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Diagnóstico de las Enfermedades Virales

Diagnóstico de las enfermedades virales

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<strong>Diagnóstico</strong><br />

<strong>de</strong> <strong>las</strong><br />

Enfermeda<strong>de</strong>s <strong>Virales</strong><br />

Dra. Dora Ruchansky<br />

Prof. Adjunta Dpto.Bacteriología y Virología.<br />

Facultad <strong>de</strong> Medicina - UDELAR


Más <strong>de</strong> 100………..<br />

Herpesviridae<br />

HSV-1, HSV-2, VZV,<br />

CMV, EBV, HHV6,<br />

HHV7, HHV8<br />

Arenaviridae<br />

LCMV<br />

Orthomixoviridae<br />

Virus Influenza<br />

Thogoto<br />

Poliomaviridae<br />

JCV<br />

Parvoviridae<br />

Parvovirus B19<br />

A<strong>de</strong>noviridae<br />

A<strong>de</strong>novirus<br />

Paramyxoviridae<br />

Virus <strong>de</strong>l Sarampión<br />

Virus Urleano<br />

Retroviridae<br />

VIH,<br />

Flaviviridae<br />

JEV, Murray Vallley Virus,<br />

WNV, SLV, Dengue<br />

Bunyaviridae<br />

Fiebre hemorragica Crimea-Congo,<br />

Virus La Crosse,<br />

Virus <strong>de</strong> la Encefalitis California<br />

Picornaviridae<br />

Virus Polio, Coxsackie,<br />

Echovirus, Parechovirus<br />

Enterovirus 70<br />

Reoviridae<br />

Virus <strong>de</strong> la fiebre<br />

<strong>de</strong>l Colorado<br />

Togaviridae<br />

Chikungunya,<br />

EEEV, WEEV,<br />

VEEV,<br />

Rhabdoviridae<br />

Chandipura virus<br />

Virus <strong>de</strong> la rabia


VIRUS IMPLICADOS EN INFECCIONES DEL SNC<br />

MENINGITIS<br />

ENCEFALITIS<br />

RHOMBOENCEFALITIS<br />

DEMENCIA<br />

MIELOPATIA<br />

MIELITIS<br />

FRECUENTES<br />

Enterovirus<br />

Arbovirus*<br />

HSV-2 (asociado a herpes genital<br />

primario)<br />

HIV (en periodo <strong>de</strong> seroconversión y<br />

durante el curso <strong>de</strong> la enfermedad)<br />

JEV*<br />

Enterovirus<br />

Arbovirus*:<br />

WNV<br />

EEEV<br />

WEEV<br />

VEEV<br />

SLV<br />

Murray Valley,<br />

HSV-1(adultos)<br />

HSV-2 (neonatos)<br />

A<strong>de</strong>novirus<br />

HIV-1 (en seroconversión)<br />

WNV<br />

HSV-1<br />

Sarampión-Subacute sclerosing<br />

panencephalitis (niños)<br />

Rubeola-Progressive rubella<br />

panencephalitis (adultos jóvenes)<br />

HIV-1<br />

HIV-1<br />

HTLV-1<br />

WNV<br />

VZV<br />

POLIO<br />

HSV-1<br />

RAROS<br />

virus Urleano<br />

LCMV<br />

HSV-1<br />

VZV<br />

CMV<br />

EBV<br />

IA, IB<br />

Parvovirus B19<br />

VZV<br />

CMV<br />

EBV<br />

HHV6<br />

HHV7<br />

Rabia<br />

Nipah<br />

Hendra<br />

Dengue*<br />

HSV-2<br />

EBV<br />

HTLV-2<br />

Adaptado <strong>de</strong>: Neurol Clin 26 (2008) 617-633, Practical Neurology 2007;7;288-305


Tipo <strong>de</strong> Muestra: LCR<br />

ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />

Cantidad: Adultos: ≥ a 2 mL<br />

Niños: 1,5 mL<br />

Toma <strong>de</strong> Muestra - Oportunidad<br />

Punción lumbar al momento <strong>de</strong>l diagnóstico clínico,<br />

Recolección en tubo estéril y exclusiva para estudio etiológico viral.<br />

I<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> la muestra<br />

Correcto rotulado <strong>de</strong>l tubo con i<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong>l paciente y fecha <strong>de</strong> la toma<br />

Ficha adjunta:. Edad, Sexo, Proce<strong>de</strong>ncia, Fecha <strong>de</strong> inicio <strong>de</strong> síntomas, Datos clínicos,<br />

Resultado citoquímico, viajes recientes, posible exposición a reservorios animales o vectores.<br />

