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Las lesiones macroscópicas primarias consisten en la presencia de un exudado serofibrinoso ofibrinopurulento en las superficies mucosas, de forma localizada o en presencia múltiple,incluyendo el peritoneo, el pericardio y la pleura, así como las superficies articulares (figs. 2, 3 y4), particularmente en el carpo y tarso. La presencia de neumonía no es un suceso habitual,incluso aunque el microorganismo haya sido aislado de los pulmones. Según algunos autores, lasdiferencias en la capacidad para producir neumonía (fig. 5) pueden deberse a las diferencias en elmodo de infección, en las dosis infectantes y en el potencial patógeno de las cepas implicadas, almenos según se desprende de los datos derivados de infecciones experimentales: por ejemplo, losserotipos 1, 4 y 5 no se distinguen por su capacidad para producir neumonía (Amano et al., 1994).Ocasionalmente se han descrito, también, fascitis, miositis y rinitis purulenta.En los casos septicémicos se observa la presencia de petequias y equimosis en el hígado, riñón ymeninges, detectándose también altos niveles de endotoxinas en el plasma, así como trombos defibrina en muchos órganos (Amano et al., 1994). La replicación subsiguiente del microorganismoen las superficies serosas produce las poliserositis, poliartritis y meningitis que se observan en loscasos de campo típicos. Con menor frecuencia, puede observarse un proceso septicémico agudoque incluye cianosis, edema subcutáneo y pulmonar y muerte, todo ello en ausencia de los típicossignos inflamatorios de las mucosas.Las meninges son una de las localizaciones de inflamación más frecuentes de la enfermedadllegando, en ocasiones, a presentarse en el 80% de los animales enfermos. En los casos muygraves puede apreciarse meningitis, opacidad de las membranas del cerebro (región occipital) ycerebelo. Habitualmente se produce un aumento del líquido cefalorraquídeo, que presenta unaspecto lechoso debido a la abundancia de glóbulos blancos. Ocasionalmente, se ha descritomeningoencefalitis trombótica, con depósitos de fibrina en meninges y vasos sanguíneos y, otrasveces, edema moderado (Segales, 1996). Asimismo, se ha descrito una gran cantidad deneutrófilos y, en menor número, macrófagos.DIAGNÓSTICOGeneralmente, se basa en la historia clínica, síntomas, lesiones y otros datos epidemiológicos. Elaislamiento de H . p a r a s u i s en el laboratorio resulta necesario para la confirmación. Debido ala naturaleza "fastidiosa" de estas bacterias, su fragilidad y los complejos requerimientosnutritivos necesarios para su crecimiento, no siempre es posible realizar el aislamiento. A todo ellose suma que la presencia de otros microorganismos de más fácil supervivencia y recuperación enlas muestras clínicas, colabora a enmascarar la enfermedad, por lo que algunos autores hanestimado que la verdadera tasa de incidencia de la misma puede llegar a ser hasta más de diezveces mayor que la que se deriva de los datos de laboratorio.Los mejores resultados en este caso se obtienen cultivando material procedente de variassuperficies serosas o de exudados, incluyendo líquido cerebroespinal y sangre del corazón, auncuando no se observen lesiones; también se puede utilizar líquido ascítico, torácico, pericárdico oarticular, hisopos nasales y traqueales, así como parénquima pulmonar. H. parasuis puederecuperarse, asimismo, a partir de los fluidos contaminados si se utiliza un medio de transporteadecuado hasta su llegada al laboratorio (MéndezTrigo y Trigo, 1996).Entre los medios de cultivo se recomienda el uso de un medio base para ágar sangre con un 5%de sangre de caballo desfibrinada y triptosa, utilizando una estría de estafilococos para aportar elNAD necesario; se puede utilizar también agar chocolate u otras opciones, como los medios PPLO(fig. 6), Levinthal o Gilbride y Rosendal (tripticasa-soja enriquecida con suero de caballo, extractode levadura y NAD, en las proporciones habituales; además, se puede hacer selectivo añadiendolincomicina y bacitracina). Las condiciones de aislamiento precisan el cultivo durante 2448 horas a37°C en atmósfera microaerófila (5% de CO2 ). Los aislamientos han de diferenciarse de otrosmicroorganismos próximos de la familia Pasteurellaceae, también NAD-dependientes (A.pleuropneumoniae, A. minor, Haemophilus taxón C, A. porcinus y A . i n d o l i c u s) (fig. 7),algunos de los cuales pueden estar presentes en gran número en la cavidad nasal, en las tonsilaso en los pulmones aunque, con la excepción de A . p l e u r o p n e u m o n i a e, carecen designificado patogéno. Aun así se debe incidir, una vez más, en que el aislamiento no siempre seconsigue. La serotipificación de H. parasuis solamente se realiza en laboratorios de referencia o enlos especialmente capacitados para el trabajo con este microorganismo.La aplicación de técnicas inmunohistológicas depende de la calidad de los anticuerpos utilizados(policlonales o monoclonales). Se utilizan sobre tejidos fijados en formol e incluidos en parafina yse basan en el sistema avidina-biotina.Desde el punto de vista pasivo, se pueden detectar anticuerpos en el suero de los animalesenfermos, con la limitación de no poderse diferenciar el serotipo implicado en la infección. Se hautilizado fijación del complemento, ELISA e inmunofluorescencia. El ELISA indirecto es el