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Évaluation globale de la résistance des bananiers à la fusariose ...

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Gui<strong>de</strong>s techniques INIBAP 7 47<br />

• p<strong>la</strong>cer <strong>la</strong> salière dans un incubateur <strong>à</strong> 35°C ;<br />

• au bout <strong>de</strong> 15-20 minutes, vérifier si l’éthanol s’est évaporé. S’il s’est évaporé,<br />

ajouter quelques gouttes <strong>de</strong> solution II (éthanol <strong>à</strong> 95 % + 2 gouttes <strong>de</strong><br />

glycérine/100 ml) ;<br />

• répéter l’opération plusieurs fois jusqu’<strong>à</strong> ce que l’éthanol soit évaporé ;<br />

• ajouter quelques gouttes <strong>de</strong> glycérine (juste assez pour que les némato<strong>de</strong>s soient<br />

immergés).<br />

4. Préparation <strong>de</strong>s <strong>la</strong>mes<br />

• chauffer sur une f<strong>la</strong>mme l’extrémité <strong>de</strong> 1,5 cm <strong>de</strong> diamètre d’un tube en cuivre<br />

;<br />

• plonger l’extrémité chauffée dans <strong>de</strong> <strong>la</strong> paraffine ;<br />

• une fois <strong>la</strong> paraffine fondue, appliquer l’extrémité du tube sur une <strong>la</strong>me <strong>de</strong> verre<br />

<strong>de</strong> façon <strong>à</strong> former un mince anneau <strong>de</strong> paraffine qui se solidifiera rapi<strong>de</strong>ment ;<br />

• verser une petite goutte <strong>de</strong> glycérine au centre <strong>de</strong> l’anneau <strong>de</strong> paraffine ;<br />

• <strong>à</strong> l’ai<strong>de</strong> d’une aiguille, déposer les némato<strong>de</strong>s au centre <strong>de</strong> <strong>la</strong> goutte <strong>de</strong> glycérine<br />

(10 némato<strong>de</strong>s/goutte <strong>de</strong> glycérine) ;<br />

• recouvrir d’une <strong>la</strong>melle ;<br />

• p<strong>la</strong>cer <strong>la</strong> <strong>la</strong>melle sur une p<strong>la</strong>tine chau<strong>de</strong> pendant quelques secon<strong>de</strong>s (l’anneau<br />

<strong>de</strong> paraffine fond alors, <strong>de</strong> sorte que <strong>la</strong> <strong>la</strong>melle adhère et maintient <strong>la</strong> glycérine<br />

au centre <strong>de</strong> l’anneau) ;<br />

• p<strong>la</strong>cer <strong>la</strong> <strong>la</strong>me sur une surface froi<strong>de</strong> (l’anneau <strong>de</strong> paraffine va rapi<strong>de</strong>ment se<br />

solidifier) ;<br />

• sceller <strong>la</strong> <strong>la</strong>melle (par exemple avec du vernis <strong>à</strong> ongles).

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