à¹à¸à¸¢à¸ªà¹à¸à¸£à¸à¹à¸à¹à¸à¹à¸à¸à¸´à¸ - มหาวิà¸à¸¢à¸²à¸¥à¸±à¸¢à¸£à¸²à¸à¸ ัà¸à¸à¸£à¸°à¸à¸à¸£
à¹à¸à¸¢à¸ªà¹à¸à¸£à¸à¹à¸à¹à¸à¹à¸à¸à¸´à¸ - มหาวิà¸à¸¢à¸²à¸¥à¸±à¸¢à¸£à¸²à¸à¸ ัà¸à¸à¸£à¸°à¸à¸à¸£
à¹à¸à¸¢à¸ªà¹à¸à¸£à¸à¹à¸à¹à¸à¹à¸à¸à¸´à¸ - มหาวิà¸à¸¢à¸²à¸¥à¸±à¸¢à¸£à¸²à¸à¸ ัà¸à¸à¸£à¸°à¸à¸à¸£
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
ฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลลดระดับน้ําตาลในเลือดของ<br />
หนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
สุมิตรา<br />
เมืองขวา<br />
วิทยานิพนธนี้เปนสวนหนึ่งของการศึกษาตามหลักสูตรวิทยาศาสตรมหาบัณฑิต<br />
สาขาวิทยาศาสตรศึกษา<br />
มหาวิทยาลัยราชภัฏพระนคร<br />
พ.ศ 2550
ฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลลดระดับน้ําตาลในเลือดของ<br />
หนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
สุมิตรา<br />
เมืองขวา<br />
วิทยานิพนธนี้เปนสวนหนึ่งของการศึกษาตามหลักสูตรวิทยาศาสตรหาบัณฑิต<br />
สาขาวิทยาศาสตรศึกษา<br />
มหาวิทยาลัยราชภัฏพระนคร<br />
พ.ศ. 2550<br />
สิทธิ์ของมหาวิทยาลัยราชภัฏพระนคร
$61u~um~diCnsiuTtlr anir dor4gdnln<br />
.......<br />
ri 1 9 sfl. 2551 ..........<br />
auw amou.. ................... .H.
บทคัดยอ<br />
หัวขอวิทยานิพนธ ฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลลดระดับน้ําตาลใน<br />
เลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
ผูวิจัย สุมิตรา เมืองขวา<br />
ระดับการศึกษา วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต สาขาวิทยาศาสตรศึกษา<br />
พ.ศ. 2550<br />
ประธานกรรมการที่ปรึกษา ดร.รัศมี แสงศิริมงคลยิ่ง<br />
กรรมการที่ปรึกษา ผูชวยศาสตราจารย ดร. อภิชาต นนทประเสริฐ<br />
กรรมการที่ปรึกษา ดร. ดวงกมล วิรุฬหอุดมผล<br />
การศึกษาวิจัยครั้งนี้มีวัตถุประสงคเพื่อศึกษาฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มี<br />
ผลลดระดับน้ําตาลในเลือด ระดับเอนไซม Asparate aminotransferase (AST) Alanine<br />
aminotransferase (ALT) ระดับ Blood urea nitrogen (BUN) รวมทั้งระดับ Creatinine (Cr) ใน<br />
เลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซินขนาด 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
ผลการวิจัยพบวา หนูขาวเบาหวานกลุมที่ปอนดวยสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400<br />
และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม สามารถลดระดับน้ําตาลในเลือดไดใกลเคียงกัน อยางมีนัยสําคัญทาง<br />
สถิติ เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน สวนหนูขาวเบาหวานกลุมที่ปอนดวย<br />
Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม สามารถลดระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานไดดี<br />
ที่สุด สวนผลตอระดับเอนไซม Asparate aminotransferase (AST) Alanine aminotransferase<br />
(ALT) และระดับ Blood urea nitrogen (BUN) Creatinine (Cr) ไมมีความแตกตางกันอยางมี<br />
นัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน ในหนูขาวเบาหวานกลุมที่<br />
ปอนดวยสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และหนูขาว<br />
เบาหวานกลุมที่ปอนดวย Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ยกเวนระดับเอนไซม Asparate<br />
aminotransferase (AST) มีแนวโนมเพิ่มขึ้นอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p
(p
Thesis Title<br />
Abstract<br />
Effect of Punica granatum Linn. Peels Extract on<br />
Blood Sugar Level in Streptozotocin-Induced<br />
Diabetic Rats<br />
The Researcher Ms. Sumittra Muangkhoua<br />
Level of Study<br />
Year 2007<br />
Master of Science, Science Education<br />
Chairman of Thesis Adviser Ratsamee Sangsirimongkolying, Ph.D<br />
Thesis Adviser Assist. Prof. Apichart Nontprasert, Ph.D<br />
Thesis Adviser Daungkamol Viroonudompon, Ph.D<br />
The purpose of this research was to study the effect of Punica granatm Linn.<br />
peels extract on blood sugar level, Asparate aminotransferase (AST), and Alanine<br />
aminotransferase (ALT) (enzyme) level, and blood urea nitrogen (BUN), as well as<br />
Creatinine (Cr) level in Streptozotocin-induced diabetic rats at 50 mg./kg. The results<br />
showed that having compared with the control group, blood sugar level of the group of<br />
the oral administration of Punica granatum Linn. peels extract at 200 400 and 600 mg./kg.<br />
significantly decreased. Blood sugar level of the group of the oral administration<br />
glibenclamide 5 mg./kg. significantly decreased most effectively in the diabetic rats during<br />
treating. Asparate aminotransferase (AST), and Alanine aminotransferase (ALT), enzyme<br />
level, and blood urea nitrogen (BUN), as well as Creatinine (Cr) level did not significantly<br />
(p>0.05) different from the control group of oral administration of Punica granatm Linn.<br />
peels extract at 200 400 and 600 mg./kg. Blood sugar level of the group of oral<br />
administration of glibenclamide 5 mg./kg., excluding Asparate aminotransferase (AST)<br />
enzyme level which significantly (p
experiment, whereas blood sugar level of the glibenclamide significantly (p
กิตติกรรมประกาศ<br />
วิทยานิพนธนี้สําเร็จลงไดดวยความกรุณาของ ดร.รัศมี แสงศิริมงคลยิ่ง<br />
ผูชวยศาสตราจารย ดร.อภิชาต นนทประเสริฐ ดร.ดวงกมล วิรุฬหอุดมผล คณะกรรมการที่<br />
ปรึกษาวิทยานิพนธ ซึ่งคอยดูแลใหคําปรึกษาและแกไขขอบกพรองตางๆ ทุกขั้นตอนตลอด<br />
ระยะเวลาการทําวิทยานิพนธ<br />
กราบขอบพระคุณ คุณสิริมา มงคลสัมฤทธิ์ ที่กรุณาใหคําปรึกษาและแนะนําในการใช<br />
สถิติในการวิเคราะหขอมูล และดร.วารุณี หาญพิทักษพงศ ที่กรุณาใหขอเสนอแนะและแนวคิด<br />
ปรับปรุงวิทยานิพนธเพื่อใหมีความสมบูรณยิ่งขึ้น<br />
กราบขอบพระคุณเจาหนาที่หองปฏิบัติการ หนวยเคมีคลินิก วิทยาลัยแพทยศาสตร<br />
กรุงเทพมหานครและวชิรพยาบาลที่ใหความอนุเคราะหอุปกรณในการทดลอง เจาหนาที่หนวย<br />
สัตวทดลอง คณะเวชศาสตรเขตรอน มหาวิทยาลัยมหิดล ที่ไดใหความชวยเหลือในการดูแล<br />
สัตวทดลองเปนอยางดี ผูบังคับบัญชาและผูรวมงานทุกทานที่กรุณาเสียสละเวลาอันมีคาและ<br />
อํานวยความสะดวกในการดําเนินการวิจัยครั้งนี้<br />
ทายสุดขอกราบขอบพระคุณบิดา มารดา ซึ่งใหการสนับสนุนและเปนกําลังใจใหตลอด<br />
มา รวมทั้งทุกทานที่ไดมีสวนชวยเหลือใหวิทยานิพนธนี้สําเร็จไดดวยดี<br />
สุมิตรา เมืองขวา
สารบัญ<br />
หนา<br />
บทคัดยอภาษาไทย..................................................................................................................... ค<br />
บทคัดยอภาษาอังกฤษ................................................................................................................ ง<br />
กิตติกรรมประกาศ..................................................................................................................... ฉ<br />
สารบัญ....................................................................................................................................... ช<br />
สารบัญตาราง............................................................................................................................. ญ<br />
สารบัญภาพ................................................................................................................................ ฎ<br />
บทที่<br />
1 บทนํา<br />
ความเปนมาและความสําคัญของปญหา...................................................................... 1<br />
วัตถุประสงคของการวิจัย............................................................................................ 3<br />
ประโยชนของการวิจัย................................................................................................. 3<br />
ขอบเขตของการวิจัย.................................................................................................... 4<br />
นิยามศัพทเฉพาะ.......................................................................................................... 4<br />
2 เอกสารและงานวิจัยที่เกี่ยวของ<br />
แนวคิด ทฤษฎี และงานวิจัยที่เกี่ยวของ....................................................................... 6<br />
โรคเบาหวาน.............................................................................................................. 6<br />
การเหนี่ยวนําโรคเบาหวานในสัตวทดลอง................................................................. 14<br />
สเตรปโตโซโตซิน...................................................................................................... 15<br />
Glibenclamide............................................................................................................ 17<br />
ลักษณะทางพฤกษศาสตรของทับทิม......................................................................... 19<br />
งานวิจัยที่เกี่ยวของ..................................................................................................... 23<br />
กรอบแนวคิดที่ใชในการวิจัย..................................................................................... 26<br />
สมมติฐานการวิจัย.................................................................................................... 26<br />
3 วิธีดําเนินการวิจัย<br />
แบบของการวิจัย........................................................................................................ 27<br />
ประชากรและกลุมตัวอยางที่ใชในการวิจัย................................................................ 27
ญ<br />
บทที่ หนา<br />
เครื่องมือที่ใชในการวิจัย............................................................................................ 27<br />
วิธีดําเนินการเก็บรวบรวมขอมูล............................................................................... 28<br />
การวิเคราะหขอมูลทางสถิติ .................................................................................... 31<br />
สถิติที่ใชในการวิเคราะหขอมูล................................................................................. 31<br />
4 ผลการวิเคราะหขอมูล<br />
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลลดระดับน้ําตาล<br />
ในเลือด (FBS) ของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน............. 32<br />
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับเอนไซม<br />
Asparate aminotransferase (AST) ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนํา<br />
โดยสเตรปโตโซโตซิน............................................................................................. 36<br />
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับเอนไซม<br />
Alanine aminotransferase (ALT) ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนํา<br />
โดยสเตรปโตโซโตซิน............................................................................................. 39<br />
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับ<br />
Blood urea nitrogen (BUN) ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดย<br />
สเตรปโตโซโตซิน.................................................................................................. 42<br />
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับ<br />
Creatinine (Cr) ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดย<br />
สเตรปโตโซโตซิน................................................................................................... 45<br />
