Diagnóstico de las Enfermedades Virales
Diagnóstico de las enfermedades virales
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<strong>Diagnóstico</strong><br />
<strong>de</strong> <strong>las</strong><br />
Enfermeda<strong>de</strong>s <strong>Virales</strong><br />
Dra. Dora Ruchansky<br />
Prof. Adjunta Dpto.Bacteriología y Virología.<br />
Facultad <strong>de</strong> Medicina - UDELAR
Más <strong>de</strong> 100………..<br />
Herpesviridae<br />
HSV-1, HSV-2, VZV,<br />
CMV, EBV, HHV6,<br />
HHV7, HHV8<br />
Arenaviridae<br />
LCMV<br />
Orthomixoviridae<br />
Virus Influenza<br />
Thogoto<br />
Poliomaviridae<br />
JCV<br />
Parvoviridae<br />
Parvovirus B19<br />
A<strong>de</strong>noviridae<br />
A<strong>de</strong>novirus<br />
Paramyxoviridae<br />
Virus <strong>de</strong>l Sarampión<br />
Virus Urleano<br />
Retroviridae<br />
VIH,<br />
Flaviviridae<br />
JEV, Murray Vallley Virus,<br />
WNV, SLV, Dengue<br />
Bunyaviridae<br />
Fiebre hemorragica Crimea-Congo,<br />
Virus La Crosse,<br />
Virus <strong>de</strong> la Encefalitis California<br />
Picornaviridae<br />
Virus Polio, Coxsackie,<br />
Echovirus, Parechovirus<br />
Enterovirus 70<br />
Reoviridae<br />
Virus <strong>de</strong> la fiebre<br />
<strong>de</strong>l Colorado<br />
Togaviridae<br />
Chikungunya,<br />
EEEV, WEEV,<br />
VEEV,<br />
Rhabdoviridae<br />
Chandipura virus<br />
Virus <strong>de</strong> la rabia
VIRUS IMPLICADOS EN INFECCIONES DEL SNC<br />
MENINGITIS<br />
ENCEFALITIS<br />
RHOMBOENCEFALITIS<br />
DEMENCIA<br />
MIELOPATIA<br />
MIELITIS<br />
FRECUENTES<br />
Enterovirus<br />
Arbovirus*<br />
HSV-2 (asociado a herpes genital<br />
primario)<br />
HIV (en periodo <strong>de</strong> seroconversión y<br />
durante el curso <strong>de</strong> la enfermedad)<br />
JEV*<br />
Enterovirus<br />
Arbovirus*:<br />
WNV<br />
EEEV<br />
WEEV<br />
VEEV<br />
SLV<br />
Murray Valley,<br />
HSV-1(adultos)<br />
HSV-2 (neonatos)<br />
A<strong>de</strong>novirus<br />
HIV-1 (en seroconversión)<br />
WNV<br />
HSV-1<br />
Sarampión-Subacute sclerosing<br />
panencephalitis (niños)<br />
Rubeola-Progressive rubella<br />
panencephalitis (adultos jóvenes)<br />
HIV-1<br />
HIV-1<br />
HTLV-1<br />
WNV<br />
VZV<br />
POLIO<br />
HSV-1<br />
RAROS<br />
virus Urleano<br />
LCMV<br />
HSV-1<br />
VZV<br />
CMV<br />
EBV<br />
IA, IB<br />
Parvovirus B19<br />
VZV<br />
CMV<br />
EBV<br />
HHV6<br />
HHV7<br />
Rabia<br />
Nipah<br />
Hendra<br />
Dengue*<br />
HSV-2<br />
EBV<br />
HTLV-2<br />
Adaptado <strong>de</strong>: Neurol Clin 26 (2008) 617-633, Practical Neurology 2007;7;288-305
Tipo <strong>de</strong> Muestra: LCR<br />
ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />
Cantidad: Adultos: ≥ a 2 mL<br />
Niños: 1,5 mL<br />
Toma <strong>de</strong> Muestra - Oportunidad<br />
Punción lumbar al momento <strong>de</strong>l diagnóstico clínico,<br />
Recolección en tubo estéril y exclusiva para estudio etiológico viral.<br />
I<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> la muestra<br />
Correcto rotulado <strong>de</strong>l tubo con i<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong>l paciente y fecha <strong>de</strong> la toma<br />
Ficha adjunta:. Edad, Sexo, Proce<strong>de</strong>ncia, Fecha <strong>de</strong> inicio <strong>de</strong> síntomas, Datos clínicos,<br />
Resultado citoquímico, viajes recientes, posible exposición a reservorios animales o vectores.<br />
<strong>Diagnóstico</strong> presuntivo,<br />
Conservación <strong>de</strong> la muestra<br />
Una vez obtenida, y mientras no se realice el envío al Laboratorio, mantener refrigerada (no<br />
congelar) a 4º C.<br />
Condiciones <strong>de</strong> envío<br />
El envío <strong>de</strong>be ser bajo condiciones <strong>de</strong> refrigeración (4º C) y según pautas internacionales<br />
para transporte <strong>de</strong> muestras biológicas, se <strong>de</strong>be hacer con el sistema <strong>de</strong> triple envase.<br />
Enviar al laboratorio <strong>de</strong>ntro <strong>de</strong> <strong>las</strong> 8 – 10 horas <strong>de</strong> obtenida la muestra.<br />
.
ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />
Estudio Citoquímico:<br />
Aspecto: Claro (cristal <strong>de</strong> roca)<br />
Pleocitosis linfocitaria: 100 – 1000 cel/uL*<br />
Glucorraquia: Normal<br />
Proteinorraquia: Ligeramente elevada 0,5-2 g/L<br />
*Presencia <strong>de</strong> neutrófilos en meningitis virales
ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />
Metodos <strong>de</strong> Estudio:<br />
● Aislamiento viral<br />
● Ensayos Serológicos<br />
Detección anticuerpos específicos (producción intratecal)<br />
● Técnicas <strong>de</strong> Biología Molecular<br />
PCR<br />
RT-PCR<br />
PCR REAL TIME<br />
Secuenciación
Ensayo Serológico<br />
ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />
Detección temprana <strong>de</strong> IgM (producción intratecal) en respuesta a infección <strong>de</strong>l SNC<br />
TECNICA DE MAC ELISA<br />
IgM presente<br />
en LCR<br />
Anti-IgM<br />
Ac. monoclonal<br />
conjugado c/ HRP<br />
Antígeno<br />
Virus San<br />
Luis<br />
Sustrato<br />
TMB<br />
la presencia <strong>de</strong> anticuerpos específicos <strong>de</strong> virus IgM en LCR es diagnóstica.<br />
Virus <strong>de</strong> San Luis<br />
Virus West Nile<br />
Virus <strong>de</strong> la Encefalitis Japonesa<br />
Dengue
ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />
Técnicas <strong>de</strong> Biología Molecular<br />
La búsqueda <strong>de</strong> ácidos nucleicos virales en <strong>las</strong> muestras <strong>de</strong> LCR facilita la<br />
i<strong>de</strong>ntificación viral en poco tiempo, con alta <strong>de</strong> la especificidad y la sensibilidad.<br />
Extracción<br />
<strong>de</strong> ARN o<br />
ADN<br />
RT-PCR*<br />
LCR<br />
PCR*<br />
Amplicones<br />
<strong>de</strong> la región<br />
genómica<br />
viral<br />
estudiada<br />
*uso <strong>de</strong> cebadores específicos <strong>de</strong> regiones consenso (ej enterovirus)<br />
o específicos (ej. SLV)
DETECCIÓN DE ACIDOS NUCLEICOS VIRALES EN LCR<br />
PACIENTES<br />
PACIENTES<br />
INMUNODEPRIMIDOS<br />
NMUNOCOMPETENTES<br />
sospecha o confirmado<br />
ENCEFALITIS<br />
MENINGITIS<br />
HSV-1, HSV-2, VZV<br />
ENTEROVIRUS<br />
ARBOVIRUS*<br />
EBV / CMV<br />
HHV 6<br />
HHV7<br />
VIH<br />
JCV<br />
HSV-2,VZV<br />
ENTEROVIRUS<br />
ARBOVIRUS*<br />
VIH<br />
HSV-1, HSV-2, VZV<br />
ENTEROVIRUS,<br />
ARBOVIRUS*<br />
HSV-2,VZV<br />
ENTEROVIRUS<br />
ARBOVIRUS*<br />
* En casos con posible exposición a vectores, y/o regiones con brotes epidémicos:<br />
Encefalitis Equina <strong>de</strong>l Este, Encefalitis Equina <strong>de</strong>l Oeste,Encefalitis equina venezolana,<br />
Encefalitis <strong>de</strong> St. Louis, encefalitis Japonesa, encefalitis <strong>de</strong> California,West Nile, Alfavirus,<br />
Dengue,<br />
En niños : A<strong>de</strong>novirus, HHV-6, RSV, IA, IB, Rotavirus, Parvovirus B19
http://www.msp.gub.uy/ucepi<strong>de</strong>miologia_4499_1.html