Virus d'Epstein-Barr - Diagenode Diagnostics

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PAGE 2 DIAGENODE QUANTITATIVE CYTOMEGALOVIRUS REAL-TIME PCR MANUEL D'UTILISATION Europe <strong>Diagenode</strong> sa/CHU - Tour GIGA - B34 - 3 e étage//Avenue de l’Hôpital, 1 //4000 Liège (Sart Tilman)//Belgium //Phone : (+32) 4 364 20 50 //Mail : info@diagenode.com
PAGE 3 Sommaire Information générale .......................................................................................................................................... 5 Champs d’application / Intérêt du dispositif .................................................................................................... 5 Information sur l’agent pathogène ................................................................................................................... 5 Description du produit ....................................................................................................................................... 6 Stockage .............................................................................................................................................................. 7 Avertissements et précautions ......................................................................................................................... 8 Matériel requis, non fourni............................................................................................................................... 10 Utilisation d'échantillons humains / Champ d'application de la trousse ................................................... 10 Prélèvement, stockage et transport d'échantillons humains ...................................................................... 11 1. Prélèvement d'échantillons ................................................................................................................ 11 2. Stockage des échantillons ................................................................................................................. 11 3. Transport des échantillons ................................................................................................................. 11 Protocole ........................................................................................................................................................... 12 A. Procédures à suivre A.1. Procédure d’extraction (cf. point B2. Extraction d’échantillons / Isolation d’ADN) .............................. 12 A.2. Procédure de la PCR (cf. point B3. Préparation de la réaction PCR) ................................................. 13 A.3. Amplification et procédures des systèmes en temps réel ................................................................... 14 A.4. Interprétation des résultats .................................................................................................................. 14 B. Annexes de la procédure B.1. Contrôle d’extraction d’ADN & d’inhibition (option) ............................................................................. 17 B.2. Extraction d’échantillons / Isolation d’ADN .......................................................................................... 18 B.3. Préparation de la réaction PCR ........................................................................................................... 19 B.4. Programme de PCR ............................................................................................................................ 24 B.5. Sélection des fluorophores appropriés ................................................................................................ 25 ABI ® 7000-7300-7500-7900HT / StepOnePlus .............................................................................. 26 Roche LightCycler ® 480 - Lc2.0 .......................................................................................................... 26 Biorad iCycler ® -IQ5-CFX96................................................................................................................. 27 Agilent Stratagene ® MX3000P-3005P ................................................................................................ 27 Qiagen Rotor-Gene ® 3000 / 6000 ...................................................................................................... 27 B.6. Interprétation des résultats .................................................................................................................. 28 Guide de résolution des problèmes .............................................................................................................. 29 Évaluation des performances ......................................................................................................................... 30 Sensibilité analytique ............................................................................................................................. 30 Spécificité analytique ............................................................................................................................. 30 Investigation clinique.............................................................................................................................. 30 Restrictions concernant l'utilisation du produit ............................................................................................ 31 Contrôle qualité ................................................................................................................................................ 31 Références ........................................................................................................................................................ 31 Explication des symboles ................................................................................................................................ 32 Avis à l'acheteur ............................................................................................................................................... 33 www.diagenodediagnostics.com
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