5 สรุปผลการวิจัย อภิปรายผล และขอเสนอแนะ<br />
สรุปผลการทดลอง.................................................................................................. 48<br />
อภิปรายผลการทดลอง........................................................................................... 48<br />
ขอเสนอแนะ........................................................................................................... 52<br />
บรรณานุกรม................................................................................................................ 53<br />
ภาคผนวก<br />
ภาคผนวก ก การเตรียมสารทดลอง........................................................................ 58<br />
ภาคผนวก ข Clinical Chemistry Reference Range for Adult Rats….............. 60<br />
ภาคผนวก ค ทับทิมที่ใชในการศึกษา..................................................................... 62
ฎ<br />
หนา<br />
ภาคผนวก ค หนูขาว Spraque-Dawley ที่ใชในการศึกษา.................................... 63<br />
ภาคผนวก ง แบบยื่นจริยธรรมในสัตวทดลอง...................................................... 65<br />
ประวัติผูวิจัย................................................................................................................. 66
สารบัญตาราง<br />
ตารางที่ หนา<br />
4.1 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับน้ําตาลในเลือด (FBS) หลังไดรับ<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาวเบาหวานทั้ง<br />
5 กลุม..................................................................................................................... 34<br />
4.2 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม Asparate aminotransferase<br />
(AST) ในเลือดหลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide<br />
ของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม............................................................................ 37<br />
4.3 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม Alanine aminotransferase<br />
(ALT) ในเลือดหลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide<br />
ของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม.......................................................................... 40<br />
4.4 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ Blood urea nitrogen (BUN) ใน<br />
เลือดหลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาว<br />
เบาหวานทั้ง 5 กลุม............................................................................................... 43<br />
4.5 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ Creatinine (Cr) ในเลือดหลังได<br />
รับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาวเบาหวานทั้ง<br />
5 กลุม................................................................................................................... 46
สารบัญภาพ<br />
ภาพที่ หนา<br />
3.1 การขลิบหางหนูขาวเพื่อวัดระดับน้ําตาลในเลือด......................................................... 29<br />
3.2 การวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยใช Glucose meter (Advantage ® )............................. 30<br />
4.1 ผลของระดับน้ําตาลในเลือด (FBS) ของหนูขาวเบาหวานภายหลังไดรับ<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปนเวลา 7 วันและ<br />
หยุดไดรับสารดังกลาวเปนเวลา 7 วัน ................................................................ 35<br />
4.2 ผลของระดับเอนไซม Asparate aminotransferase (AST) ในเลือดของหนู<br />
ขาวเบาหวานภายหลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide<br />
วันละครั้งเปนเวลา 7 วันและหยุดไดรับสารดังกลาวเปนเวลา 7 วัน.................. 38<br />
4.3 ผลของระดับเอนไซม Alanine aminotransferase (ALT) ในเลือดของหนู<br />
ขาวเบาหวานภายหลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide<br />
วันละครั้งเปนเวลา 7 วันและหยุดไดรับสารดังกลาวเปนเวลา 7 วัน................. 41<br />
4.4 ผลของระดับ Blood urea nitrogen (BUN) ในเลือดของหนูขาวเบาหวาน<br />
หลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปนเวลา<br />
7 วันและหยุดไดรับสารดังกลาวเปนเวลา 7 วัน ................................................ 44<br />
4.5 ผลของระดับ Creatinine (Cr) ในเลือดของหนูขาวเบาหวานหลังไดรับสารสกัดจาก<br />
เปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปนเวลา 7 วันและหยุดไดรับ<br />
สารดังกลาวเปนเวลา 7 วัน ..….…...................................................................... 47
บทที่ 1<br />
บทนํา<br />
ความเปนมาและความสําคัญของปญหา<br />
โรคเบาหวาน (Diabetes mellitus, DM) เกิดจากความผิดปกติของเมตาบอลิซึมของ<br />
กลูโคสหรือเกิดจากความผิดปกติของการหลั่งอินสุลินจากตอมไรทอของตับออน ทําใหเกิดภาวะ<br />
สําคัญคือ น้ําตาลในเลือดสูง (Hyperglycemia) ดื่มน้ํามาก (Polydipsia) กินอาหารจุ (Polyphagia)<br />
แตน้ําหนักลดและพบน้ําตาลในปสสาวะ (Glycosuria) (วิทยา ศรีมาดา. 2540 : 360) ซึ่งเปนโรค<br />
ทางระบบตอมไรทอที่เรื้อรังและเปนปญหาทางสุขภาพที่สําคัญของประชากรไทยและประชากรทั่ว<br />
โลก เพราะเปนโรคที่รักษาไมหายขาดและกอใหเกิดภาวะแทรกซอนมากมายเนื่องจากการปลี่ยน<br />
แปลงพยาธิสภาพของหลอดเลือดเล็ก (Microvascular) และหลอดเลือดใหญ (Macrovascular) เชน<br />
โรคหัวใจและหลอดเลือด (Atherosclerosis) โรคของตา (Retinopathy) โรคไต (Nephropathy)<br />
และอาการชาตามปลายมือปลายเทา (Neuropathy) (Reginald, et al. 1979 : 131-151) เปนตน จาก<br />
การรายงานของกระทรวงสาธารณสุขเมื่อป พ.ศ 2531 ถึงสถิติการเกิดโรคเบาหวานในประเทศ<br />
ไทย พบวามีอุบัติการณการเกิดในทุกกลุมอายุโดยในกลุมอายุนอยกวา 15 ป มีอุบัติการณเกิดต่ํา<br />
เพียง 0.5 คนตอป ตอประชากรหนึ่งแสนคน กลุมอายุ 15-25 ป มีอัตราความชุกรอยละ 2.5-3<br />
ในวัยผูใหญรอยละ 2.5-6.0 และจะพบมากที่สุดในกลุมผูสูงอายุที่เพิ่มขึ้น ในกลุมประเทศยุโรปจะ<br />
พบวามีอัตราการเกิดสูงกวาในประเทศไทย โดยพบอุบัติการณถึง 13.7-28.6 คนตอป ตอ<br />
ประชากรหนึ่งแสนคน ในป พ.ศ 2538 พบอัตราความชุกของโรคเบาหวานเทากับรอยละ 4 ของ<br />
ประชากรโลก ดังนั้นประมาณไดวามีผูปวยเบาหวานทั่วโลกอยูประมาณ 135 ลานคน แบง<br />
โรคเบาหวานชนิดที่ 1 ประมาณ 4 ลานคน และชนิดที่ 2 ประมาณ 129 ลานคน ในจํานวนนี้อยู<br />
ในทวีปเอเชียมากที่สุดคือ 66 ลานคน และคาดวาจํานวนผูปวยจะมีแนวโนมเพิ่มมากขึ้นทั่วโลก<br />
โดยในป พ.ศ 2568 จะมีผูปวยโรคเบาหวานในโลกถึงประมาณ 300 ลานคน ซึ่งอัตราความชุกที่<br />
เพิ่มขึ้นเปน 5.4% ของประชากรโลก โดยเฉพาะอยางยิ่งภูมิภาคเอเชียและอัฟริกา ซึ่งอาจเพิ่มขึ้น<br />
2-3 เทา สําหรับในประเทศไทย เมื่อป พ.ศ 2538 อัตราความชุกของโรคเบาหวานเพิ่มขึ้นเปน<br />
รอยละ 3.7 หรือพบผูปวยประมาณ 2 ลานคน และพบผูปวยโรคเบาหวานชนิดที่ 2 รอยละ 95<br />
ของผูปวยทั้งหมดในประเทศไทย (วิทยา ศรีมาดา. 2541 : 1) จะเห็นไดวาโรคเบาหวานมีแนวโนม
เพิ่มมากขึ้นทุกป ดังนั้นเปาหมายของการรักษาคือ การควบคุมระดับน้ําตาลในเลือดใหอยูในเกณฑ<br />
ปกติเพื่อชะลอการเกิดภาวะแทรกซอนตางๆ โดยใชยาเม็ดลดระดับน้ําตาลในเลือดและอินสุลินซึ่งมี<br />
ราคาคอนขางสูง มีผลขางเคียง และขอจํากัดของการใชยาอยูมาก จึงทําใหสมุนไพรเปนอีก<br />
ทางเลือกหนึ่งที่ถูกนํามาใชในการวิจัยเพื่อศึกษาฤทธิ์ในการลดระดับน้ําตาลในเลือด และหาก<br />
ประเทศไทยสามารถพัฒนายารักษาโรคเบาหวานจากสมุนไพรภายในประเทศไดก็จะชวยสงเสริม<br />
เศรษฐกิจของชาติ ลดการนําเขายาจากตางประเทศ และสามารถทําใหพึ่งตนเองดานสาธารณสุขได<br />
ทางหนึ่ง ซึ่งจะนําไปสูการทดลองทางคลินิกและพัฒนาตอไปจนถึงการผลิตเชิงพาณิชย<br />
จากการรวบรวมงานวิจัยสรรพคุณลดระดับน้ําตาลในเลือดของสมุนไพรตางๆ ที่ได<br />
เผยแพรทั้งภายในและภายนอกประเทศตั้งแตป พ.ศ 2525 ถึง พ.ศ 2541 พบรายงานการวิจัยรวม<br />
81 เรื่อง สมุนไพรที่มีการนํามาวิจัยฤทธิ์นี้มีจํานวน 61 ชนิด ใน 39 วงศ ในจํานวนนี้ 54 ชนิด<br />
ใน 36 วงศ แสดงฤทธิ์ลดน้ําตาลในเลือดในสัตวทดลองและในคน (มาลี บรรจบ, และสุธิดา ไชย<br />
ราช. 2541: 41) เชน ใบสะแกเครือ (Combretum decandrum Roxb.) หญาหนวดแมว (Orthosiphon<br />
arisatus Miq.) เปนตน แตยังไมสามารถสรุปใหชัดเจนไดวาสมุนไพรชนิดใดมีประสิทธิภาพใน<br />
การลดระดับน้ําตาลในเลือดไดดีที่สุด ดังนั้นผูวิจัยจึงสนใจที่จะศึกษาในการนําสมุนไพรมาศึกษา<br />
ฤทธิ์ลดระดับน้ําตาลในเลือด จากการตรวจสอบเอกสารรายงานการวิจัย พบวา Phenolic<br />
compounds ที่ไดจากธรรมชาติสามารถปองกันหรือรักษาโรคเรื้อรังตางๆ ได เชน โรคหัวใจ<br />
โรคมะเร็ง โรคเบาหวาน และโรคความดันโลหิตสูง เปนตน ทั้งยังมีการศึกษาพบวา Phenolic<br />
compounds เปนสารตานอนุมูลอิสระ (สุเขตร ศรีบุญเรือง. 2548 : 20) ซึ่งในโรคเบาหวานทั้งชนิด<br />
ที่ 1 และ 2 พบวามีความสัมพันธกับการเพิ่มขึ้นของอนุมูลอิสระ (อธิกา จารุโชติกมล. 2543 :15-<br />
16) ดังนั้น Phenolic compounds ที่พบในพืชตางๆ จึงอาจสามารถรักษาโรคเบาหวานได และได<br />
มีรายงานการวิจัยศึกษาถึงผลของสารสกัดจากใบหญาหนวดแมว (Orthosiphon arisatus Miq.) ตอ<br />
ฤทธิ์ลดระดับน้ําตาลในเลือดและการกระตุนการหลั่งอินสุลินโดยตรงจากตับออนโดยวิธี In-situ<br />
pancreatic perfusion พบวาสารสกัดสามารถลดระดับน้ําตาลในเลือดและสามารถกระตุนการหลั่ง<br />
อินสุลินจากตับออนไดในภาวะที่น้ําตาลสูงและมีการตรวจพบปริมาณ Total phenolic compounds<br />
ในสารสกัดจากใบหญาหนวดแมวเทากับ 13.07±7.50 มิลลิกรัม/กรัม ดังนั้นอาจเปนไปไดวา<br />
Phenolic compounds เปนสารสําคัญในการลดระดับน้ําตาลในเลือดของสารสกัดจากใบหญา<br />
หนวดแมวไดเชนกัน (กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 64-68) และจากการศึกษาฤทธิ์ของสารสกัดจาก<br />
เปลือกผลทับทิมตอการหายของแผล พบวามีการตรวจพบปริมาณ Phenolic compounds ใน<br />
เปลือกผลทับทิมถึง 44% (Murthy, et al. 2004 : 256-9) ดังนั้นผูวิจัยจึงไดคัดเลือกทับทิมในสวน<br />
ของเปลือกผลมาศึกษาเพิ่มเติมถึงฤทธิ์ลดระดับน้ําตาลในเลือด เนื่องจาก จากการศึกษาทางเคมี พบ
สารเคมีในสวนของเปลือกผลทับทิมที่สําคัญ ไดแก Hydrolyzable tannin 22-25% (คณะเภสัช<br />
ศาสตร มหาวิทยาลัยมหิดล. 2533) ซึ่งเปน Phenolic compounds ชนิดหนึ่ง (สุเขตร ศรีบุญเรือง.<br />
2548 : 28-29) และทับทิมเปนพืชสมุนไพรที่ขยายพันธุไดงาย พบไดทั่วไป มีสรรพคุณในตํารายา<br />
ไทย และตํารายากลางบานและยังไมมีรายงานการวิจัยใดที่ศึกษาถึงฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผล<br />
ทับทิมในการลดระดับน้ําตาลในเลือด<br />
ดังนั้นในการศึกษาวิจัยครั้งนี้จึงมุงเนนศึกษาฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มี<br />
ผลลดระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน และศึกษา<br />
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลตอระดับเอนไซม Asparate aminotransferase (AST)<br />
Alanine aminotransferase (ALT) และระดับ Blood urea nitrogen (BUN), Creatinine (Cr) ใน<br />
เลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
วัตถุประสงคของการวิจัย<br />
1. ศึกษาฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลลดระดับน้ําตาลในเลือดของหนู<br />
ขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
2. ศึกษาผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลตอระดับเอนไซม Asparate<br />
aminotransferase (AST) Alanine aminotransferase และระดับ Blood urea nitrogen (BUN) และ<br />
Creatinine (Cr) ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
ประโยชนของการวิจัย<br />
1. นําผลการศึกษาวิจัยมาเปนขอมูลในการทดลองทางคลินิกและพัฒนาตอไปจนถึง<br />
การผลิตเชิงพาณิชย<br />
2. ทําใหสมุนไพรเปนอีกทางเลือกหนึ่งที่สามารถนํามาใชในการควบคุมระดับน้ําตาล<br />
ในเลือดได<br />
3. เปนขอมูลเบื้องตนในการศึกษาคนควาวิจัยทับทิมและพืชสมุนไพรชนิดอื่นตอไป<br />
