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Aplicaciones biotecnológicas en el mejoramiento genético de ...

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Proyecto BID-PI-C-2001-1-A-071“<strong>Aplicaciones</strong> biotecnológicas <strong>en</strong> <strong>el</strong> mejorami<strong>en</strong>to g<strong>en</strong>ético <strong>de</strong> especies <strong>de</strong> Rhodophialachil<strong>en</strong>asautopoliploidía, no necesariam<strong>en</strong>te cada vez que se induzca poliploidía se producirá unmejorami<strong>en</strong>to. El resultado es bastante incierto. No obstante, esta era una alternativa válidapara int<strong>en</strong>tar aum<strong>en</strong>tar <strong>el</strong> tamaño <strong>de</strong> la infloresc<strong>en</strong>cia con miras a la utilización comercial <strong>de</strong>Rhodophiala.5.9 Resultados <strong>de</strong> estudios citológicos y moleculares <strong>en</strong> torno a clarificar r<strong>el</strong>acionesfilog<strong>en</strong>éticas <strong>en</strong>tre especies e híbridosLa Tabla 1 muestra los números cromosómicos, niv<strong>el</strong>es <strong>de</strong> ploidía, fórmula cariotípica e índices<strong>de</strong> asimetría <strong>de</strong> los cariotipos <strong>de</strong> las distintas especies <strong>de</strong> Rhodophiala estudiadas. Lasespecies muestran números cromosómicos somáticos mayoritariam<strong>en</strong>te 2n=18, existi<strong>en</strong>docasos <strong>de</strong> 2n=16, Los índices <strong>de</strong> asimetría ti<strong>en</strong>d<strong>en</strong> a acercarse a 0.6 <strong>en</strong> la mayoría <strong>de</strong> lasespecies, a excepción <strong>de</strong> R. rhodolirion que es 0.46. En cuatro especies, los 2 pares <strong>de</strong>cromosomas más pequeños son metacéntricos, los <strong>de</strong> mayor tamaño son submetacéntricos ysubt<strong>el</strong>océntricos, <strong>en</strong> R. rhodolirion los 2 pares más pequeños son subt<strong>el</strong>océntrico ysubmetacéntrico, los <strong>de</strong> mayor tamaño son metacéntricos, submetacéntrico y subt<strong>el</strong>océntrico.Análisis <strong>de</strong> las secu<strong>en</strong>cias <strong>de</strong> regiones ITS1/5.8S/ITS2 <strong>en</strong>tre partidores ITS Plant y C26A (738pb) <strong>de</strong> cada especie estudiada rev<strong>el</strong>aron la exist<strong>en</strong>cia <strong>de</strong> escasa variabilidad interespecífica.Entre R. montana y R. spl<strong>en</strong>d<strong>en</strong>s no se <strong>de</strong>tectaron polimorfismos interespecíficos. Entre R.montana y R. bagnoldii, las secu<strong>en</strong>cias <strong>de</strong> ambas especies difirieron por 2 mutacionespuntuales, R. montana y R. phyc<strong>el</strong>loi<strong>de</strong>s por 2 mutaciones puntuales al igual que R. montana yR. ananuca. Al comparar <strong>en</strong>tre sí las <strong>de</strong>más especies, no se <strong>de</strong>tectaron polimorfismosinterespecíficos. En R. montana se <strong>de</strong>tectó polimorfismo intraespecífico <strong>en</strong> un sitio <strong>de</strong> mutaciónpuntual, <strong>en</strong> R. spl<strong>en</strong>d<strong>en</strong>s 2 sitios y <strong>en</strong> R. bagnoldii 3 sitios. Los difer<strong>en</strong>tes sitios <strong>de</strong> mutaciónpuntual intra e interespecíficos, como los sitios <strong>de</strong> restricción para difer<strong>en</strong>tes <strong>en</strong>zimas seindican <strong>en</strong> la Tabla 2. La especie R. rhodolirion constituye un caso especial, difiri<strong>en</strong>do <strong>en</strong> más<strong>de</strong> 90 sitios puntuales <strong>de</strong> mutación con respecto a las <strong>de</strong>más especies.La Figura 1 pres<strong>en</strong>ta un filograma resultado <strong>de</strong> la comparación <strong>de</strong> las secu<strong>en</strong>cias ITS <strong>de</strong> lasespecies estudiadas junto a secu<strong>en</strong>cias reportadas por Meerow et al., (2000) <strong>de</strong> R. cipoana,Phyc<strong>el</strong>la ignea e Hippeastrum brasileum La especies <strong>de</strong> R. ananuca, R. montana, R.phyc<strong>el</strong>loi<strong>de</strong>s, R. spl<strong>en</strong>d<strong>en</strong>s y R.bagnoldii constituy<strong>en</strong> un grupo cercanam<strong>en</strong>te r<strong>el</strong>acionado,alejándose <strong>de</strong> R. rhodolirion que es más cercana a P. ignea y separándose <strong>de</strong> R. cipoana quees más cercana a H. brasileum.Informe Técnico y <strong>de</strong> Gestión Final 36

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