Evaluación del potencial probiótico de bacterias ácido lácticas para ...

C. Cueto y S. Aragón / Scientia Agropecuaria 1(2012) 45 - 50incluso supera las muertes violentas o porcánceres combinados. En países desarrollados,el 70% de la población está enriesgo de desarrollar enfermedades deorigen cardiaco (Roth, 2010), la cual seencuentra sin tratamiento a pesar de queéste es económico y de fácil acceso, por loque se están promoviendo actividades deprevención, que incluyen disminuir el usode tabaco, realizar actividad física yconsumir alimentos saludables.Entre los alimentos saludables están losenriquecidos con microorganismos probióticoscomo bacterias ácido lácticas (BAL),y se ha visto que uno de los principalesbeneficios sobre la salud del consumidorprobablemente sea la reducción decolesterol sérico (Pereira et al. 2003).Se han realizado algunos estudios de cepasbacterianas con potencial reductor decolesterol y conocido algunos mecanismosque logran esta reducción como son ladesconjugación de las sales biliares poracción de la enzima hidrolasa (BSH) (E.C.3.5.1.24) activa en muchas especies BAL(Lye et al., 2010) y la absorción delcolesterol en el lumen intestinal. Laadsorción de colesterol incrementa sudemanda para la síntesis de nuevos ácidosbiliares o por reducción de la solubilidaddel colesterol. Algunos autores hanreportado la capacidad de las bacterias deincorporar a la membrana o adherircolesterol a la superficie, reduciendo ladisponibilidad para su absorción intestinaly posterior pase a la sangre (Belviso et al.,2009).El presente estudio evaluó el potencialprobiótico, de cinco BAL aisladas dematrices lácteas de productos autóctonoscolombianos, para adsorber colesterol ydesconjugar las sales biliares, a través depruebas in vitro como con posterioraplicación a nivel industrial en el diseño ydesarrollo de productos alimenticios.2. Material y métodosAislamientos de cepas de LactobacillusSe realizaron aislamientos de cepas deLactobacillus a partir de nueve muestras de-46-suero costeño, provenientes de losdepartamentos de Sucre y Córdoba(Colombia) (Cueto et al., 2007). Comoreferencia se utilizaron las cepasLactobacillus acidophilus ATCC 4356(Liong y Shah, 2005) y Lactobacillusfermentum ATCC 9338 (Gardiner et al.,2002) provenientes del cepario de laFacultad de Ingeniería de la Universidadde La Sabana (Chía, Cundinamarca,Colombia). Los aislamientos se conservarona -80°C en caldo Man RogosaSharpe (MRS) y 30% de glicerol (v/v). Lasbacterias fueron incubadas 24 h en medioMRS en condiciones aeróbicas a 37°C,antes de realizar los ensayos.Simulación de tolerancia a jugo gástricoy sales biliaresLa resistencia a pH 2.0 y la tolerancia asales biliares se determinó según métodologíapropuesta por (Guo et al., 2010). Seajustó el pH a 2.0 del caldo MRS con HCl6M, se inoculó 100 µL del microorganismoa evaluar, se incubó por 2 h a 37°Cy se realizó un recuento inicial en placa delcultivo y uno después de las 2 h deincubación. La tolerancia a sales biliares serealizó enriqueciendo el caldo MRS con0.3% sales biliares (Sigma B8756) einoculando 100 µL de la cepa a evaluar, seincubó por 2 h a 37°C y se realizó unrecuento en placa inicial del cultivo y unodespués de las 2 h de incubación. Elporcentaje de supervivencia fue calculadomediante la siguiente ecuación (1):Donde N 1 representa el total de célulasviables después del tratamiento y N 0 elnúmero inicial microorganismos inoculados(Bao et al., 2010).Determinación de la resistencia a antibióticosde importancia epidemiológicaSe realizó la prueba de difusión agar, concepas cultivadas en caldo MRS a 37°Cdurante 8 h y recogidas las células porcentrifugación. Se evaluó la sensibilidad delas células a antibióticos vancomicina ycefoxitin en placa, incubación a 37°C por