4. ฟนฟูการแพทยแผนโบราณใหสามารถนํามาผสมผสานกับการรักษาโรคในแผน<br />
ปจจุบันไดอยางมีประสิทธิภาพ
ขอบเขตของการวิจัย<br />
1. ทับทิมที่ใชคือพันธุพื้นบาน โดยเก็บผลแกที่มีสีเหลืองปนสมแดง จากตําบลกลาง-<br />
ดง อําเภอปากชอง จังหวัดนครราชสีมา<br />
2. กลุมตัวอยางที่ใชในการวิจัยครั้งนี้คือ หนูขาวเพศผูสายพันธุ Spraque Dawley<br />
น้ําหนัก 160-210 กรัม อายุ 7 -8 สัปดาห จํานวน 35 ตัว จากสํานักสัตวทดลองแหงชาติ<br />
มหาวิทยาลัยมหิดล ตําบลศาลายา อําเภอนครชัยศรี จังหวัดนครปฐม<br />
3. ตัวแปรที่ใชในการวิจัย<br />
3.1 ตัวแปรอิสระ<br />
3.1.1 ปริมาณของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600<br />
มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
3.2 ตัวแปรตาม ไดแก<br />
3.2.1 ระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโต-<br />
โซโตซิน<br />
3.2.2 ระดับเอนไซม Asparate aminotransferase (AST) Alanine<br />
aminotransferase (ALT) และระดับ Blood urea nitrogen (BUN) Creatinine (Cr) ในเลือดของ<br />
หนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
3.3 ตัวแปรควบคุม ไดแก<br />
3.3.1 ตัวทําละลาย 95% เอธิลแอลกอฮอล<br />
3.3.2 หนูขาวเพศผูสายพันธุ Spraque Dawley น้ําหนัก 160-210 กรัม อายุ 7-<br />
8 สัปดาห<br />
นิยามศัพทเฉพาะ<br />
1. เปลือกผลทับทิม หมายถึง สวนของผลที่หอหุมเมล็ดทั้งหมด และมีสีเหลืองปนสม<br />
แดง<br />
2. สเตรปโตโซโตซิน (Streptozotocin, STZ) หมายถึง สารเคมีที่สามารถทําใหระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดสูงไดในสัตวทดลอง โดยมีผลทําลาย β-cell ของตับออน
3. หนูขาวเบาหวาน หมายถึง หนูขาวเพศผูสายพันธุ Spraque Dawley น้ําหนัก 160-<br />
210 กรัม ที่ฉีดสเตรปโตโซโตซินขนาด 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และตรวจเลือดหนูขาว พบวามี<br />
ระดับน้ําตาลในเลือดมากกวา 132 มิลลิกรัม/เดซิลิตร (James, et al. 2002 : 121-160)
แนวคิด ทฤษฎีและงานวิจัยที่เกี่ยวของ<br />
บทที่ 2<br />
เอกสารและงานวิจัยที่เกี่ยวของ<br />
การวิจัยเรื่อง ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมตอการลดระดับน้ําตาลในเลือดของ<br />
หนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน ผูวิจัยไดศึกษาถึงทฤษฎีเอกสารและ<br />
งานวิจัยที่เกี่ยวของเพื่อเปนแนวทางในการทําวิจัยตามหัวขอตอไปนี้<br />
1.โรคเบาหวาน<br />
2. การเหนี่ยวนําโรคเบาหวานในสัตวทดลอง<br />
3. Streptozotocin<br />
4. Glibenclamide<br />
5. ลักษณะทางพฤกษศาสตรของทับทิม<br />
6.งานวิจัยที่เกี่ยวของ<br />
โรคเบาหวาน<br />
1. ประวัติของโรคเบาหวาน<br />
โรคเบาหวาน เปนโรคที่รูจักกันทั่วไปในวงการแพทยมาตั้งแตสมัยโบราณ Aretaeus<br />
นายแพทยชาวเยอรมัน ไดตั้งชื่อโรคนี้วา ไดอะบีตีส (Diabetes) หมายถึง การที่รางกายขับน้ําหรือ<br />
ปสสาวะออกมามากกวาปรกติ ตอมา Avicenna นายแพทยชาวอาหรับ ไดใหคําจํากัดความของ<br />
โรคนี้วาเปนโรคที่มีปสสาวะหวานเหมือนน้ําผึ้ง และมักมีอาการแทรกซอนรวมดวยอยูเสมอ ในป<br />
ค.ศ. 1650 Thomas willis นายแพทยชาวอังกฤษ ไดตรวจพบน้ําตาลในปสสาวะผูปวยที่เปน<br />
โรคเบาหวาน และไดบันทึกไววา ถาปสสาวะของผูปวยมีรสหวานเหมือนน้ําผึ้งผูปวยจะผอมลง<br />
ออนเพลีย และตายในที่สุด ในป ค.ศ. 1777 Kullen ไดเติมคําวา เมลลิตัส (Mellitus) ตอทาย<br />
ไดอะบีตีสเปน ไดอะบีตีส แมลลิตัส (Diabetes Mellitus) ซึ่งหมายความวาโรคปสสาวะมีรสหวาน<br />
เหมือนน้ําผึ้งนั่นเอง ตอมาในป ค.ศ. 1815 Chevreul นักเคมีชาวฝรั่งเศส สามารถพิสูจนไดวา<br />
น้ําตาลในปสสาวะในผูปวยเบาหวาน เปนน้ําตาลกลูโคส ป ค.ศ. 1869 Paul landerhans นักศึกษา
แพทยชาวเยอรมัน ไดพบกลุมเซลลเล็กๆ ซึ่งมีลักษณะแตกตางจากเซลลที่ผลิตน้ํายอยทั่วไปในตับ<br />
ออน เขาเรียกกลุมเซลลนี้วา Islet ป ค.ศ. 1889 Von mering & Minkowski นักวิทยาศาสตรชาว<br />
เยอรมันสามารถพิสูจนไดวา โรคเบาหวานเกิดจากการผิดปรกติของตับออนโดยการทดลองตัดตับ<br />
ออนของสุนัขออก ปรากฏวา สุนัขเปนโรคเบาหวาน ป ค.ศ. 1901 Opie นายแพทยชาวอเมริกัน<br />
พบวา โรคเบาหวานมีสาเหตุมาจากกลุมเซลลเล็กๆ ที่มีอยูทั่วไปในตับออนเสื่อมประสิทธิภาพจึงมี<br />
ผูขนานนามเซลลเหลานี้วา Islet of langerhans เพื่อเปนเกียรติแก Paul langerhans ผูคนพบเซลล<br />
เหลานี้ ป ค.ศ. 1921 Banting & Best นายแพทยชาวแคนนาดา 2 ทาน สามารถสกัดฮอรโมน<br />
จากกลุมเซลลเล็กๆ ของ Langerhans ได โดยสารที่สกัดไดนี้สามารถทําใหระดับน้ําตาลในเลือด<br />
ของผูปวยลดลงได เขาจึงใหชื่อสารนี้วา Insulin<br />
ปจจุบันความรูเกี่ยวกับสาเหตุและพยาธิสรีรวิทยาของโรคเบาหวานมีความกาวหนาไป<br />
มาก ดังนั้นทางสมาคมโรคเบาหวานแหงสหรัฐอเมริกา (American Diabetes Association หรือ<br />
ADA) รวมกับผูเชี่ยวชาญโรคเบาหวานทั่วโลก ไดมีการประชุมกันเพื่อทําการแกไขและปรับปรุง<br />
การวินิจฉัยและการจําแนกประเภทโรคเบาหวานขึ้นใหมตั้งแตกลางป พ.ศ. 2538 จนไดขอสรุป<br />
และประกาศใชเมื่อเดือนกรกฎาคม พ.ศ. 2540 American Diabetes Association (1997 : 1187-<br />
1197, อางถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 3) ประมาณหนึ่งปตอมา ผูเชี่ยวชาญขององคการ<br />
อนามัยโลกไดตีพิมพคําแนะนําเบื้องตนในเรื่องดังกลาวออกมา ซึ่งมีความคลายคลึงกันแตมีความ<br />
แตกตางในบางประเด็นสําคัญ<br />
2. ความหมายของโรคเบาหวาน<br />
โรคเบาหวานเปนกลุมโรคทางเมตะบอลิสม ซึ่งกอใหเกิดระดับน้ําตาลกลูโคสในเลือด<br />
สูงเปนเวลานานอันเปนผลมาจากความผิดปกติในการหลั่งอินสุลินหรือความผิดปกติในการออก<br />
ฤทธิ์ของอินสุลินหรือทั้งสองประการ<br />
3. เกณฑในการวินิจฉัยโรคเบาหวาน<br />
เกณฑในการวินิจฉัยโรคเบาหวานในปจจุบันไดดัดแปลงมาจากเกณฑของ National<br />
Diabetes Data Group (NDDG) ของสหรัฐอเมริกา National Diabetes Data Group (1979: 1039-<br />
1057, อางถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 3) และ WHO World Health Organization (1985:<br />
727, อางถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 3) ที่เคยใชอยูเดิม การจะวินิจฉัยโรคเบาหวานตาม<br />
เกณฑใหมนี้ทําได 3 วิธี ซึ่งทั้งสามวิธีนี้จําเปนตองไดรับการตรวจซ้ําอีกครั้งหนึ่งเพื่อยืนยันเสมอ<br />
ไมวาจะใชวิธีใดก็ตาม American Diabetes Association (1997: 1187-1197, อางถึงใน อภิชาติ วิช
ญาณรัตน. 2546 : 4) แตทางผูเชี่ยวชาญขององคการอนามัยโลกแนะนําใหตรวจซ้ําอีกครั้งสําหรับผู<br />
ที่ไมมีอาการของโรคเบาหวานชัดเจนเทานั้น<br />
เกณฑในการวินิจฉัยโรคเบาหวานมี 3 ประเภทดังนี้<br />
1. มีอาการของโรคเบาหวานรวมกับระดับน้ําตาลกลูโคสในพลาสมาจากหลอดเลือดดํา<br />
เวลาใดก็ตามมีคาเทากับหรือมากกวา 200 มิลลิกรัม/เดซิลิตร (อาการของโรคเบาหวานไดแก ดื่ม<br />
น้ํามาก ปสสาวะมาก และน้ําหนักตัวลดโดยไมทราบสาเหตุ)<br />
2. ระดับน้ําตาลกลูโคสในพลาสมาจากหลอดเลือดดําในขณะอดอาหาร (Fasting<br />
Plasma Glucose หรือ FPG) เทากับหรือมากกวา 126 มิลลิกรัม/เดซิลิตร (การอดอาหาร<br />
หมายถึง การงดรับประทานอาหาร หรือเครื่องดื่มที่ใหพลังงานเปนเวลาอยางนอย 8 ชั่วโมง)<br />
3. ระดับน้ําตาลกลูโคสในพลาสมาจากหลอดเลือดดําที่เวลา 2 ชั่วโมง ในการตรวจ<br />
75 gram Oral Glucose Tolerance Test (75 g OGTT) เทากับหรือมากกวา 200 มิลลิกรัม/<br />
เดซิลิตร<br />
4. การจําแนกประเภทของโรคเบาหวาน<br />
การจําแนกประเภทของโรคเบาหวานเดิมใชตาม WHO Study Group ซึ่งแบง<br />
ประเภทของโรคเบาหวานตามลักษณะทางคลินิก ไดแก โรคเบาหวานชนิดพึ่งอินสุลิน (Insulin<br />
Dependent Diabetes Mellitus, IDDM) โรคเบาหวานชนิดไมพึ่งอินสุลิน (Non-insulin Dependent<br />
Diabetes Mellitus, NIDDM ) โรคเบาหวานที่เกี่ยวของกับภาวะทุพโภชนาการ (MRDM) และ<br />
โรคเบาหวานที่มีสาเหตุจากอื่นๆ ซึ่งการจําแนกประเภทของโรคเบาหวานดังกลาวพบวาไมมี<br />
ความสัมพันธหรือไมสามารถแยกกันไดชัดเจนในแงของพยาธิสรีรีวิทยาในการเกิดโรค การดําเนิน<br />
โรค การตอบสนองตอการรักษา และการปองกันโรค เชน โรคเบาหวานชนิดพึ่งอินสุลิน (IDDM)<br />
ในระยะแรกๆ ของโรค ผูปวยบางรายสามารถควบคุมโรคไดดวยการใชยาเม็ดลดระดับน้ําตาล<br />
โรคเบาหวานชนิดไมพึ่งอินสุลิน (NIDDM) ในระยะหลังมักจําเปนตองใชอินสุลินในการรักษาเพื่อ<br />
ควบคุมระดับน้ําตาลกลูโคสในเลือด โรคเบาหวานที่เกี่ยวของกับภาวะทุพโภชนาการ (MRDM)<br />
จริงๆ แลวไมมีหลักฐานชัดเจนที่บงวาภาวะทุพโภชนาการเปนสาเหตุของโรคแตพบวาภาวะทุพ<br />
โภชนาการเปนสิ่งที่พบรวมดวยทําใหลักษณะอาการทางคลินิกของโรคเบาหวานซึ่งสวนใหญเปน<br />
ชนิด NIDDM มีลักษณะตางออกไป ดังนั้นการจําแนกประเภทของโรคเบาหวานใหมของสมาคม<br />
โรคเบาหวานแหงสหรัฐอเมริกา และองคการอนามัยโลกจึงไดมีการเปลี่ยนแปลงดังนี้คือ ยกเลิก<br />
การใชคําวา IDDM และ NIDDM เนื่องจากการแบงโรคเบาหวานเปน IDDM และ NIDDM<br />
เปนการแบงตามการรักษาแตไมไดบงถึงสาเหตุ หรือพยาธิสรีรวิทยาของโรค และใหใชคําวา<br />
โรคเบาหวานชนิดที่ 1 (Type 1 DM) และชนิดที่ 2 (Type 2 DM) ซึ่งเปนการแบงตามสาเหตุ
และพยาธิสรีรวิทยาในการเกิดโรคแทน โรคเบาหวานชนิดที่ 1 หมายถึง โรคเบาหวานที่เกิดจาก<br />
การทําลายของเซลลเบตาในตับออน ซึ่งสวนใหญจะเกิดจากกระบวนการ Autoimmune สวนนอย<br />
จะไมรูสาเหตุ โรคเบาหวานชนิดนี้จะมีแนวโนมการเกิด Ketoacidosis ไดงาย โรคเบาหวานชนิดที่<br />
2 หมายถึง โรคเบาหวานที่เกิดจากภาวะดื้ออินสุลินรวมกับความผิดปกติในการหลั่งอินสุลินของตับ<br />
ออน ซึ่งเปนโรคเบาหวานที่พบบอยที่สุดทั่วโลก การจําแนกประเภทโรคเบาหวานใหมนี้ยังตัดคํา<br />
วา MRDM ออกไป โดยเฉพาะ MRDM ชนิดที่เกิดจากภาวการณขาดโปรตีน (Protein deficiency)<br />
สวน MRDM ชนิดที่มีหินปูนจับในตับออนหรือ Fibrocalculous pancreatic diabetes (วิทยา ศรี<br />
มาดา. 2540 : 364) ปจจุบันจะจัดอยูในโรคเบาหวานชนิดอื่นๆ (other specific types of diabetes) ที่<br />
มีสาเหตุจากโรคของตับออน การที่จะบงชี้วาผูปวยเบาหวานเปนชนิดใดนั้นมักจะขึ้นอยูกับสภาวะ<br />
ขณะไดรับการวินิจฉัยซึ่งอาจจะเปนการยากที่จะบอกไดอยางแนชัดในผูปวยบางราย<br />
5. พยาธิกําเนิดของโรคเบาหวาน<br />
5.1 โรคเบาหวานชนิดที่ 1 ผูปวยจะมีอาการระดับน้ําตาลในเลือดสูง กระหายน้ํา<br />
ปสสาวะมากผิดปกติ เหนื่อยงาย ทองผูก ติดเชื้อที่ผิวหนัง และน้ําหนักลด มักเกิดภาวะ<br />
Ketoacidosis สวนใหญพบในผูปวยที่มีอายุนอย และพบประมาณรอยละ 10 ของผูปวยทั้งหมด<br />
American Diabetes Association ( 1995 : 5-7, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 4) โดยเกิดจาก<br />
β-cell ถูกทําลาย ทําใหขาดอินสุลิน ซึ่งสามารถแบงเปนกลุมยอยตามสาเหตุ คือ<br />
5.1.1 โรคเบาหวานที่เกิดจากระบบภูมิคุมกันของรางกาย (Immune-mediated<br />
diabetes) เกิดจากการทําลาย β-cell จากระบบ Autoimmune ของรางกาย Zimmet (1995 : 1050-<br />
1064, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 4) พบวา 85-90% ของผูปวยเบาหวานชนิดนี้ตรวจพบ<br />
Autoantibodies ตางๆ ภายในกระแสเลือด ซึ่ง Autoantibodies คือ แอนติบอดี้ตอ β-cell แอนติเจน<br />
ไดแก Islet cell antibody , Insulin autoantibodeis , Glutamic acid decarboxylase antibody และ<br />
Tyrosine phosphatase-like protein antibody สวนปจจัยทางสิ่งแวดลอมจะมีสวนสําคัญในการ<br />
แสดงออกของโรคในผูที่มีความเสี่ยงทางพันธุกรรมที่สําคัญไดแก การติดเชื้อไวรัส อาหาร<br />
สภาพแวดลอมในครรภมารดา (Richard. 1995 : 43-48) ทั้งสองปจจัยจะสงเสริมกันทําใหเกิดการ<br />
ตอบสนองของระบบภูมิคุมกัน (Cell-mediated immune response) มาทําลาย β-cell กลไกการ<br />
ทําลายเบตาเซลลนั้นเกิดจากความผิดปกติของ T-cell โดยเริ่มจาก Macrophage จับกับ β-cell<br />
แอนติเจน และไปจับกับ T-cell ที่มีรีเซพเตอรจําเพาะกับ β-cell แอนติเจน ไปกระตุน Cytotoxic<br />
T-cell ใหหลั่ง Cytokine เชน Interferon gamma และสามารถกระตุน Cytotoxic T-cell ใหหลั่ง<br />
สารจําพวก Free radical เชน Superoxide, Hydrogen peroxide, Nitric oxide และ Cytokinine เชน
Interleukin-1(IL-1) , Tumor necrosis factoralpha (TNF-α) ซึ่งมีฤทธิ์ทําลาย β-cell เมื่อ β-cell<br />
ถูกทําลายไปมากกวา 80% จะเกิดภาวะน้ําตาลในเลือดสูง และการทําลายก็ยังคงดําเนินการตอไป<br />
