Evaluación del potencial probiótico de bacterias ácido lácticas para ...

C. Cueto y S. Aragón / Scientia Agropecuaria 1(2012) 45 - 50Del análisis de resistencia a pH 2.0 y toleranciaa sales biliares 0.3%, condicionesque afectan la supervivencia bacterianadurante su paso a través de un modelo invitro del tracto gastrointestinal durante las2 h que tarda la comida en atravesar elsistema (Urbanska et al., 2007), se observóque el 48.6% de las cepas estudiadasfueron capaces de sobrevivir a las condicionespropuestas por el estudio.De las cepas seleccionadas como microorganismoscon potencial probiótico, la cepaK72 fue la que presentó mayor toleranciaante las condiciones de pH 2.0 y salesbiliares 0.3%, disminuyendo en promedio2.1±0.2 unidades logarítmicas y la cepaque presentó menor tolerancia fue K11disminuyendo en promedio 4.9±0.2unidades logarítmicas. Los resultadospresentados en la Tabla 1 son consistentescon los reportados por (Vizoso et al.,2006), quienes evalúan el comportamientode las cepas de Lactobacillus aisladas deheces fecales en niños y en productoslácteos fermentados típicos de Kenia,observando una disminución entre 2 y 3unidades logarítmicas.Resistencia a antibióticos de importanciaepidemiológicaSe seleccionaron las 26 cepas que toleraronsimultáneamente las condiciones de pH 2.0y 0.3% de sales biliares para realizar elanálisis de resistencia a antibióticos ycinco cepas fueron sensibles antevancomicina y cefoxitín. Estas seidentificaron molecularmente medianteanálisis bioinformático; se obtuvieronsecuencias en promedio de 773.8± 36.6 pbde los amplímeros de la región 16S RNA.La totalidad de las cepas evaluadaspresentó homología del 87.3±3.3% frente aLactobacillus fermentum.La resistencia ante los antibióticos es uncreciente problema por ser fácilmentetransferible entre microorganismos.Hummel et al. (2007) reportan que laresistencia a cefoxitin genera mutacionespuntuales que confieren resistenciaadicional a las quinolonas obligando a loshospederos, el consumo de antibióticosnefrotóxicos. También importa prevenir lageneración de Enterococcus vancomicinaresistentes, agentes de infeccionesnosocomiales, quienes adquieren la resistenciapor mecanismos de trasferenciahorizontal y cuyas patologías adyacentesson de mal pronóstico clínico (Ray et al.,2003), razón por la cual, las cepas quemanifestaron resistencia a los antibióticosfueron excluidas del estudio.Actividad de la enzima BSHLas cepas 1_1, K72 y el control L.fermentum ATCC 9338 no mostraronactividad de la enzima BSH, probablementepresenta actividad frente a otrossustratos como taurodeoxicolato de sodio ono poseen el gen, el cual se trasfiere deforma horizontal entre cepas de la mismaespecie (Elkins et al., 2001). La cepa conmayor actividad total y específica fue K75;la cepa control L. acidophilus ATCC 4356,presentó las menores actividades.El análisis estadístico mostró que no haydiferencias estadísticamente significativasentre las muestras al medir las proteínastotales, pero sí existen entre la actividadtotal y la actividad específica halladas,para un α = 0.05 (Tabla 2).Tabla 2Actividad enzimática BSH.aCepaActividadtotal(U mL -1 )Actividadespecífica(U mg -1 )1_1 N/A N/AaK11 1.08±0.13a1.41±0.01K72 N/A N/AaK73 1.73±0.22aK75 2.02±0.06L. fermentumN/AATCC 9338L. acidophilusaATCC 4356 1.02±0.09a3.20±0.10a3.5±0.10N/Aa1.54±0.14Los valores con la misma letra no presentandiferencias estadísticamente significativas paraα=0.05.-48-