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Extracción de ADN Manual del Alumno
Nivel avanzado
Extracción y precipitación de ADN: ¿Cómo funciona?
Los alumnos comenzarán esta actividad haciendo un raspado de las células del interior de su boca y
depositando las células recogidas en un tubo con solución tampón de lisis. La solución tampón de lisis
contiene un detergente que rompe las membranas celular y nuclear, dejando el ADN libre. También
contiene un compuesto tampón para mantener el pH de la solución de manera que el ADN permanezca
estable.
Se añade proteasa, una enzima que digiere proteínas, para eliminar las proteínas unidas al ADN y para
destruir las enzimas celulares que podrían digerir el ADN. Esto asegura que la cantidad de ADN intacto
recogida sea máxima. El extracto celular que contiene proteasa se incuba a 50 ºC, la temperatura óptima
para la actividad proteasa.
El ADN y otros componentes celulares, como lípidos, azúcares y proteínas, se disuelven en la solución
de lisis. El ADN tiene carga negativa debido a los grupos fosfato de su estructura, y esta carga eléctrica es
lo que hace soluble a esta molécula. Cuando se añade sal a la muestra, los iones sodio con carga positiva
son atraídos por las cargas negativas del ADN, neutralizando la carga del ADN. Esto permite a las
moléculas de ADN unirse en vez de repelerse entre sí. La adición de alcohol frío precipita el ADN dado
que es insoluble en altas concentraciones de sal y alcohol. El ADN precipitado forma unas finas hebras
blancas y visibles en el límite de separación de la fase de alcohol, mientras que el resto de las sustancias
permanecen disueltas.
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