5.1.2 โรคเบาหวานที่ไมทราบสาเหตุ (Idiopathic diabetes mellitus)<br />
เปนผูปวยที่มีการขาดอินสุลินโดยที่ไมมีหลักฐานของการเกิด Autoimmune ซึ่งเปนสวนนอยที่พบ<br />
และมักพบในประชากรแถบเอเชียและอัฟริกาผูปวยจะเกิดภาวะ Ketoacidosis จะมีภาวะขาดอินสุ<br />
ลินในระดับแตกตางกันไดหลากหลาย โรคเบาหวานชนิดนี้จะถายทอดทางพันธุกรรมแตไมมี<br />
ความสัมพันธกับ HLA Banerji,& Lebovitz (1989 : 784-792, อางถึงใน กมลวรรณ ศรี-ปลั่ง. 2546<br />
: 5)<br />
5.2 โรคเบาหวานชนิดที่ 2 เกิดจากการหลั่งอินสุลินที่ผิดปกติ คือ ตับออนสามารถหลั่ง<br />
อินสุลินไดแตไมเพียงพอที่จะควบคุมระดับน้ําตาลในเลือดใหอยูในเกณฑปกติ และรางกายเกิด<br />
ภาวะดื้อตออินสุลิน โรคเบาหวานชนิดนี้มักจะไมเกิดภาวะ Ketoacidosis ขึ้นเอง จะเกิดเมื่อมีภาวะ<br />
เครียดอยางชัดเจน Umpierrrez, et al (1995 : 790-795, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง.2546 : 5) ภาวะ<br />
น้ําตาลในเลือดสูงจะเกิดอยางชาๆ ปจจัยในการเกิดโรค ไดแก อายุ ความอวน และการไมออกกําลัง<br />
กาย (Hertzel, 2001 : 153-160) ผูปวยโรคเบาหวานชนิดที่ 2 สวนใหญอายุมากกวา 30 ป และพบ<br />
90% ของผูปวยทั้งหมด American Diabetes Association (1995 : 5-7, อางถึงใน กมลวรรณ ศรี<br />
ปลั่ง. 2546 : 5) ปจจุบันยังไมทราบสาเหตุที่ชัดเจนของโรค ความผิดปกติที่สําคัญของผูปวย<br />
เบาหวานชนิดนี้คือ ภาวะดื้อตออินสุลิน และการหลั่งอินสุลินที่ผิดปกติ โดยที่ผูปวยโดยสวน<br />
ใหญจะมีความผิดปกติทั้งสองอยางรวมกัน อยางไรก็ตามจะมีผูปวยจํานวนหนึ่งที่มีความผิดปกติ<br />
ในการหลั่งอินสุลินเปนหลัก<br />
5.2.1 ภาวะดื้อตออินสุลิน คือภาวะที่ความสามารถของอินสุลินในการทําให<br />
กลูโคสเขาเซลลลดลงโดยนื้อเยื่อที่เกิดภาวะดื้อตออินสุลิน ไดแก เนื้อเยื่อที่เกี่ยวของกับ<br />
กระบวนการ Glucose homeostasis ประกอบดวย กลามเนื้อลาย ไขมัน (Adipose tissue) และตับ<br />
แตที่สําคัญที่สุดที่พบวาเกี่ยวของกับพยาธิกําเนิดของโรคเบาหวาน ไดแก กลามเนื้อลาย ในคนปกติ<br />
กลามเนื้อลายจะมีรีเซพเตอรของอินสุลิน เมื่ออินสุลินจับกับรีเซพเตอรจะกระตุนใหเกิด<br />
Autophosphorylation ของ Tyrosine kinase หลังจากนั้นจะไปกระตุน Phosphor-inositide-3 kinase<br />
และ Kinase อื่นๆ ทําใหมีการเคลื่อนยายของ Glucose transporter-4 (GLUT4) ไปที่ Cell<br />
membrane เพื่อทําใหกลูโคสเขาเซลลได แตในผูปวยโรคเบาหวานชนิดนี้ที่มีอาการดื้อตออินสุลิน<br />
อาจเกิดจากความผิดปกติของโปรตีนที่เกี่ยวของกับ Insulin signaling pathway ในปจจุบันพบวา<br />
ความผิดปกติหลัก คือ กระบวนการเคลื่อนยาย GLUT4 ไปยัง Cell membrane ลดลง ทําให<br />
กลูโคสเขาเซลลลดลง Shepherd,& Kahn (1999 : 248-257, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 6)
โดยความผิดปกติภายในเซลล (Post-receptor defect) เปนสาเหตุสําคัญ ในขณะที่ความผิดปกติของ<br />
รีเซพเตอรของอินสุลินมีบทบาทนอยมาก ซึ่งปจจัยที่เกี่ยวของกับการเกิดภาวะดื้อตออินสุลินใน<br />
ผูปวยโรคเบาหวานชนิดที่ 2 ไดแก พันธุกรรม ปริมาณและตําแหนงของไขมันในรางกาย อายุ<br />
การขาดการออกกําลังกาย และสภาพแวดลอมในครรภมารดา Phillips, et al (1998 : 150-155, อาง<br />
ถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 6)<br />
5.2.2 ความผิดปกติในการหลั่งอินสุลิน เชื่อวาพันธุกรรมมีสวนกําหนดปริมาณ<br />
และการทํางานของ β-cell เปนตัวกําหนดใหเกิด Apoptosis มากขึ้น (Federic. 2001 : 1290-301)<br />
ซึ่งความผิดปกติของยีนสที่เกี่ยวของกับการหลั่งอินสุลิน เชน Glucokinase หรืออาจเกิดจากการ<br />
หลั่งอินสุลินที่ลดลงในภาวะดื้อตออินสุลินทําใหระดับน้ําตาลในเลือดสูง การตอบสนองของ β-<br />
cell ตอกลูโคสจะลดลง คือ มีผลตอการหลั่งอินสุลินและการทํางานของอินสุลิน โดยพบวาการ<br />
นํากลูโคสเขาเซลลลดลงในภาวะดังกลาว เรียกภาวะนี้วา Glucotoxicity ความอวนอาจเปนอีก<br />
สาเหตุหนึ่ง ซึ่งรางกายมีการสลาย Triglyceride ที่สะสมไวใน Adipocyte เปน Fatty acid ใน<br />
กระแสเลือดสูงขึ้น โดยสามารถถูกเปลี่ยนเปน Triglyceride ภายใน β-cell ได สงผลใหการ<br />
ทํางานของ β-cell ลดลง เกิดภาวะ Lipotoxicity Kahn,& Flier (2000 : 1303-1306, อางถึงใน<br />
กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 6)<br />
6. การติดตามผลการควบคุมระดับน้ําตาล<br />
การติดตามผลการควบคุมระดับน้ําตาลหลังการรักษา ทําใหสามารถประเมินได<br />
ชัดเจนวาการรักษามีประสิทธิภาพและประสบผลสําเร็จมากนอยเพียงใดเนื่องจากการเปลี่ยนแปลง<br />
ระดับน้ําตาลในเลือดในแตละวัน เวลา ขึ้นกับอาหาร และกิจกรรมออกแรง การติดตามผลเทานั้น<br />
ที่จะแสดงถึงการเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นได โดยเฉพาะอยางยิ่งในรายที่ใหการรักษาแบบเขมงวด<br />
เพื่อใหระดับน้ําตาลอยูในเกณฑที่ปกติมากที่สุด จําเปนตองติดตามผลการควบคุมระดับน้ําตาล<br />
อยางใกลชิด การติดตามผลการควบคุมระดับน้ําตาลทําไดหลายรูปแบบไดแก การวัดระดับน้ําตาล<br />
ในเลือดโดยตรง การวัดปริมาณน้ําตาลที่ทนออกมาในปสสาวะซึ่งแตละวิธีมีขอดีและขอจํากัด<br />
ตางกัน เปนการประเมินน้ําตาลในเลือด ณ เวลาที่ตองการ เพื่อใหทราบชัดเจนวาในขณะนั้นระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดเปนเทาใด ซึ่งจะใชเปนขอมูลกําหนดหรือตัดสินการรักษา ณ เวลานั้นๆ การวัด<br />
ระดับน้ําตาลในเลือดอาจทําโดยหองปฏิบัติการ หรือใชเครื่องวัดระดับน้ําตาลขนาดเล็กที่สามารถ<br />
พกพาไปในที่ตางๆไดงาย การวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยหองปฏิบัติการ ถือเปนวิธีมาตรฐานที่<br />
ใชในสถานพยาบาลทั่วไปโดยใชเลือดที่เจาะจากเลือดดํา Snacks, et al (2002 : 436-472, อางถึงใน<br />
อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 155) นิยมวัดในพลาสมาที่ใชโซเดียมฟลูออไรดเปนสารกันเลือด<br />
แข็งตัว ในบางครั้งอาจวัดเปนระดับน้ําตาลในเลือด (Whole blood) กรณีที่ไมไดใสสารโซเดียม
ฟลูออไรดจะตองปนแยกเม็ดเลือดแดงออกทันที มิเชนนั้นระดับน้ําตาลที่วัดไดจะต่ํากวาความเปน<br />
จริง การวัดทางหองปฏิบัติการอาศัยปฏิกิริยาของเอนไซม Glucose oxidase หรือ Hexokinase (วี<br />
กูล วีรานุวัตติ์, และกนกนาถ ชูปญญา. 2520 : 167-169) ในหองปฏิบัติการที่มีการควบคุมมาตรฐาน<br />
คาที่วัดไดจะมีความถูกตองแมนยําสูง ผูที่สงตรวจจะตองรูวาระดับน้ําตาลที่รายงานเปนระดับ<br />
น้ําตาลในพลาสมาหรือในเลือด เพราะระดับน้ําตาลในพลาสมาจะสูงกวาระดับน้ําตาลในเลือดรอย<br />
ละ 10-15 World Health Organization (1999 : 1, อางถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 155) ขอดี<br />
ของการตรวจวัดโดยหองปฏิบัติการนอกจากความแมนยําแลว คาใชจายจะนอยเนื่องจากตรวจ<br />
ตัวอยางสงตรวจ (Specimen) หลายตัวอยางพรอมกัน แตขอจํากัดคือ จะตองทําในสถานพยาบาล<br />
การเก็บตัวอยางเลือดมีความยุงยาก ตองใชตัวอยางเลือดครั้งละ 1-3 มิลลิลิตร และใชเวลานาน<br />
ดังนั้นจึงใชวิธีนี้เปนครั้งคราวในผูปวยแตละราย<br />
6.1 การวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยใชเครื่องวัดชนิดพกพา (Glucose meter)<br />
ในปจจุบันเครื่องวัดระดับน้ําตาลชนิดพกพามีการพัฒนาจนไดรับความเชื่อถือ และการยอมรับให<br />
ใชแทนการวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยหองปฏิบัติการได การวัดโดยเครื่องชนิดพกพาที่กลาวนี้<br />
เปนการวัดระดับน้ําตาลจากเลือดแดง (Capillary blood) ที่เจาะจากปลายนิ้ว (Finger prick) ความ<br />
ถูกตองของคาที่ไดขึ้นกับสมรรถภาพของเครื่อง การปฏิบัติตามขั้นตอนอยางถูกตองของผูใช และ<br />
การตั้งคาของเครื่องกับแผนทดสอบหรือน้ํายามาตรฐานกอนใช Skele, et al (2002 : 994-1003, อาง<br />
ถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 155) ผูใชตองรูวาเครื่องที่ใชวัดใหคาเปนระดับของ Capillary<br />
plasma glucose หรือ Capillary whole blood glucose เพราะคาใน Plasma จะสูงกวาใน Whole<br />
blood รอยละ 10-15 เชนกัน นอกจากนี้ถาเปนระยะหลังรับประทานอาหาร (Post-prandial) ระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดแดงจะสูงกวาระดับน้ําตาลที่เจาะจากหลอดเลือดดําประมาณรอยละ 10 การวัด<br />
ระดับน้ําตาลในเลือดโดยเครื่องวัดชนิดพกพา ใชเลือดที่เจาะจากปลายนิ้วเพียง 3-50 ไมโครลิตร<br />
และไดผลใน 10-30 วินาที แลวแตชนิดของเครื่อง สามารถทําไดทั้งที่สถานพยาบาล ที่คลินิก ที่<br />
บาน หรือที่ใดๆ ก็ได จึงมีประโยชนและเปนที่นิยมมาก แตคาใชจายสูงกวาการการตรวจโดย<br />
หองปฏิบัติการและคาที่เครื่องอานไดมีกรอบจํากัดระหวาง 20-600 มิลลิกรัม/เดซิลิตร การใช<br />
เครื่องวัดระดับน้ําตาลชนิดพกพาในสถานพยาบาลหรือคลินิก เปนการตรวจวัดแทนการสงตรวจที่<br />
หองปฏิบัติการเพื่อประเมินระดับน้ําตาลในเลือดขณะนั้น สําหรับสั่งหรือเปลี่ยนแปลงการรักษา<br />
โดยทันที Lewandrowski, et al (2001 : 175-179, อางถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 156)<br />
ทั้งนี้สามารถตรวจวัดไดบอยเทาที่จําเปนโดยไมจํากัดเวลา การใชเครื่องวัดระดับน้ําตาลชนิดพกพา<br />
ที่บานหรือสถานที่ตางๆ เปนการตรวจวัดโดยผูปวยหรือญาติเพื่อติดตามผลการรักษาของตนเอง<br />
เรียกวา Self-Monitoring of Blood Glucose (SMBG) (Gareth & John. 1999 : 10-11) ซึ่งเปน
เครื่องมือสําคัญที่ใชเพื่อใหไดขอมูลสําหรับปรับเปลี่ยนการรักษาจนควบคุมระดับน้ําตาลใหไดปกติ<br />
หรือใกลเคียงปกติ โดยผูปวยสามารถตรวจวัดระดับน้ําตาลวันละ 1-7 ครั้ง หรือมากกวาที่จําเปน<br />
สําหรับปรับเปลี่ยนการรักษารายวันเพื่อใหระดับน้ําตาลอยูในเกณฑที่กําหนดไว<br />
6.2 การวัดปริมาณน้ําตาลที่เกาะติดกับโปรตีน การคนพบปฏิกิริยาที่เรียกวา<br />
Nonenzymatic glycosylation คือน้ําตาลสามารถจับกับกลุม Amino ของอณูโปรตีน ระยะแรกเปน<br />
การจับกันหลวมๆ ตอมาเกิดการเปลี่ยนแปลงชาๆ โดยไมตองอาศัยเอนไซมใดๆ เปนตัวกระตุน<br />
หรือเรงปฏิกิริยา จนเปนการเกาะติดที่ถาวร ปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นจะเปนสัดสวนโดยตรงกับระดับ<br />
น้ําตาลที่มีอยู ไดมีการนํามาประยุกตใชทางคลินิกเพื่อบงชี้ระดับน้ําตาลในเลือดระยะยาว โดยการ<br />
วัดปริมาณน้ําตาลที่เกาะติดกับฮีโมโกลบินในเม็ดเลือดแดง (Glycated hemoglobin ,<br />
Glycohemoglobin ) และน้ําตาลที่เกาะติดโปรตีนในเลือด<br />
6.3 การวัดปริมาณน้ําตาลที่เกาะติดเม็ดเลือดแดง คือการวัดฮีโมโกลบิน (Hemoglobin)<br />
สวนที่เปน Hemoglobin A 1c ซึ่งเปนสวนที่เกิดปฏิกิริยากับน้ําตาลในเลือด แมจะเปนสวนนอยของ<br />
ฮีโมโกลบินทั้งหมดแตก็เปนสวนที่คงตัว การวัดปริมาณน้ําตาลที่เกาะติดกับฮีโมโกลบินในเม็ด<br />
เลือดแดงมีชื่อเรียกไดหลายอยางคือ Hemoglobin A 1c (HbA 1c ) , Glycosylated hemoglobin หรือ<br />
Glycohemoglobin (GHb) Nathan,& Cagliero (2001 : 827-926, อางถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน.<br />
2546 : 157) การเกิด HbA 1c เปนปฏิกิริยาระหวางกลูโคสกับกลุม Amino ของสายฮีโมโกลบิน ที่<br />
เกิดโดยไมตองอาศัยสารเรงปฏิกิริยาใดๆ เนื่องจากเม็ดเลือดแดงมีอายุในระบบหมุนเวียนโลหิต<br />
120 วัน ดังนั้นการวัด HbA 1c จึงบงชี้ถึงระดับน้ําตาลที่ผานมาในระยะถึง 2-3 เดือน (วิทยา ศรี<br />
มาดา. 2540 : 419) พบวาปริมาณน้ําตาลที่เกาะติดเม็ดเลือดแดงมีความสัมพันธกับคาเฉลี่ยของ<br />
SMBG ชวง 8-10 สัปดาห สามารถใชเปนเครื่องมือสําคัญในการติดตามผลการควบคุมระดับ<br />
น้ําตาลระยะยาวที่ดีและพบวามีความสัมพันธกับการเกิดภาวะแทรกซอนเรื้อรังที่ตาและไต<br />
ขอจํากัดของ HbA 1c คือมีคาใชจายสูง<br />
6.4 การวัดปริมาณน้ําตาลที่เกาะติดโปรตีนในเลือด เรียกวา Glycated serum protein<br />
สวนใหญวัดน้ําตาลที่เกาะติดกับแอลบูมิน วิธีที่นิยมใชวัดคือวัดระดับ Fructosamine (Chen, et al.<br />
2002: 151-155) เนื่องจากอายุครึ่งชีวิต (half life) ของแอลบูมินเทากับ 20 วัน ดังนั้น Fructosamine<br />
จะบงชี้ถึงระดับน้ําตาลในเลือดของชวงเวลาเพียง 1-2 สัปดาหที่ผานมา (วิทยา ศรีมาดา. 2540: 419)<br />
ในบางรายงานพบวามีความสัมพันธกับคาเฉลี่ยของ SMBG ควบคูกับการตรวจวัดปริมาณ<br />
Fructosamine ทุกสัปดาห เพื่อเปนเครื่องมือสําหรับการรักษาแบบเขมงวด สําหรับปรับเปลี่ยนการ<br />
รักษา รวมทั้งพฤติกรรมใหบรรลุเปาหมายการรักษาและเห็นผลในชวงสั้น อยางไรก็ดี ระดับ
Fructosamine บงชี้ผลการควบคุมระดับน้ําตาลระยะยาวไดไมชัดเทากับ HbA 1c ในคนอวนระดับ<br />