<strong>Diagnóstico</strong> presuntivo,<br />

Conservación <strong>de</strong> la muestra<br />

Una vez obtenida, y mientras no se realice el envío al Laboratorio, mantener refrigerada (no<br />

congelar) a 4º C.<br />

Condiciones <strong>de</strong> envío<br />

El envío <strong>de</strong>be ser bajo condiciones <strong>de</strong> refrigeración (4º C) y según pautas internacionales<br />

para transporte <strong>de</strong> muestras biológicas, se <strong>de</strong>be hacer con el sistema <strong>de</strong> triple envase.<br />

Enviar al laboratorio <strong>de</strong>ntro <strong>de</strong> <strong>las</strong> 8 – 10 horas <strong>de</strong> obtenida la muestra.<br />

.


ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />

Estudio Citoquímico:<br />

Aspecto: Claro (cristal <strong>de</strong> roca)<br />

Pleocitosis linfocitaria: 100 – 1000 cel/uL*<br />

Glucorraquia: Normal<br />

Proteinorraquia: Ligeramente elevada 0,5-2 g/L<br />

*Presencia <strong>de</strong> neutrófilos en meningitis virales


ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />

Metodos <strong>de</strong> Estudio:<br />

● Aislamiento viral<br />

● Ensayos Serológicos<br />

Detección anticuerpos específicos (producción intratecal)<br />

● Técnicas <strong>de</strong> Biología Molecular<br />

PCR<br />

RT-PCR<br />

PCR REAL TIME<br />

Secuenciación


Ensayo Serológico<br />

ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />

Detección temprana <strong>de</strong> IgM (producción intratecal) en respuesta a infección <strong>de</strong>l SNC<br />

TECNICA DE MAC ELISA<br />

IgM presente<br />

en LCR<br />

Anti-IgM<br />

Ac. monoclonal<br />

conjugado c/ HRP<br />

Antígeno<br />

Virus San<br />

Luis<br />

Sustrato<br />

TMB<br />

la presencia <strong>de</strong> anticuerpos específicos <strong>de</strong> virus IgM en LCR es diagnóstica.<br />

Virus <strong>de</strong> San Luis<br />

Virus West Nile<br />

Virus <strong>de</strong> la Encefalitis Japonesa<br />

Dengue


ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR<br />

Técnicas <strong>de</strong> Biología Molecular<br />

La búsqueda <strong>de</strong> ácidos nucleicos virales en <strong>las</strong> muestras <strong>de</strong> LCR facilita la<br />

i<strong>de</strong>ntificación viral en poco tiempo, con alta <strong>de</strong> la especificidad y la sensibilidad.<br />

Extracción<br />

<strong>de</strong> ARN o<br />

ADN<br />

RT-PCR*<br />

LCR<br />

PCR*<br />

Amplicones<br />

<strong>de</strong> la región<br />

genómica<br />

viral<br />

estudiada<br />

*uso <strong>de</strong> cebadores específicos <strong>de</strong> regiones consenso (ej enterovirus)<br />

o específicos (ej. SLV)


DETECCIÓN DE ACIDOS NUCLEICOS VIRALES EN LCR<br />

PACIENTES<br />

PACIENTES<br />

INMUNODEPRIMIDOS<br />

NMUNOCOMPETENTES<br />

sospecha o confirmado<br />

ENCEFALITIS<br />

MENINGITIS<br />

HSV-1, HSV-2, VZV<br />

ENTEROVIRUS<br />

ARBOVIRUS*<br />

EBV / CMV<br />

HHV 6<br />

HHV7<br />

VIH<br />

JCV<br />

HSV-2,VZV<br />

ENTEROVIRUS<br />

ARBOVIRUS*<br />

VIH<br />

HSV-1, HSV-2, VZV<br />

ENTEROVIRUS,<br />

ARBOVIRUS*<br />

HSV-2,VZV<br />

ENTEROVIRUS<br />

ARBOVIRUS*<br />

* En casos con posible exposición a vectores, y/o regiones con brotes epidémicos:<br />

Encefalitis Equina <strong>de</strong>l Este, Encefalitis Equina <strong>de</strong>l Oeste,Encefalitis equina venezolana,<br />

Encefalitis <strong>de</strong> St. Louis, encefalitis Japonesa, encefalitis <strong>de</strong> California,West Nile, Alfavirus,<br />

Dengue,<br />

En niños : A<strong>de</strong>novirus, HHV-6, RSV, IA, IB, Rotavirus, Parvovirus B19


http://www.msp.gub.uy/ucepi<strong>de</strong>miologia_4499_1.html

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