85) T. Sugio, H. Matsuura, T. Matsui, M. Matsunaga, T. Nosho, S. Kanaya, A.Shinmyo and K. Kato (2010): J. Bioscience and Bioengineering, in press.doi:10.1016/j.jbiosc.2009.07.009NoteThis product is intended to be used for research purpose only. Theyare not to be used for drug or diagnostic purposes, nor are they intendedfor human use. They shall not to be used products as food,cosmetics, or utensils, etc.Takara products may not be resold or transfered, modified for resaleor transfer, or used to manufacture commercial products withoutwritten approval from TAKARA BIO INC.If you require licenses for other use, please call at +81 77 543 7247 orcontact from our website at www.takara-bio.com.Produced by TAKARA BIOTECHNOLOGY(DALIAN)CO., LTD.v201004Da

植 物 形 質 転 換 用 ベクターpRI 201-ON DNACode No. 3265Size: 10 μg (0.2 OD)Shipping at - 20℃Stored at - 20℃Lot No.濃 度 :容 量 :( 英 文 面 をご 覧 ください。)( 英 文 面 をご 覧 ください。)( 英 文 面 をご 覧 ください。)● 保 存 - 20℃適 切 に 保 存 し、 受 け 取 り 後 2 年 を 目 途 にご 使 用 ください。本 製 品 の 使 用 方 法 については、 製 品 添 付 の 取 扱説 明 書 をご 確 認 ください。● 製 品 説 明pRI 201-ON DNA は、 形 質 転 換 植 物 における 外 来 遺 伝 子 の 高 発 現 を 目 的としたベクターである。カリフラワーモザイクウイルス(CaMV)の 35Sプロモーターの 下 流 にイネ ADH(Alcohol Dehydrogenase) 遺 伝 子 由 来の 5’ 非 翻 訳 領 域 (5’-UTR)を、また 汎 用 されているアグロバクテリウムNOS(Nopaline Synthase) 遺 伝 子 由 来 terminator に 換 えてシロイヌナズナ HSP(Heat Shock Protein) 遺 伝 子 由 来 terminator を 搭 載 しており、 外来 遺 伝 子 の 更 なる 高 発 現 が 期 待 される。さらに、HSP terminator の 下 流にクローニングサイト(MCS2)が 組 み 込 まれているため、この 部 分 に 他 の遺 伝 子 を 発 現 カセットごと 組 み 込 めば、 同 時 に 複 数 の 遺 伝 子 を 発 現 させることが 可 能 である。なお、イネ ADH 5’-UTR はイネなどの 単 子 葉 植 物に 加 え、タバコ、シロイヌナズナなどの 双 子 葉 植 物 でも 翻 訳 エンハンサーとして 機 能 する。本 ベクターは、 大 腸 菌 および Rhizobium(Agrobacterium) 中 で 自 律 的 に複 製 するシャトルベクターである。* 本 ベクターは、 国 立 大 学 法 人 奈 良 先 端 科 学 技 術 大 学 院 大 学 より 技術 および 試 料 の 提 供 を 受 けて、タカラバイオ( 株 )が 製 品 化 いたしました。● 形 状 10 mM Tris-HCl, pH 8.01 mM EDTA● 調 製 カラム 処 理 によりプラスミド DNA を 精 製 。● 鎖 長10,475 bp●クローニングサイト 図● 純 度1. 二 重 鎖 covalently closed circular form(RFI)を 70% 以 上 含 んでいる。2. Dideoxy 法 によるシーケンスの 結 果 、クローニングサイトが 保 持 されていることを 確 認 している。3. クローニングサイトにおいてのみ 1 ヵ 所 切 断 する 制 限 酵 素 について、その 切 断 を 確 認 している。● 用 途バイナリーベクター 法 による 植 物 形 質 転 換 に 使 用 できる Rhizobium(Agrobacterium)を 利 用 したイネなどの 単 子 葉 植 物 の 形 質 転 換 、および外 来 遺 伝 子 の 高 発 現 のためのベクター。● 参 考 文 献1)T. Sugio, J. Satoh, H. Matsuura, A. Shinmyo and K. Kato (2008) : J. Bioscienceand Bioengineering, 105 (3), 300-3022)S. Nagaya, K. Kawamura, A. Shinmyo and K. Kato (2010): Plant & CellPhysiology, in press. doi: 10, 1093/pcp/pcp1883)R. Nishiguchi, M. Takanami, and A. Oka (1987) : Molecular and GeneralGenetics, 206, 1-84)J. Satoh, K. Kato and A. Shinmyo (2004) : J. Bioscience and Bioengineering,98 (1), 1-85)T. Sugio, H. Matsuura, T. Matsui, M. Matsunaga, T. Nosho, S. Kanaya,A. Shinmyo and K. Kato (2010): J. Bioscience and Bioengineering, inpress. doi:10.1016/j.jbiosc.2009.07.009● pRI 201-ON DNA のベクターマップ( 英 文 面 をご 覧 ください。)● 注 意本 製 品 は 研 究 用 として 販 売 しております。ヒト、 動 物 への 医 療 、 臨床 診 断 用 には 使 用 しないようご 注 意 ください。また、 食 品 、 化 粧 品 、家 庭 用 品 等 として 使 用 しないでください。タカラバイオの 承 認 を 得 ずに 製 品 の 再 販 ・ 譲 渡 、 再 販 ・ 譲 渡 のための 改 変 、 商 用 製 品 の 製 造 に 使 用 することは 禁 止 されています。注 )OsADH 5’-UTR は 内 部 に EcoR I サイトを 含 む。* EcoR I site is located in OsADH 5’-UTR. v201004Da製 品 についての技 術 的 なお 問 い 合 わせ 先TaKaRa テクニカルサポートラインTel 077-543-6116Fax 077-543-1977