Fructosamine ที่วัดไดอาจต่ํากวาที่ควรจะเปน<br />
6.5 การวัดปริมาณน้ําตาลในปสสาวะ การวัดปริมาณน้ําตาลในปสสาวะอาศัยหลัก<br />
ของ Renal threshold ซึ่งมักอยูที่ 180 มิลลิกรัม/เดซิลิตร (อภิชาติ วิชญาณรัตน, และคนอื่นๆ. 2527<br />
: 33) กลาวคือเมื่อระดับน้ําตาลในเลือดสูงเกินพิกัด การดูดกลับน้ําตาลจะไมสมบูรณ ทําใหเหลือ<br />
และทนออกมาทางปสสาวะซึ่งมักจะเปนสัดสวนกับระดับน้ําตาลในเลือด ในผูที่มี Renal threshold<br />
ต่ําเกินไปจะทําใหตรวจพบน้ําตาลในปสสาวะได แมระดับน้ําตาลในเลือดไมสูง ในทางตรงกัน<br />
ขามหาก Renal threshold สูงเกินไปจะทําใหตรวจไมพบน้ําตาลในปสสาวะ แมระดับน้ําตาลใน<br />
เลือดจะสูงก็ตาม อีกประการหนึ่งปสสาวะที่เก็บตองใชเวลากรองจากไตมาสะสมในกระเพาะ<br />
ปสสาวะ ปริมาณน้ําตาลในปสสาวะที่เก็บมาตรวจจึงไมเปนเวลาเดียวกับระดับน้ําตาลในเลือด<br />
ดวยเหตุนี้จึงทําใหการวัดปริมาณน้ําตาลในปสสาวะมีความคลาดเคลื่อนในการสะทอนถึงระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดอยางมาก<br />
6.6 การตรวจวัดอื่นๆ ที่บงถึงการควบคุมเบาหวานการตรวจปริมาณสารคีโตนสามารถ<br />
บงชี้ถึงสภาวะการใชพลังงานของรางกายซึ่งสะทอนถึงระดับการควบคุมเบาหวานได ปริมาณ<br />
สารคีโตนตรวจไดทั้งในปสสาวะและเลือดในผูปวยเบาหวานการตรวจปริมาณคีโตนมีความจําเปน<br />
ในหลายกรณี ในผูปวยเบาหวานที่มีอาการคลื่นไส อาเจียน ออนเพลีย หอบเหนื่อย และซึมลง<br />
ตองตรวจหาปริมาณสารคีโตนในปสสาวะและเลือด ถาพบสารคีโตนปริมาณสูงในปสสาวะและ<br />
เลือด รวมกับมีภาวะกรดเกิน สามารถวินิจฉัยวาเกิด Diabetic Ketoacidosis Nathan,& Cagliero<br />
(2001 : 827-926, อางถึงใน อภิชาติ วิชญาณรัตน. 2546 : 159)<br />
การเหนี่ยวนําโรคเบาหวานในสัตวทดลอง<br />
การทดลองเพื่อหาสารตานโรคเบาหวานนั้นจะตองมีรูปแบบการทําใหสัตวทดลองเปน<br />
โรคเบาหวาน โดยที่สัตวจะมีอาการทางคลินิกที่สําคัญ คือ ระดับน้ําตาลในเลือดสูง ซึ่งการ<br />
เหนี่ยวนําสัตวทดลองใหเกิดโรคเบาหวานมีวิธีการดังนี้ ไดแก<br />
1. การผาตัด<br />
วิธีการนี้คือ การผาตัดเอาตับออนออก (Pancreatectomy) ทั้งหมดหรือบางสวนใน<br />
สัตวทดลอง Sherwin, et al (1996 : 1258-1277, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 8)<br />
2. การใชฮอรโมน
Growth hormone (สุวรรณา หังสพฤกษ. 2532 : 963) สามารถเหนี่ยวนําใหเกิด<br />
โรคเบาหวานได การให Growth hormone แกสุนัขและแมวสามารถเหนี่ยวนําใหเกิดโรคเบาหวาน<br />
ได ซึ่งสัตวจะมีอาการของโรค รวมทั้ง Ketonuria และ Ketonemia สวนภาวะน้ําตาลในเลือดสูง<br />
และ Glucosuria พบไดในหนูที่ไดรับ Cortisone Vogel,& Vogel (1997 : 535-546, อางถึงใน<br />
กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 8)<br />
3. การใชสารเคมี<br />
Alloxan สามารถทําใหเกิดโรคเบาหวานได (สุวรรณา หังสพฤกษ. 2532 : 964) แต<br />
อาจทําลายตับ ไต และ Pituitary gland โดยที่ Streptozotocin ก็สามารถทําใหเกิดโรคเบาหวาน<br />
ไดเชนกัน และเฉพาะเจาะจงตอ β-cell Rerup (1970 อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 9)<br />
Streptozotocin<br />
Streptozotocin (STZ , NSC 85998) เปนยาปฏิชีวนะที่ใชกันอยางกวางขวาง ซึ่ง<br />
สังเคราะหไดจากเชื้อ Streptomyces achromogenes ซึ่งเปนแบคทีเรียแกรมลบพบไดในดิน แต<br />
ภายหลังสามารถสังเคราะหไดในหองปฏิบัติการ Rerup (1970 : 485-518, อางถึงใน กมลวรรณ ศรี<br />
ปลั่ง. 2546 : 9) STZ ถูกคนพบวาสามารถทําใหระดับน้ําตาลในเลือดสูงไดในสัตวทดลองทั้งใน<br />
Rat, Mice, Hamster, สุนัขและลิง Lazarus,& Shapiro (1972 : 129-137, อางถึงใน กมลวรรณ ศรี<br />
ปลั่ง. 2546 : 9) สเตรปโตโซโตซิน มีผลจําเพาะเจาะจงที่ β-cell ในตับออน และเมื่อสัตวถูก<br />
เหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน แลวจะมีอาการเหมือนคนที่เปนโรคเบาหวาน คือ น้ําตาลใน<br />
เลือดสูง (Hyperglycemia) , ปสสาวะมีน้ําตาลมากผิดปกติ (Glucosuria), ปสสาวะมีอะซีโตน<br />
(Ketonuria) Junod, et al (1969 : 2122-2139, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 9)<br />
1. คุณสมบัติทางเคมี<br />
STZ (C 8 H 15 N 3 O 7 ) มีสูตรโครงสรางคือ 2-deoxy-2-(3-methyl-3-nitrosourea) –Dglucopyranose<br />
ซึ่งมี Methylnitrosourea เกาะอยูที่ตําแหนง C 2 ของ D-glucose ภาวะปกติสเตรป<br />
โตโซโตซินอยูในรูป α และ B anomer อยางละครึ่งผสมกัน มีลักษณะเปนผงสีเหลืองออน มี<br />
ความเสถียรที่อุณหภูมิต่ํา สามารถละลายน้ําได คาความเปนกรด-ดาง ของสารละลายควรมี<br />
คาประมาณ 4-4.5 (Herr, et al. 1967 : 4808-4809)<br />
2. เภสัชจลนศาสตร<br />
การเหนี่ยวนําสัตวใหเกิดโรคเบาหวานทําไดโดยฉีดสเตรปโตโซโตซินผานทางหลอด<br />
เลือดดํา (Intravenous, i.v.) หรือทางชองทอง (Intraperitoneal, i.p.) ยาจะกระจายไปยังตับออนและ
ลําไสโดยที่ตับและไตมากที่สุด แตไมเขาสูสมอง Karunanayake, et al (1974 : 673-683, อางถึงใน<br />
กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 10)<br />
3. กลไกการออกฤทธิ์ของสเตรปโตโซโตซิน<br />
กลุม Methylnitrosourea ในสเตรปโตโซโตซินนั้นเปนกลุมที่ออกฤทธิ์โดยที่จะไปจับที่<br />
Glucose transporter (GLUT2) และผานเขาไปใน β-cell เกิดการเติมหมู Alkyl ที่สาย DNA<br />
สงผลใหสาย DNA เสียหาย นอกจากนี้สเตรปโตโซโตซินยังทําใหเกิด Nitric oxide (NO) ซึ่งก็มี<br />
ผลในการทําลายที่ β-cell ได Szkudelski (2001 : 536-546, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 :<br />
10) อยางไรก็ตามมีหลายการทดลองแสดงใหเห็นวาไมเพียงแค NO เทานั้นที่ทําใหสาย DNA ถูก<br />
ทําลายยังมี Superoxide radical (O • .2) ที่เกิดจากสเตรปโตโซโตซินไปยับยั้งการเกิด Kerbs cycle<br />
ลดการใชออกซิเจนที่ไมโตคอนเดรีย สงผลกระตุนการทํางานของ Xanthine oxidase (XOD) เกิด<br />
Superoxide radical (O 2• ), Hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) และ Hydroxyl radical (OH • ) ตามมาโดย<br />
NO และ Superoxide radical (O • .2) สามารถทั้งออกฤทธิ์แยกกันและรวมกันเปน Peroxynitrite<br />
(ONOO • ) ซึ่งออกฤทธทําใหสาย DNA เสียหายไดเชนกัน เมื่อสาย DNA ไดรับความเสียหายจะ<br />
กระตุนให poly(ADP-ribose) Synthetase ทํางานโดยมี NAD เปนสารตั้งตนในการซอมแซมสาย<br />
DNA (DNA repair) จึงทําให NAD ภายใน β-cell ลดลง Uchigata, et al (1982 : 6084-6088,<br />
อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 10) มีการทดลองยืนยันวาการทดลองของ NAD เปนสาเหตุ<br />
มาจากสเตรปโตโซโตซิน โดยให Nicotinamide และ Picolinamide ซึ่งเปนตัวยับยั้ง Poly (ADPribose)<br />
synthetase สามารถที่จะปองกันการทําลายของ STZ ตอสาย DNA ใน In vivo และ<br />
ปองกันการลดลงของ NAD ใน In vitro การลดลงของ NAD เปนสาเหตุใหเกิดการตายของ<br />
เนื้อเยื่อที่ β-cell การทํางานของ β-cell ผิดปกติมีการสังเคราะห Proinsulin ลดลง จึงทําให<br />
β-cell หลั่งอินสุลินนอยลงเกิดโรคเบาหวานได<br />
4. ปจจัยที่มีอิทธิพลตอการเหนี่ยวนําใหเกิดโรคเบาหวานโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
4.1 อาหาร เมื่อหนูไดรับอาหารที่มีโปรตีนสูงและคารโบไฮเดรตต่ํา (โปรตีน 63%,<br />
คารโบไฮเดรต 6%) กอนการฉีดสเตรปโตโซโตซิน จะทําใหโอกาสการเกิดโรคเบาหวานลดลง<br />
Schmidt, et al (1980 : 161-168, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 :11)<br />
4.2 ขนาดของสเตรปโตโซโตซินและชนิดของสัตวทดลอง ความรุนแรงของการเกิด<br />
โรคเบาหวานจะขึ้นอยูกับขนาดที่มากขึ้น ขนาดของสเตรปโตโซโตซินที่ใชจะอยูระหวาง 25-200<br />
มิลลิกรัม/กิโลกรัม ตามแตชนิดของสัตวทดลอง โดยขนาดของสเตรปโตโซโตซินที่ใหหนูขาว<br />
ประมาณ 50-65 มิลลิกรัม/กิโลกรัม Karunanayake, et al (1974 : 673-683, อางถึงใน กมลวรรณ<br />
ศรีปลั่ง. 2546 :11)
4.3 อายุ เมื่อใหสเตรปโตโซโตซินแกสัตวทดลองที่อายุนอยโอกาสเกิดโรคเบาหวานก็<br />
จะนอยลง โดยมีรายงานการทดลองวาเมื่อใหที่ 60 มิลลิกรัม/กิโลกรัม (i.v) ในหนูอายุ 8 สัปดาห<br />
ผลการเหนี่ยวนําใหเกิดโรคเบาหวานดีกวาหนูอายุ 4 และ 6 สัปดาห Wong,& Wu (1994 : 131-<br />
136, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 12)<br />
Glibenclamide<br />
Glibenclamide เปนยากลุม Second generation sulfonylurea จับกับ Receptor ไดดีกวา<br />
และมี Potency สูงกวายาในกลุม First generation sulfonylurea ประมาณ 100 เทา ทําให<br />
สามารถใชขนาดยาที่ต่ํากวาไดจึงมีโอกาสที่จะทําใหเกิดฤทธิ์ขางเคียงจากสวนอื่นของโมเลกุลยา<br />
นอกเหนือจากสวน Sulfonylurea นอยกวา และอาจเกิดปฏิกิริยากับยาอื่นนอยกวาดวย (สุวัฒน<br />
วิมลวัฒนาภัณฑ. 2543: 503) ในผูปวยใหมควรเลือกใช Second generation sulfonylurea มากกวา<br />
First generation sulfonylurea เนื่องจากสามารถหลีกเลี่ยงโรคแทรกซอนจากการใชยา Sulfonylurea<br />
คือ Syndrome of Inappropriate ADH secretion (SIADH) และ Cholestatic jaundice ซึ่งถึงแม<br />
พบนอยแตรุนแรง และสามารถหลีกเลี่ยง Drug interaction ได (วิทยา ศรีมาดา. 2541: 42) ยาก<br />
ลุมนี้เปนยาลดน้ําตาลในเลือดชนิดหลักที่ใชมาเกือบ 40 ป และยังใชกันอยางแพรหลายในปจจุบัน<br />
จัดเปนยาที่ใชมากที่สุด เพราะมีฤทธิ์แรง และราคาคอนขางถูก<br />
1. คุณสมบัติทางเคมี<br />
สูตรโครงสรางทางเคมีคือ 1-{4-[2-(5-Chloro-2-methoxybenzamido) ethyl]<br />
benzensulfonyl} -3-cyclohexylurea โดยมีโครงสรางพื้นฐานของ Sulfonylureas ไดแก Benzene<br />
ring, Sulfonyl group และ Urea ซึ่งน้ําหนักโมเลกุลของ Glibenclamide เทากับ 494 Davis,&<br />
Gramer (1996: 1487-1518, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 12)<br />
2. เภสัชจลนศาสตร<br />
Glibenclamide จัดเปนกรดออน ถูกดูดซึมไดดีในระบบทางเดินอาหารประมาณรอยละ<br />
85 หลังรับประทานยา มีปริมาตรการกระจายตัวประมาณ 10-15 ลิตร สามารถจับกับพลาสมา<br />
โปรตีนไดมากกวา 99% โดยที่ Glibenclamide จะชอบจับกับอัลบูมินมากกวายากลุมอื่น<br />
Harrigan, et al (2001 : 68-78, อางถึงใน กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 13) ยาสามารถกระจายไปยัง<br />
อวัยวะตางๆ ของรางกาย โดยเฉพาะที่ตับ ไต ถูกเปลี่ยนแปลงที่ตับไดเปนสารที่ไมมีฤทธิ์และมี<br />
ฤทธิ์บางเล็กนอย (สุวัฒน วิมลวัฒนาภัณฑ. 2543 : 507) ในตับยาจะถูกเปลี่ยนเปน 4-transhydroxy<br />
glibenclamide และ 3-cis-hydroxy glibenclamide โดยมีฤทธิ์ลดน้ําตาลในเลือดไดเพียง
25% ของ Glibenclamide และถูกขับออกทางปสสาวะและอุจจาระ (อภิชาติ วิชญาณรัตน, และคน<br />
อื่นๆ. 2527 : 44) โดยที่คาครึ่งชีวิตจะยาวขึ้นในผูปวยโรคตับหรือไต<br />
3. กลไกการออกฤทธิ์ลดน้ําตาลในเลือด<br />
3.1 กลไกการออกฤทธิ์ที่ตับออน ออกฤทธิ์กระตุน β-cell ใหหลั่งอินสุลิน แตไม<br />
สามารถกระตุนใหเกิดการสรางอินสุลินได ยาจะออกฤทธิ์โดยไปจับกับรีเซฟเตอรที่ผนังเซลล<br />
เรียกวา Sulfonylurea Receptor (SUR) และทําใหเกิดการปดกั้น ATP sensitive potassium<br />
channels ที่ผนังเซลลของ β-cell เกิด Membrane depolarization ทําให Calcium channels ที่ผนัง<br />
เปด แคลเซียมวิ่งจากภายนอกเขาสูเซลล การเพิ่มขึ้นของแคลเซียมภายในเซลลทําใหมีการ<br />
เคลื่อนยาย Insulin granule มาที่ผนังเซลลและหลั่งอินสุลินออกมา การออกฤทธิ์ของยาจะ<br />
คลายคลึงกับฤทธิ์ของกลูโคสกลาวคือ เมื่อกลูโคสเขาสู β-cell โดยผานทาง GLUT2 ทําใหเกิด<br />
กระบวนการ Glycolysis ทําใหระดับ ATP ภายในเซลลเพิ่มขึ้น มีผลไปปดกั้น Potassium<br />
channels ที่ผนังเซลลเชนกัน Schmid-Antomarchi, et al (1987 : 161-168, อางถึงใน กมลวรรณ ศรี<br />
ปลั่ง. 2546 : 13) ปจจุบันพบวา SUR เปนสวนหนึ่งของ ATP sensitive potassium channels ซึ่ง<br />
อยูบนผนังเซลล นอกจากนี้ยังสามารถพบไดที่ผนังเซลลของกลามเนื้อหัวใจและหลอดเลือดซึ่งอาจ<br />
ทําใหยามีผลตอการเตนและการบีบตัวของหัวใจ Ashcroft,& Gribble (1999 : 903-919, อางถึงใน<br />
กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 13)<br />
3.2 กลไกการออกฤทธิ์นอกตับออน เมื่อใชยานี้รักษาระยะยาวระดับอินสุลินในเลือด<br />
อาจต่ํากวาตอนกอนใหยา แตยังสามารถลดระดับน้ําตาลได นาจะเปนไปไดวายาเพิ่ม Insulin<br />
sensitive และ Insulin receptor binding (Nielsen, et al. 1988 : 613-620) โดยมีงานวิจัยมากมาย<br />
