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Nanoparticles for in-vitro and in-vivo biosensing and imaging

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La TPL è stata qu<strong>in</strong>di sfruttata per valutare l’<strong>in</strong>ternalizzazione delle NPs <strong>in</strong> differenti l<strong>in</strong>ee cellulari<br />

(cellule HEK, epiteliali alveolari e macrofagi).<br />

Oltre all’utilizzo come mezzo di contrasto per imag<strong>in</strong>g e nella terapia fototermica, le NP possono<br />

essere sfruttate anche per il trasporto di farmaci e sono <strong>in</strong> grado di stimolare e/o sopprimere le<br />

resposte immunitarie. Inoltre possono essere funzionalizzate <strong>in</strong> modo da trasportare vacc<strong>in</strong>i e<br />

adiuvanti (agenti aggiunti ai vacc<strong>in</strong>i per aumentare la risposta immunitaria contro gli antigeni), che<br />

agiscono <strong>in</strong> modo da aumentare le risposte immunitarie <strong>in</strong>nate e adattive che generano una<br />

effettiva memoria immunologica.<br />

In questo scenario e al f<strong>in</strong>e di sfruttare <strong>in</strong> futuro le peculiari caratteristiche di emissione delle<br />

nanoparticelle per imag<strong>in</strong>g <strong>in</strong> tempo reale <strong>in</strong>-<strong>vivo</strong> e di studiarne gli effetti immunologici,<br />

parallelamente alle attività descritte, ho condotto uno studio <strong>in</strong>iziale riguardante processi di<br />

d<strong>in</strong>amica cellulare <strong>in</strong>-<strong>vivo</strong> <strong>in</strong> condizioni st<strong>and</strong>ard, ovvero con cellule marcate con sonde<br />

fluorescenti tradizionali.<br />

Con questo scopo sono stati condotti esperimenti sfrutt<strong>and</strong>o un sistema di microscopia <strong>in</strong>travital<br />

con eccitazione a due fotoni, che permette di studiare il comportamento di diverse popolazioni di<br />

cellule del sistema immunitario <strong>in</strong> organi l<strong>in</strong>foidi e <strong>in</strong> tessuti periferici.<br />

In particolare è stata studiata l’<strong>in</strong>terazione tra due specie cellulari appartenenti al sistema<br />

immunitario, le cellule dendritiche (DC) e natural killer (NK). In questo ambito ho sviluppato un<br />

metodo di analisi per caratterizzare il comportamento d<strong>in</strong>amico delle cellule NK basato<br />

sull’osservazione di un set di parametri (velocità media e istantanea, conf<strong>in</strong>ement ratio, distanza<br />

<strong>in</strong>ter-cellulare, spostamento quadratico medio) e, dal punto di vista biologico, ho verificato che uno<br />

dei meccanismi di attivazione delle capacità immunitarie delle NK è dovuto alla loro <strong>in</strong>terazione<br />

diretta con le DC.

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