Info - Leica Biosystems

• Prover, både före och efter fixeringen, och allt material som använts tillsammans med dem ska hanteras som infektiöst avfall enligtgängse praxis 2 . Pipettera aldrig reagenser med munnen och undvik att reagenser eller prover kommer i kontakt med hud ochslemhinnor. Om reagenser eller prover kommer i kontakt med känsliga områden, skölj med stora mängder vatten. Sök läkarvård.• Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser ochförordningar.• Minimera mikrobiologisk kontamination av reagens, annars kan en ökad icke-specifik infärgning bli resultatet.• Återvinnande och andra inkubationstider eller temperaturer än de angivna kan ge felaktiga resultat. Sådana förändringar skavalideras av användaren.Instruktioner vid AnvändningCD10 (56C6) primär antikropp har utvecklats för att användas på det automatiska BOND-systemet (som innefattar systemen LeicaBOND-MAX och Leica BOND-III) i kombination med Bond Polymer Refine Detection. Rekommenderat färgningsprotokoll för CD10(56C6) primär antikropp är IHC Protocol F. Värmeinducerat epitop-retrieval rekommenderas med användande av Bond Epitope RetrievalSolution 2 i 20 minuter.Förväntade ResultatNormala vävnaderKlon 56C6 detekterar CD10-antigenet på ytan av normala tidiga progenitorceller, omogna B-celler inuti benmärgen samt B-celler igerminala centra inuti lymfoid vävnad. CD10 detekteras på ett flertal olika icke-lymfoida celler och vävnader, såsom myoepitelceller frånbröst, gallans canaliculi, fibroblaster, med ett särskilt högt uttryck i borstbrämen i njure och tarmepitel. (Totalt antal utvärderade normalfall= 85).TumörvävnaderKlon 56C6 färgade 26/116 diffusa storcelliga B-cellslymfom, 10/15 follikulära lymfom, 1/12 kroniska lymfocytiska lymfom, 1/1 akutlymfoblastiskt B-cellslymfom, 2/2 seminom, 2/2 adenokarcinom i kolon, 1/2 rektala adenokarcinom, 1/2 jurcellskarcinom, 1/1 plexuschoroideuspapillom i hjärnan, 1/1 skivepitelkarcinom i larynx, 1/1 fibromatos i mjukvävnad, 1/1 icke-småcelligt karcinom i lunga, 1/1metastatiskt karcinom i lever och 1/1 dermatofibrosarkom. Ingen färgning observerades i Hodgkins sjukdom (0/27), mantelcellslymfom(0/7), anaplastiska storcelliga T-cellslymfom (0/7), angioimmunoblastiska T-cellslymfom (0/4), T/NK-cellslymfom (0/3), diffusaT-cellslymfom (0/2), ett primitivt akut lymfoblastiskt B/T-cellslymfom (0/1), ett perifert T-cellslymfom (0/1), ett T-cellslymfom (0/1), ettmarginalzonslymfom (0/1), äggstockstumörer (0/4), sköldkörteltumörer (0/4), livmoderhalstumörer (0/2), skivepitelkarcinom i tunga (0/2),skivepitelkarcinom i esofagus (0/2), infiltrerande duktala karcinom i bröst (0/2), adenokarcinom i magsäck (0/2), metastatiska tumörer avokänt ursprung (0/2), hepatocellulära karcinom i lever (0/2), ett kolangiokarcinom i lever (0/1), ett anaplastiskt astrocytom i hjärnan (0/1),en atypisk karcionoid i thymus (0/1), ett ganglioneurom i mjukvävnad (0/1), ett adenokarcinom i lunga (0/1), ett skivepitelkarcinom i lunga(0/1), ett storcelligt karcinom i lunga (0/1) eller ett skivepitelkarcinom i hud (0/1). (Totalt antal utvärderade onormala fall = 242).CD10 (56C6) rekommenderas för användning som en del av en antikroppspanel för att underlätta diagnos av lymfom.Specifika Begränsningar För ProduktenCD10 (56C6) har optimerats vid Leica Biosystems för att användas med Bond Polymer Refine Detection och BOND hjälpreagenser.Användare som avviker från rekommenderat testförfarande måste vid ändrade förhållanden ta ansvar för tolkningen av patientresultaten.Protokolltiderna kan variera på grund av variationer i vävnadsfixering och hur effektivt antigenet intensifieras, och ska fastställasempiriskt. Negativa reagenskontroller ska användas då förhållanden för återvinnande och protokolltider optimeras.FelsökningSe referens 3 för förslag till åtgärder.Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.Mer informationMer information om immunfärgning med BOND-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändig materiel, Förberedaprovet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna begränsningar i”Använda BOND-reagens” i Bonds användardokumentation.Litteraturförteckning1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectiousdiseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.4. Ordi J, Romagosa C, Tavassoli FA et al. CD10 expression in epithelial tissues and tumours of the gynecologic tract: a useful markerin diagnosis of mesonephric, trophoblastic and clear cell tumors. American Journal of Surgical Pathology 2003 27(2), 178–186.5. Kristiansen G, Schluns K, Yongwei Y et al. CD10 expression in non-small cell lung cancer. Annals of Cellular Pathology 2002 24(1),41–46.6. Sumathi V P and McCluggage WG. CD10 is useful in demonstrating endometrial stroma at ectopic sites and in confirming diagnosisof endometriosis. Journal of Clinical Pathology 2002 55, 391–392.7. Dunphy CH, Polsky JM, Lance Evans H et al. Paraffin immunoreactivity of CD10, CDw75 and Bcl-6 in follicle center cell lymphoma.Leukaemia and Lymphoma 2001 41(5–6), 585–592.8. Eshoa C, Perkins S, Kampalath et al. Decreased CD10 expression in grade III and in interfollicular infiltrates of follicular lymphomas.American Journal of Clinical Pathology 2001 115(6), 862–867.9. Tajima Y, Shimoda T, Nakanishi Y et al. Gastric and intestinal phenotypic marker expression in gastric carcinomas and its prognosticsignificance: immunohistochemical analysis of 136 lesions. Oncology 2001 61(3), 212–220.10. Bavikatty NR, Ross CW, Finn WG et al. Anti-CD10 immunoperoxidase staining of paraffin-embedded acute leukemias: comparisonwith flow cytometric immunophenotyping. Human Pathology 2000 31(9), 1051–1054.PA0270Page 21