เชน มีการเพิ่มของ Insulin receptor ใน Monocyte, Adipocyte และ Erythrocytes ในผูปวย<br />
เบาหวานชนิดที่ 2 เพิ่มฤทธิ์ของอินสุลินใน Cell culture และกระตุนการสังเคราะห Glucose<br />
transporters ลดการสรางกลูโคสจากตับ ใน Culture rat hepatocytes แตมีบางรายงานที่ขัดแยง<br />
เชน ยาไมมีผลลดน้ําตาลในเลือดในสัตวที่ผาตัดตับออนออก ไมมีผลในผูปวยเบาหวานชนิดที่ 1<br />
และไมมีผลในผูปวยเบาหวานชนิดที่ 2 ที่ใช Somatostatin เพื่อกดการหลั่งอินสุลิน<br />
3.3 ฤทธิ์ทางเภสัชวิทยา ลดระดับน้ําตาลในเลือดในผูปวยโรคเบาหวานชนิดที่ 2 ใน<br />
ระยะที่ยังไมมีภาวะ Ketoacidosis และลดระดับ Glucacon ในเลือด ซึ่งชวยลดอุบัติการณการเกิด<br />
ภาวะ Ketoacidosis ไดอีกทางหนึ่ง นอกจากนี้ยังลดระดับไขมันในเลือดทั้ง LDL และ<br />
Triglyceride ชวยใหเลือดแข็งตัวชาลง โดยมีฤทธิ์ตานเกล็ดเลือด<br />
3.4 ฤทธิ์ที่ไมพึงประสงค พบไดนอยมาก สวนใหญเกิดภาวะน้ําตาลในเลือดต่ํา อาจมี<br />
สวนทําใหอัตราการตายจากโรคหัวใจและหลอดเลือดเพิ่มขึ้น โดยทั่วไปฤทธิ์ยาที่ไมพึงประสงค
สวนใหญเกิดในเดือนแรกที่ใชยา ไดแก ผื่นคัน คลื่นไสอาเจียน เบื่ออาหาร ตัวเหลือง<br />
Erythema nodosum, Purpura photosensitivity, Thrombocytopenia, Red cell aplasia และ<br />
Agranulocytosis เปนตน<br />
ลักษณะทางพฤกษศาสตรของทับทิม<br />
ทับทิมเปนพืชที่มีอนุกรมวิธานดังนี้ (กนกอร ริ้วเหลือง. 2537 : 38)<br />
Kingdom : Plantae<br />
Subkingdom : Embryophyta<br />
Division : Tracheophhyta<br />
Subdivision : Pteropsida<br />
Class : Angiospermae<br />
Subclass : Dicotyledonae<br />
Order : Mytales<br />
Family : Punicaceae<br />
Genus : Punica<br />
Species : granatum<br />
1. ทับทิมมีลักษณะทางพฤกษศาสตร ดังนี้ (กนกอร ริ้วเหลือง. 2537 : 38)<br />
1.1 ลําตน เปนพรรณไมยืนตน ไมพุม ลักษณะผิวเปลือกลําตนเปนสีเทา สูงไม<br />
เกิน 3 เมตร ปลายกิ่งหอยลูลง ปลายกิ่งเล็กมักกลายเปนหนามแหลมๆ<br />
1.2 ใบ เปนใบเดี่ยว สวนใหญเรียงตัวแบบ Opposite ไมมีหูใบ กวาง 0.5-2.5<br />
เซนติเมตร ยาว 1-9 เซนติเมตร โคนใบสอบแคบ สวนที่คอนไปทางปลายสุดจะมนหรือหยักเวา<br />
เขาเล็กนอย เนื้อใบเนียน คอนขางบางและเปนมัน ยอดออนมีสีแดง<br />
1.3 ดอก ออกดอกเปนดอกเดี่ยวๆ หรือ ดอกชอแบบ Cyme เปนดอกสมบูรณเพศ<br />
มีดอกสีแดงสด และดอกสีขาว มี Hypanthium ดอกแบบ Regular ออกดอกที่ปลายกิ่งหรือซอก<br />
กิ่งแตละชอมี 1-5 ดอก<br />
1.4 กลีบเลี้ยง ติดกันที่ฐานเปน Hypanthium หรือ Calyx tube รูปรางคลายหมอดิน<br />
(urceolate) ปลายแยกมี 5-6 lobes<br />
1.5 กลีบดอก มี 5-7 กลีบ ซอนติดกันอยูที่ขอบของ Hypanthium เนื้อกลีบนิ่ม<br />
บางและยับยน
1.6 เกสรตัวผู มีจํานวนมากอยูแยกกันแบบ Perigynous หรือ Epigynous มีอับ<br />
เรณู 2 หอง<br />
1.7 เกสรตัวเมีย เปนแบบ Compound รังไขแบบ Inferior มี 8-12 carpels บาง<br />
ชนิดมีเพียง 3 carpels จํานวนหองเทากับจํานวน Carpel ovule มากเรียงเปน 2 วง วงนอกอยู<br />
สวนบนของรังไขเปนแบบ Parietal placentation วงในนอยูสวนลางของรังไขเปนแบบ Axile<br />
Placentation เวลาผารังไขดูตามขวางจะเห็นลักษณะซับซอนและมี Style 1 อัน Stigma 1 อัน<br />
1.8 ผล ลักษณะกลม โต วัดเสนผาศูนยกลางประมาณ 6-8 เซนติเมตร ผลแบบ<br />
Berry และ Calyx ยังคงเจริญติดอยูกับผล เมล็ดมีเยื่อสดๆ เปนเนื้อหุมอยู เรียกวา Pulp , Embryo<br />
ตั้งตรงไมมี Endosperm<br />
2. การศึกษาทางเคมี<br />
สารเคมีที่พบในสวนตางๆ ของทับทิมดังตอไปนี้ คณะเภสัชศาสตร<br />
มหาวิทยาลัยมหิดล (2533: 40-45, อางถึงใน สุนทรา หองแซง. 2542: 14-16)<br />
2.1 ราก n-Methyl-isopelletierine, Methyl pelletierine, Tannins, Pelletierine,<br />
Pseudo-pelletierine, Isopelletierine, D-Mannitol, β-Sitosterol, Betulic acid, Friedelin, Ursolic<br />
acid<br />
2.2 เปลือกตน Betulnic acid, Friedelin, Tannin, n-Methyl-isopelletierine,<br />
Pelletierine, Isopelletierine, Carbohydrates,D-Mannitol, Pectins, Citrict acid, Flavogallol,<br />
Quercetin-3-rutinoside, β-Sitosterol, Neohesperidin, Ursolic acid, Vitamins, Vitamin P,<br />
Essential oil<br />
2.3 ใบ Betulinic acid<br />
2.4 ผล Proteins, Carbohydrates, D-Glucose, D-Fructose, Sucrose, Polysaccharides,<br />
Inulin, Pectins, Oxalic acid, D-(+)-Malic acid, D-(+)-Tartaric, Citric acid, Gallic acid, P-(+)-<br />
Metoxy cinnamic acid, N-octadec-9t , enoic acid (Elaidic acid), Flavonoids, Anthocyanins,<br />
Quercetin-3-glycoside, Gum, Mucilages, Resins, Tannin, Gallotannin, Tetraterpenoids, B-<br />
Carotene, Waxes, Vitamins, Vitamin C, Ascorbate oxidase, Oil<br />
2.5 เปลือกผล Hydrolyzable tannin, Wax, Resin, Mannitol, Gum, Inulin,<br />
Mucilage, Gallic acid, Pectin, Calcium oxalate, Citrict acid, Malic acid, Isoquercitrin<br />
2.6 เนื้อในผล Callistephin, Chrysanthemin, Cyanin, Ellagic acid, Pectin, Granatin<br />
B, Pelargonin, Punicalagin, Punicalin<br />
2.7 เมล็ด Destrone
2.8 เปลือกเมล็ด Callistephin, Chrysanthemin, Cyanin, Delphin, Delphinidin, 3-O-<br />
B-D-glucoside, Pelargonin<br />
นอกจากนี้ยังมีรายงานการตรวจพบสารเคมีในทับทิม โดยไมไดระบุวาพบในสวน<br />
ใดดังตอไปนี้<br />
Glucerol, Sorbitol, Alkaloids, n-Methyl-isopelletierine, pelletierine, Cuscohygrine,<br />
Hygrine, Pyrrolidines, Carbohydrates, D-Fructose, D-Galactose, D-Mannose, D-Xylose, D-<br />
Mannitol, D-Rhamnose, Maltosee, Raffinose, Stachyose, Citric acid, Elements, Punicin, Tannins,<br />
Hydrolyzable tannins, Oil<br />
3. ฤทธิ์ทางเภสัชวิทยา<br />
มีฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาดังนี้ คณะเภสัชศาสตร มหาวิทยาลัยมหิดล (2533 : 40-45,<br />
อางถึงใน สุนทรา หองแซง. 2542 : 16-18)<br />
3.1 ราก ฤทธิ์ขับพยาธิ (Anthelmintic activity) มีผูพบวาเปลือกรากทับทิมมีฤทธิ์ขับ<br />
พยาธิเสนดายในไก และสารสกัดเปลือกรากทับทิมดวยน้ํารอนไมมีผลตอพยาธิ Ancylostoma ใน<br />
คน<br />
3.2 ตน<br />
3.2.1 ความเปนพิษตอเซลล (Cytotoxic activity) สารสกัดเปลือกตนดวยน้ํา อะ<br />
ซีโตน และอีเธอร ในขนาด 5.0 เปอรเซ็นต ไมมีพิษตอ CA-Ehrlic Ascite<br />
3.2.2 ฤทธิ์ฆาแมลง (Insecticide) เปลือกตนทับทิมไมสามารถฆาแมลงวัน มด<br />
หมัด หรือแมลงสาบได<br />
3.3 ใบ ฤทธิ์ตานแบคทีเรีย (Antibacterial activity) สารสกัดดวยเกลือจากใบทับทิม<br />
ในความเขมขน 1-40 มิลลิกรัม/กิโลกรัม มีฤทธิ์ฆา Staphylococcus aureus ซึ่งเปนสาเหตุของ<br />
การเปนหนอง และฆา Pasteure pestis<br />
3.4 ดอก<br />
3.4.1 ฤทธิ์ลดน้ําตาลในเลือด (Hypoglycemic activity) เมื่อใหหนูขาวกินดอก<br />
ทับทิมในขนาดตัวละ 4 กรัม พบวาทําใหปริมาณน้ําตาลในเลือดลดลง<br />
3.5 ผล<br />
3.5.1 พิษตอตัวออน (Embryotoxicity) ไดมีผูทดลองทดสอบพิษของสารสกัด<br />
จากเปลือกผลทับทิมดวยแอลกอฮอล 95 เปอรเซ็นต พบวาในขนาด 200 มิลลิกรัมตอกิโลกรัม<br />
ไมเปนพิษตอตัวออนของหนูขาวเมื่อใหหนูขาวกินสารสกัดดังกลาว
3.5.2 พิษตอตับ (Hepatotoxicity) เมื่อฉีดสารสกัดเปลือกผล สวนที่มี<br />
Gallotannin 0.5 เปอรเซ็นต เขาทางชองทองหนูถีบจักรวันละ 20 มิลลิลิตร/กิโลกรัม 2 วัน เมื่อ<br />
ตรวจวันที่ 3, 5 และ 9 วัน หลังจากใหยา พบวาตับถูกทําลายอยางรุนแรง<br />
3.5.3 ฤทธิ์ขับพยาธิ (Anthelmintic activity) สารสกัดจากผลทับทิมดวย<br />
แอลกอฮอล 95 เปอรเซ็นต มีฤทธิ์ขับพยาธิไสเดือน โดยทําใหพยาธิอัมพาตและตายและไดมีผู<br />
ทดลองใหหนูถีบจักรกินสารสกัดจากเปลือกผลดวยเมธานอล 120 มิลลิกรัม/กิโลกรัม พบวาใน 2<br />
วัน ขับพยาธิ Hymenolepsis diminuta ไดถึง 87 เปอรเซ็นต<br />
3.5.4 ฤทธิ์คุมกําเนิด (Antiferility activity) ในอินเดียไดมีการรายงานผลของ<br />
เปลือกทับทิมในการคุมกําเนิดในหนูขาว และหนูตะเภาทั้งสองเพศ โดยผสมในอาหารใหหนู<br />
ตะเภาทั้ง 2 เพศ โดยผสมในอาหารใหหนูตะเภาในขนาด 18.0 กรัม/กิโลกรัม แตผลการทดลอง<br />
ไมเพียงพอที่จะสรุปไดวาไดผลและไดมีผูทําการทดลองใชสารสกัดดวยตัวทําละลายตางๆ พบวา<br />
สารสกัดเปลือกผลทับทิมดวยน้ํา สามารถกระตุนกลามเนื้อมดลูกหนูขาวและสารสกัดดวย<br />
แอลกอฮอล 95 เปอรเซ็นต ไมทําใหหนูขาวแทง เมื่อกินสารสกัด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
3.5.5 ฤทธิ์ตานเชื้อไวรัส (Antiviral activity) สารสกัดผลทับทิมดวยน้ําสามารถ<br />
ฆาไวรัส Red virus type I ไวรัสซึ่งเปนสาเหตุของไขหวัดใหญ โปลิโอ เริม และ Coxsackie B 5<br />
Virus<br />
3.5.6 ฤทธิ์ตอเอนไซม (Effect on enzyme) เมื่อฉีดสารสกัดเปลือกผลทับทิม<br />
สวนที่มีแทนนินเขาชองทองหนูถีจักรในขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม จะกระตุนเอนไซม<br />
Glutamate-pyruvate ได และสารสกัดเปลือกผลดวยน้ํารอน มีผลยับยั้งเอนไซม Postaglandin<br />
synthetase เพียงเล็กนอย เมื่อใชในขนาดความเขมขน 750 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร<br />
นอกจากนี้มีผูพบวา Pelletierine ซึ่งสกัดจากเปลือกผล มีพิษนอยกวาเมื่อให Tannic acid แก<br />
กระตายวันละ 1 กรัม/กิโลกรัมและ Sherman พบวาทับทิมมีวิตามินสูงแต Wasta และ White<br />
พบวาทับทิมไมสามารถปองกันโรคลักปดลักเปดได<br />
3.6 เมล็ด<br />
3.6.1 ฤทธิ์คุมกําเนิด (Antifertility activity) น้ํามันจากเมล็ดทับทิมมีผลตอ<br />
ระบบสืบพันธุหลายอยางเมื่อฉีดเขาชองทองหนูถีจักรตัวละ 0.2 มิลลิลิตร มีผลทําใหกลามเนื้อ<br />
มดลูก คลายตัว และเมื่อฉีดเขาชองทองหนูถีบจักรตัวละ 0.4 มิลลิลิตร หรือฉีดเขาชองทอง<br />
กระตายตัวละ 0.5 มิลลิลิตร จะมีผลเหมือนฮอรโมนเพศหญิง และเมื่อนําน้ํามันไป Soponified<br />
นําสวนที่ไมทําปฏิกิริยาไปฉีดเขาชองทองกระตายตัวละ 250 มิลลิกรัม พบวามีฤทธิ์เหมือน
ฮอรโมนเพศหญิงซึ่งมีผูพบผลเชนเดียวกัน เมื่อฉีดเขาผิวหนังหนูขาวซึ่งตัดมดลูกออกและในหนู<br />
ถีบจักรซึ่งตัดมดลูกออก<br />
3.6.2 ฤทธิ์ตานแบคทีเรีย (Antibacterial activity) น้ํามันจากเมล็ดสามารถฆา<br />
Klebsiella pneumoniae ซึ่งเปนสาเหตุของนิวมอเนีย Sh. flexneri และ Salmonella paratyphi<br />
3.6.3 ฤทธิ์ขับพยาธิ (Antthelmintic activity) สารสกัดแอลกอฮอล 95<br />
เปอรเซ็นต สามารถขับพยาธิ Haemochus contortis ขนาดที่ไดผล 50 เปอรเซ็นตคือ 0.5<br />
มิลลิกรัม/กิโลกรัม สารสกัดทับทิมเมื่อใชเดี่ยวๆ หรือใชรวมกับนิโคติน 0.5 เปอรเซ็นต มีฤทธิ์ใน<br />
การขับถายพยาธิในลําไสกบ คือ Diplodiscus sp., Lorogenes sp. และ Cosmacerca sp. แตมีผู<br />
พบวาไมมีผลตอพยาธิปากขอ จะเห็นไดวาทับทิมมีสารซึ่งมีฤทธิ์ขับพยาธิ คือ Pelletierine แต<br />
เนื่องจากการทดสอบความเปนพิษมีหลักฐานนอย จึงยังคงไมแนะนําใหใช สวนฤทธิ์ในการแก<br />
อาการทองเสียก็เนื่องจากมีสารแทนนิน<br />
งานวิจัยที่เกี่ยวของ<br />
กมลวรรณ ศรีปลั่ง. (2546 : 64) ไดทําการศึกษาฤทธิ์ลดระดับน้ําตาลในเลือดของสาร<br />
สกัดจากใบหญาหนวดแมวในหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน โดยไดศึกษา<br />
หาสารประกอบเคมีในสารสกัดดวยน้ําของใบหญาหนวดแมว พบปริมาณ Phenolic compounds<br />
13.07±7.50 มิลลิกรัม/กรัม และปริมาณ Flavonoids 1.73±0.14 ไมโครกรัม/กรัม ซึ่งสารทั้งสอง<br />
ชนิดนี้ไดมีรายงานวาสามารถลดน้ําตาลในเลือดได และนํามาทดสอบฤทธิ์ลดน้ําตาลในเลือดดวย<br />
วิธี Oral Glucose Tolerance Test (OGTT) พบวาในหนูปกติ สารสกัดขนาด 0.2 และ 0.5<br />
กรัม/กิโลกรัม มีผลลดระดับน้ําตาลในเลือดไดเล็กนอย โดยที่ 1.0 กรัม/กิโลกรัม มีผลลดระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดมากที่สุด และมีผลใกลเคียงกับกลุมที่ไดรับ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
สวนในหนูเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน พบวาสารสกัดขนาด 0.5 และ 1.0<br />
กรัม/กิโลกรัม มีผลลดระดับน้ําตาลอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ และเมื่อใหสารสกัดขนาด 0.5 กรัม/<br />
กิโลกรัม วันละครั้งทุกวันเปนเวลา 14 วัน ไมพบความแตกตางอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ ของ<br />
ระดับน้ําตาลในวันที่ 8 แตพบในกลุมที่ไดรับ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม สวนในวันที่<br />
