MEMORIAS EN EXTENSO(7).pdf - FAZ-UJED - Universidad Juárez ...

Memoria de la XIX Semana Internacional de Agronomía FAZ-UJED Noviembre del 2007.
microorganismo En el LCRM se tiene implementada la técnica de biología molecular aplicada a
la epidemiología de la tuberculosis. El Spoligotipado es una técnica de tipificación molecular
basada en PCR, con la que se puede caracterizar genotípicamente las cepas de Mycobacterium
tuberculosis (MTB). Está basada en el polimorfismo existente en una región del cromosoma de
MTB (DR: repeticiones directas) constituida por una serie de repeticiones de secuencia
conservada, separadas por espaciadores de 35-41 pares de bases.
Caracterización molecular de patógenos de importancia veterinaria.
El INIFAP, ha trabajado en la implementación de pruebas moleculares como es la PCR
que permite identificar los agentes causantes de las enfermedades. Además de apoyar en el
diagnóstico se da un seguimiento de la enfermedad, mediante el desarrollo de protocolos
sanitarios que apoyen a los productores en el manejo de las enfermedades. El uso de PCR,
además de servir en la detección del patógeno asociado con la enfermedad o involucrado en un
alimento, se usa para la caracterización molecular de los patógenos de manera tal que se
puede identificar con un grado alto de precisión el género, la especie he incuso subespecie.
Las técnicas de PCR-Multiplex con que cuenta el LCRM permiten la detección
simultanea de organismos del complejo Mycobacterium tuberculosis y de Brucella spp, además
de la detección de Anaplasma, Babesia bovis y B. bigemina. En estas pruebas de PCR-
Multiplex se emplean dos o más pares de iniciadores en una sola reacción con el fin de
amplificar simultáneamente segmentos de ADN de cada microorganismo. Además se cuenta
con la PCR para la detección de Leptospira, Brucella, Mycobacterium tuberculosis y el virus de
la Rinotraqueitis Infecciosa Bovina (IBR), que amplifican un segmento de los genomas que se
requieran estudiar.
También esta disponible el PCR anidado para la detección del complejo Mycobacterium
tuberculosis, que incluye dos reacciones secuenciales de PCR. El producto de la primera
reacción de PCR se utiliza como templado de la segunda reacción y los oligonucleotidos
hibridan en una región interna del primer producto. La sensibilidad se incrementa prácticamente
al doble, ya que en este mismo nivel se incrementa el número total de ciclos. Lo mismo ocurre
en la especificidad, ya que el producto del primer PCR esta enriquecido de la secuencia
deseada y es muy poco probable que los oligonucleotidos del segundo PCR hibriden con las
posibles inespecificidades generadas en el primer PCR.
.
20