Effet de la sonication sur les rendements d'extraction ... - Sciencelib

2.2. Préparation des extraits
L’acétone et le méthanol sont les deux solvants utilisés pour l’extraction des pigments algaux. Un
broyat d’algues de 3 g est additionné à 30 ml de solvant. Après ajout de 300 mg de sulfate de
magnésium, l’ensemble est incubé pendant 24 heures à 4°C. Dans le cas de l’extraction solide-
liquide assistée par des ultrasons (UAE), la solution subit une sonication de 5 minutes avant
l’incubation. Le mélange obtenu est filtré puis centrifugé à 5 000 g pendant 10 minutes, le surnagent
est ainsi récupéré pour être utilisé dans les dosages ultérieurs.
2.3. Détermination des taux de pigments
La quantification des chlorophylles et des caroténoïdes est effectuée selon la méthode de Dere et al.
(1998). C’est une méthode spectrale utilisant des longueurs d’ondes caractéristiques qui
correspondent aux absorbances maximales des chlorophylles et des caroténoïdes.
Les concentrations des caroténoïdes (Cc) totaux et des chlorophylles a et b (Ca et Cb) sont
déterminées par la mesure des absorbances des échantillons en utilisant un spectrophotomètre (UV
mini 2010, SHIMADZU). Les équations proposées par Dere et al. (1998) sont utilisées pour la
détermination de ces pigments. Dans les extraits d’acétone, le dosage est effectué suivant les
formules (1), (2) et (3) avec une lecture des absorbances à 662, 645 et 470 nm pour les
chlorophylles a, b et les caroténoïdes totaux respectivement :
Ca (μg/ml) = 11. 75 A662 – 2.350 A645 (1)
Cb (μg/ml) = 18. 61 A645 – 3.960 A662 (2)
Cc (μg/ml) = 1000 A470 – 2.270 Ca – 81. 4 Cb/227 (3)
ScienceLib Editions Mersenne : Volume 5 , N ° 130106
ISSN 2111-4706
SADI Hamza
5