14 พบวาทั้ง 2 กลุม มีระดับน้ําตาลในเลือดลดลงอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ ผลตอสารเคมีในเลือด<br />
สวนใหญไมมีความแตกตางอยางมีนัยสําคัญทางสถิติเมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
ยกเวนคา AST และ HDL พบวาสารสกัดไมมีผลกอใหเกิดพยาธิสภาพตอเนื้อเยื่อตางๆ
Jafri, M.A. (1999: 309-314) ไดทําการศึกษาผลของสารสกัดจากดอกทับทิมในการลด<br />
ระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยอัลลอกแซน โดยทดลองในหนูขาว<br />
สายพันธุ Wistar แบงออกเปน 5 กลุม กลุมละ 6 ตัว คือ กลุมควบคุมปอนดวยน้ํากลั่น กลุมที่<br />
ปอนดวย Tolbutamide 500 มิลลิกรัม/กิโลกรัม กลุมที่ปอนดวยสารสกัดจากดอกทับทิมขนาด<br />
300 400 500 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ในหนูทุกกลุมกินน้ําตาลกลูโคสขนาด 2 กรัม/กิโลกรัม หลังให<br />
สารทดสอบ 30 นาที และทําการเจาะเลือดเพื่อตรวจวัดระดับน้ําตาลที่เวลา 30 และ 90 นาที<br />
หลังใหน้ําตาลกลูโคส พบวา 30 นาที หลังใหกินน้ําตาลกลูโคสระดับน้ําตาลในเลือดจะเพิ่มขึ้น<br />
เปน 2 เทา ในกลุมควบคุมและมีแนวโนมลดลงเรื่อยๆ ในกลุมที่ปอนดวย Tolbutamide และ สาร<br />
สกัดจากดอกทับทิม และที่เวลา 90 นาที ทุกขนาดของสารสกัดจากดอกทับทิมจะมีประสิทธิภาพ<br />
ในการลดระดับน้ําตาลในเลือด โดยเฉพาะในกลุมที่ปอนดวย Tolbutamide<br />
สุนทรา หองแซง. (2542 : 40) ไดทําการศึกษาผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม<br />
ตอการยับยั้งการเจริญของ Shigella บางชนิดซึ่งเปนสาเหตุของโรคบิด โดยศึกษาอิทธิพลรวมของ<br />
ชนิดของแบคทีเรียซึ่งไดแกแบคทีเรีย 3 ชนิดคือ Sh. Dysenteriae, Sh. Flexneri, Sh. sonnei และ<br />
ระดับความเขมขนของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมมี 5 ระดับคือ 60 120 80 240 และ 300<br />
มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ผลการทดลองพบวาแบคทีเรีย Sh. Flexneri และ Sh. sonnei เมื่อไดรับสาร<br />
สกัดจากเปลือกผลทับทิมดวยความเขมขน 300 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ถูกยับยั้งการเจริญมากกวา<br />
แบคทีเรียชนิดตางกันที่ไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมความเขมขนอื่น แบคทีเรีย Sh. Flexneri<br />
ที่ไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมถูกยับยั้งการเจริญมากกวาแบคทีเรีย Sh. Sonnei และ Sh.<br />
Dysenteriae และสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมระดับความเขมขน 300 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร สามารถ<br />
ยับยั้งการเจริญของแบคทีเรียมากกวาสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมระดับความเขมขนอื่น<br />
จารุวรรณ สุมมาตย. (2543) ไดทําการศึกษาสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่ไดจาก<br />
การสกัดแบบตอเนื่องดวย Hexane, Chloroform และ Methanol ไปทดสอบฤทธิ์ในการยับยั้งการ<br />
เจริญเติบโตของเชื้อ Shigella sonnei, Shigella flexneri, Salmonella typhi, Vibrio cholerae<br />
flexneri และ Salmonella typhi ไดดี สวนสารสกัด Chloroform และ Methanol ยับยั้งได<br />
เล็กนอย จากการศึกษาสารสกัด Hexane ทางเคมีเบื้องตน พบวามีสวนยอยที่สามารถยับยั้งการ<br />
เจริญของเชื้อไดคือ สวนยอยที่ 79-80 ยับยั้งการเจริญของ Shigella flexneri ไดดี สวนยอยที่ 21-<br />
29 และ 61-73 ยับยั้งเชื้อ Shigella sonnei, Shigella flexneri และ Salmonella typhi ได และ<br />
สวนยอย 31-40 ยับยั้ง Shigella sonnei และ Salmonella typhi ได สามารถแยกองคประกอบ<br />
ทางเคมีของสวนยอยที่ 79-80 ได คือ กรดแทนนิค
Das, A.K. (2001 : 628-9) ไดทําการศึกษาฤทธิ์ลดระดับน้ําตาลในเลือดของสารสกัด<br />
จากเมล็ดทับทิมในหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน โดยนําสารสกัดจาก<br />
เมล็ดทับทิมที่สกัดดวยเมธานอลในขนาด 300 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ Chlorpropamide<br />
200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ใหหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซินกิน พบวาสาร<br />
สกัดจากเมล็ดทับทิมสามารถลดระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนํา<br />
โดยสเตรปโตโซโตซินไดอยางมีนัยสําคัญที่ 47% และ 52% ตามลําดับที่ 12 ชั่วโมง<br />
Ragavan, B., & Krishnakumari, S. (2006 : 123-128) ไดทําการศึกษาฤทธิ์ของสาร<br />
สกัดจากรากของ T. Arjura ในการลดระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนํา<br />
โดยอัลลอกแซน และศึกษาการทํางานของเอนไซม Hexokinase, Aldolase และ<br />
Phosphoglucoisomerase และ Gluconeogenic เชน Glucose-6-phosphatase และ Fructose-1, 6-<br />
diphosphatase ในตับและไตของหนูปกติและหนูเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยอัลลอกแซนโดยปอน<br />
สารสกัดจากราก T. Arjura ขนาด 250 และ 500 มิลลิกรัม/กิโลกรัม เปนเวลา 30 วัน ผลการ<br />
ทดลองพบวาระดับน้ําตาลในเลือดลดลงอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p
สมมติฐานการวิจัย<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิมสามารถลดระดับน้ําตาลในเลือดและไมมีผลตอการ<br />
เปลี่ยนแปลงของระดับเอนไซม AST , ALT และระดับ BUN, Cr ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่<br />
ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน
บทที่ 3<br />
วิธีดําเนินการวิจัย<br />
แบบของการวิจัย<br />
การวิจัยเรื่อง ฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลลดระดับน้ําตาลในเลือด<br />
ของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน เปนการวิจัยเชิงทดลอง<br />
ประชากรและกลุมตัวอยางที่ใชในการวิจัย<br />
หนูขาวเพศผูสายพันธุ Spraque Dawley น้ําหนัก 160-210 กรัม อายุ 7-8 สัปดาห<br />
จํานวน 35 ตัว จากสํานักสัตวทดลองแหงชาติมหาวิทยาลัยมหิดล ตําบลศาลายา อําเภอนครชัยศรี<br />
จังหวัดนครปฐม นํามาเลี้ยงที่หนวยสัตวทดลอง คณะเวชศาสตรเขตรอน มหาวิทยาลัยมหิดล<br />
เครื่องมือที่ใชในการวิจัย<br />
1. สารเคมี<br />
1.1 Streptozotocin (Sigma, U.S.A)<br />
1.2 Glibenclamide ( Daonil ® , Hoechst Marion Roussel, Germany)<br />
1.3 Citric acid (Riedel-dettaen, U.S.A.)<br />
1.4 Tri-Sodium citrate (Analar BDH, England)<br />
1.5 95% เอธิลแอลกอฮอล<br />
1.6 70 % Alcohol<br />
1.7 Pevedine solution<br />
1.8 Sodium Chlorohydrate 4%<br />
1.9 Sterile water<br />
2. เครื่องมือ<br />
2.1 Glucose Meter ( Advantage ® , Roche Diagnostics Co, Thailand)
2.2 Rotary Vacuum Evaporator ยี่หอ Heidolph<br />
2.3 Oven ยี่หอ Memmert<br />
2.4 เครื่องบดไฟฟา ยี่หอ DANGER<br />
2.5 เครื่องชั่งแบบละเอียด ยี่หอ Sartorius รุน GR-200<br />
2.6 เครื่องชั่งน้ําหนัก<br />
2.7 ปากกาวัด pH<br />
3. อุปกรณ<br />
3.1 ขวดรูปชมพู<br />
3.2 กระดาษกรองเบอร 4 ยี่หอ Whatman<br />
3.3 บีกเกอร<br />
3.4 กรรไกรตัดไหม<br />
3.5 ปเปต<br />
3.6 Needle ขนาด 20 21 และ 24 ยี่หอ Nipro<br />
3.7 Micro-Hematocrit tube (Non-Heparin) ยี่หอ Vitrex<br />
3.8 Syringe Insulin ขนาด 100 ยูนิต ยี่หอ Terumo<br />
3.9 Syringe ขนาด 3 5 10 และ 50 มิลลิลิตร ยี่หอ Nipro<br />
3.10 Endroffin tube<br />
วิธีดําเนินการทดลองและการเก็บรวบรวมขอมูล<br />
1. การสกัดเปลือกผลทับทิม<br />
1.1 นําเปลือกผลทับทิมมาอบแหงที่อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียส เปนเวลา 96<br />
ชั่วโมง บดใหละเอียดดวยเครื่องบดไฟฟา นํามาจํานวน 40 กรัม ใสในขวดรูปชมพูขนาด 250<br />
มิลลิลิตร เติมเอธิลแอลกอฮอล 95 เปอรเซ็นต ปริมาตร 160 มิลลิลิตร แชไวนาน 48 ชั่วโมง<br />
1.2 นํามากรองดวยกระดาษกรองเบอร 4<br />
1.3 นําไประเหยตัวทําละลายออก ดวยเครื่อง Rotary Vaccuum Evaporator ที่<br />
อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียส เพื่อทําใหสารสกัดเขมขนขึ้น แลวนําไปอบที่อุณหภูมิ 37 องศา<br />
เซลเซียส จะไดสารสกัดที่มีลักษณะยางเหนียวสีน้ําตาล<br />
2. การเหนี่ยวนําหนูขาวใหเปนเบาหวาน
2.1 งดอาหารหนูขาวกอนฉีดสเตรปโตโซโตซิน 24 ชั่วโมง ตรวจวัดระดับน้ําตาล<br />
ในเลือดโดยขลิบปลายหางหนูขาวประมาณ 0.1 มิลลิเมตร ดังแสดงในภาพที่ 3.1 และตรวจวัด<br />
ระดับน้ําตาลในเลือดโดยใช Glucose meter (Advantage ® ) ดังแสดงในภาพที่ 3.2 หลังจากนั้น<br />
เหนี่ยวนําหนูขาวใหเปนเบาหวานโดยการฉีดสเตรปโตโซโตซินขนาด 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ที่<br />
ละลายใน Citrate buffer ( pH 4.5) เขาทางหลอดเลือดดําบริเวณหางของหนูขาว<br />
2.2 หลังจากฉีดสเตรปโตโซโตซินแลวทําการตรวจวัดระดับน้ําตาลในเลือดของหนู<br />
ขาวทุก 3 วัน เปนเวลา 1 อาทิตย โดยงดอาหารหนูขาว 8 ชั่วโมง และขลิบปลายหางหนูขาว<br />
ประมาณ 0.1 มิลลิเมตร เพื่อวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยใช Glucose meter (Advantage ® ) เพื่อ<br />
คัดเลือกหนูขาวที่มีระดับน้ําตาลในเลือดมากกวา 132 มิลลิกรัม/เดซิลิตร เขาทําการทดลอง และ<br />
ถือเปนหนูขาวเบาหวานที่ใชในการทดลองครั้งนี้<br />
ภาพที่ 3.1 การขลิบปลายหางหนูขาวเพื่อวัดระดับน้ําตาลในเลือด
ภาพที่ 3.2 การตรวจวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยใช Glucose meter (Advantage ® )<br />
3. การทดสอบฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลลดระดับน้ําตาลในเลือด<br />
ของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
3.1 แบงหนูขาวเบาหวานออกเปน 5 กลุม กลุมละ 5 ตัว ดังนี้<br />
กลุมที่ 1 กลุมควบคุม ปอนน้ํากลั่น 0.5 มิลลิลิตร/ตัว<br />
กลุมที่ 2 ปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุมที่ 3 ปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุมที่ 4 ปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุมที่ 5 ปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
3.2 ทําการปอนสารดังกลาวทุกวัน วันละ 1 ครั้ง ในหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม<br />
ติดตอกันนาน 7 วัน และหยุดปอนสารดังกลาวในหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม เปนเวลา 7 วัน<br />
3.3 งดอาหารหนูขาวเบาหวานกอนทําการตรวจวัดระดับน้ําตาลในเลือด 8 ชั่วโมง<br />
และตรวจวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยขลิบปลายหางหนูขาวเบาหวานประมาณ 0.1 มิลลิเมตร<br />
และตรวจวัดระดับน้ําตาลในเลือดโดยใช Glucose meter (Advantage ® ) ในหนูขาวเบาหวานทั้ง 5<br />
กลุม ในวันที่ 1 3 5 7 11 และ 14<br />
4. การศึกษาผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่มีผลตอระดับเอนไซม AST, ALT<br />
และระดับ BUN, Cr ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
4.1 แบงหนูขาวเบาหวานเปน 5 กลุม กลุมละ 5 ตัว ดังนี้<br />
กลุมที่ 1 กลุมควบคุม ปอนน้ํากลั่น 0.5 มิลลิลิตร/ตัว
กลุมที่ 2 ปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุมที่ 3 ปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุมที่ 4 ปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุมที่ 5 ปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
4.2 ทําการปอนสารดังกลาวทุกวัน วันละ 1 ครั้ง ในหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม<br />
ติดตอกันนาน 7 วัน และหยุดปอนสารดังกลาวในหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม เปนเวลา 7 วัน<br />
4.3 งดอาหารหนูขาวเบาหวานกอนทําการตรวจวัดระดับเอนไซมในเลือดไดแก<br />
AST, ALT 8 ชั่วโมง และทําการเจาะเลือดบริเวณหัวตาของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุมในวันที่<br />
1 7 และ 14 และตรวจวัดระดับ BUN และ Cr ในวันที่ 1 และ 14<br />
การวิเคราะหขอมูลทางสถิติ<br />
1. เปรียบเทียบคาเฉลี่ยของระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนํา<br />
โดยสเตรปโตโซโตซิน ในกลุมทดลองทั้ง 5 กลุม ในการทดลองที่ 1 โดยใช ANOVA และ<br />
โปรแกรมทางคอมพิวเตอร Stata กําหดระดับความเชื่อมั่น p
บทที่ 4<br />
ผลการวิเคราะหขอมูล<br />
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลลดระดับน้ําตาลในเลือด (FBS)<br />
ของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
จากการเหนี่ยวนําใหหนูขาวเปนเบาหวานโดยการฉีด STZ 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
หลังจากนั้น 3 วัน ตรวจวัดระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวโดยใช Glucose meter เพื่อคัดเลือก<br />
หนูขาวที่มีระดับน้ําตาลในเลือดมากกวา 132 มิลลิกรัม/เดซิลิตร เขาทําการทดลองและกําหนดเปน<br />
หนูขาวเบาหวานที่ใชในการทดลองครั้งนี้<br />
จากการวัดระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2 กอนไดรับ<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ Glibenclamide<br />
5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ตามลําดับ ในวันที่ 1 พบวาระดับน้ําตาลในเลือดกอนไดรับสารดังกลาวไม<br />
มีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุม (กลุม 1 ; ปอนน้ํา<br />
กลั่น) ในเวลาเดียวกัน<br />
หลังจากปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/<br />
กิโลกรัมและ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม แกหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2<br />
ตามลําดับ วันละครั้งเปนเวลา 7 วันติดตอกัน ผลการทดลองดังแสดงในตารางที่ 4.1 และภาพที่<br />
4.1 ดังนี้ ในวันที่ 3 หลังจากหนูขาวเบาหวานไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400<br />
และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม พบวาระดับน้ําตาลใน<br />
เลือดมีแนวโนมลดลงในหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 และ 5 แตไมมีความแตกตางอยางมีนัยสําคัญ<br />
ทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตน (วันที่ 1 ; กอน<br />
ปอนสารทดสอบ) ในกลุมเดียวกัน สวนหนูขาวเบาหวานกลุม 2 ระดับน้ําตาลในเลือดมีแนวโนม<br />
ลดลง และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p
ควบคุมในเวลาเดียวกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน สวนหนูขาวเบาหวานกลุม 2 ระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดมีแนวโนมลดลง และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p
ตารางที่ 4.1 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับน้ําตาลในเลือด (FBS) หลังไดรับ<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม<br />
กลุม<br />
1<br />
2<br />
3<br />
4<br />
5<br />
ระดับน้ําตาลในเลือด (มิลลิกรัม/เดซิลิตร)<br />
วันที่ 1 วันที่ 3 วันที่ 5 วันที่ 7 วันที่ 11 วันที่ 14<br />
218.40±106.50<br />
(99±9.03) d 217.20±103.88 326.40±137.79 232.80±53.59 339.75±103.82 361.75±45.24<br />
227.20±92.80<br />
(105.4±11.08 101.80±4.71 * a 93.20±4.65 *** b 102.80±6.05 *** a 126.40±15.14 *** 305.80±59.73<br />
) d<br />
146.40±14.00<br />
(99.6±8.56) d 120.80±18.03 159.00±12.26 ** 117.80±19.30 *** 157.60±10.13 *** 156.20±17.21 ***<br />
151.40±20.00<br />
(107.8±9.12) d 129.00±10.95 136.20±3.03 ** 108.80±12.55 *** b 151.00±11.00 *** 154.00±14.12 ***<br />
145.00±12.22<br />
(114.6±9.56) d 142.80±10.84 148.00±13.03 ** 121.80±14.49 *** 165.60±21.61 *** 142.00±19.62 ***<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
d= คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับน้ําตาลในเลือดกอนฉีด STZ
500<br />
ระดั บ FBS (มก./ดล.)<br />
400<br />
300<br />
200<br />
100<br />
0<br />
1 3 5 7 1 1 1 4<br />
เว ลา (วั นที่ )<br />
กลุ ม 1 กลุ ม 2 กลุ ม 3 กลุ ม 4 กลุ ม 5<br />
ภาพที่ 4.1 ผลของระดับน้ําตาลในเลือด (FBS) ของหนูขาวเบาหวานภายหลังไดรับสารสกัดจาก<br />
เปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปนเวลา 7 วัน และหยุดไดรับสาร<br />
ดังกลาวเปนเวลา 7 วัน<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
d= คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับน้ําตาลในเลือดกอนฉีด STZ
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับเอนไซม AST ในเลือด<br />
ของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
จากการวัดระดับเอนไซม AST ในเลือดของหนูขาวเบาหวานกลุม 2 3 4 และ 5 ซึ่ง<br />
เปนคาบงชี้การทํางานของตับ กอนไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600<br />
มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ตามลําดับ ในวันที่ 1 พบวาระดับ<br />
เอนไซม AST ไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุม<br />
(กลุม 1 ; ปอนน้ํากลั่น) ในเวลาเดียวกัน<br />
หลังจากปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/<br />
กิโลกรัมและ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม แกหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2<br />
ตามลําดับ วันละครั้งเปนเวลา 7 วันติดตอกัน ผลการทดลองดังแสดงในตารางที่ 4.2 และภาพที่<br />
4.2 ดังนี้ ในวันที่ 7 หลังจากหนูขาวเบาหวานไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400<br />
และ 600มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ในหนูขาวเบาหวานกลุม<br />
3 4 5 และ 2 ตามลําดับ พบวาระดับเอนไซม AST มีแนวโนมเพิ่มขึ้นในหนูขาวเบาหวานกลุม<br />
3 4 และ 5 แตไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุม<br />
ในเวลาเดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตน (วันที่ 1 ; กอนปอนสารทดสอบ) ในกลุมเดียวกัน สวนหนู<br />
ขาวเบาหวานกลุม 2 ระดับเอนไซม AST มีแนวโนมเพิ่มขึ้น และมีความแตกตางกันอยางมี<br />
นัยสําคัญทางสถิติ (p0.05)<br />
เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน สวนหนูขาว<br />
เบาหวานกลุม 2 ระดับเอนไซม AST มีแนวโนมเพิ่มขึ้น และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญ<br />
ทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน และหนูขาวเบาหวานกลุม 3<br />
ระดับเอนไซม AST มีแนวโนมเพิ่มขึ้น และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ<br />
(p0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน
ตารางที่ 4.2 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม AST ในเลือดหลังไดรับสาร<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม<br />
กลุม<br />
1<br />
2<br />
3<br />
4<br />
5<br />
ระดับเอนไซม Asparate aminotransferase (ยูนิต/ลิตร)<br />
วันที่ 1 วันที่ 7 วันที่ 14<br />
166.40±35.21<br />
(78.4±7.70) e 221.80±43.45 426.50±217.90 a<br />
174.80±13.66<br />
(83.4±4.56) e 349.80±72.94 ** b 441.00±73.24 c<br />
197.80±11.73<br />
(84.8±5.26) e 240.80±18.55 265.60±49.36 a<br />
185.20±37.83<br />
(87.8±3.56) e 221.40±31.07 260.00±60.30<br />
152.00±24.05<br />
(83.6±7.30) e 192.40±31.38 240.80±79.62<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
e= คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม AST กอนฉีด STZ
ระดั บ AST (ยู นิ ต /ลิ ตร)<br />
700<br />
600<br />
500<br />
400<br />
300<br />
200<br />
100<br />
0<br />
1 7 1 4<br />
เว ล า (วั นที่ )<br />
กลุ ม 1 กลุ ม 2 กลุ ม 3 กลุ ม 4 กลุ ม 5<br />
ภาพที่ 4.2 ผลของระดับเอนไซม AST ในเลือดของหนูขาวเบาหวานภายหลังไดรับสารสกัดจาก<br />
เปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปนเวลา 7 วัน และหยุดไดรับสาร<br />
ดังกลาวเปนเวลา 7 วัน<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
e= คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม AST กอนฉีด STZ
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับเอนไซม ALT ในเลือด<br />
ของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
จากการวัดระดับเอนไซม ALT ในเลือดของหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2<br />
กอนไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ<br />
Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ตามลําดับ ในวันที่ 1 พบวาระดับเอนไซม ALT ไมมีความ<br />
แตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุม (กลุม 1 ; ปอนน้ํากลั่น) ใน<br />
เวลาเดียวกัน<br />
หลังจากปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/<br />
กิโลกรัม และ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม แกหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2<br />
ตามลําดับ วันละครั้งเปนเวลา 7 วันติดตอกัน ผลการทดลองดังแสดงในตารางที่ 4.3 และภาพที่<br />
4.3 ดังนี้ ในวันที่ 7 หลังจากหนูขาวเบาหวานไดรับสารดังกลาว พบวา ระดับเอนไซม ALT มี<br />
แนวโนมเพิ่มขึ้นในหนูขาวเบาหวานกลุม 2 3 และ 4 แตไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญ<br />
ทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตน (วันที่ 1 ; กอน<br />
ปอนสารทดสอบ) ในกลุมเดียวกัน สวนหนูขาวเบาหวานกลุม 5 ระดับเอนไซม ALT มีแนวโนม<br />
เพิ่มขึ้น และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมใน<br />
เวลาเดียวกัน<br />
เมื่อหยุดใหสารดังกลาวแกหนูขาวเบาหวานกลุม 2 3 4 และ 5 เปนเวลา 7 วัน<br />
(วันที่ 8-14) พบวา ในวันที่ 14 ระดับเอนไซม ALT มีแนวโนมเพิ่มขึ้น ในหนูขาวเบาหวาน<br />
กลุม 3 แตไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมใน<br />
เวลาเดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน สวนหนูขาวเบาหวานกลุม 2 ระดับเอนไซม<br />
ALT มีแนวโนมเพิ่มขึ้น แตไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับ<br />
กลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน แตมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลา<br />
เดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน และหนูขาวเบาหวานกลุม 5 ระดับเอนไซม ALT<br />
มีแนวโนมเพิ่มขึ้น แตไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุม<br />
ควบคุมในเวลาเดียวกัน และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p
ตารางที่ 4.3 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม ALT ในเลือดหลังไดรับ<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม<br />
กลุม<br />
1<br />
2<br />
3<br />
4<br />
5<br />
ระดับเอนไซม Alanine aminotransferase (ยูนิต/ลิตร)<br />
วันที่ 1 วันที่ 7 วันที่ 14<br />
50.80±7.66<br />
(36.8±2.95) f 59.40±8.11 120.00±103.15<br />
43.00±5.65<br />
(35.2±2.39) f 74.00±22.44 101.40±28.57 b<br />
50.80±4.86<br />
(35.8±3.56) f 58.00±4.30 60.80±8.43<br />
51.60±8.44<br />
(35.6±3.05) f 61.00±8.45 44.60±11.56<br />
44.00±2.82<br />
(34.4±2.30) f 55.00±3.16 a 56.60±9.07 a<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
f = คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม ALT กอนฉีด STZ
250<br />
ระดั บ ALT (ยู นิ ต /ลิ ตร)<br />
200<br />
150<br />
100<br />
50<br />
0<br />
1 7 1 4<br />
เว ลา (วั นที่ )<br />
กลุ ม 1 กลุ ม 2 กลุ ม 3 กลุ ม 4 กลุ ม 5<br />
ภาพที่ 4.3 ผลของระดับเอนไซม ALT ในเลือดของหนูขาวเบาหวานภายหลังไดรับ<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปน<br />
เวลา 7 วัน และหยุดไดรับสารดังกลาวเปนเวลา 7 วัน<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
f = คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับเอนไซม ALT กอนฉีด STZ
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับ BUN ในเลือดของ<br />
หนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
จากการวัดระดับ BUN ในเลือดของหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2 ซึ่งเปนคา<br />
บงชี้การทํางานของไต กอนไดรับสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600<br />
มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ตามลําดับ ในวันที่ 1 พบวาระดับ<br />
BUN ไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุม (กลุม 1 ;<br />
ปอนน้ํากลั่น) ในเวลาเดียวกัน<br />
หลังจากปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/<br />
กิโลกรัมและ Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม แกหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2<br />
ตามลําดับ วันละครั้งเปนเวลา 7 วันติดตอกัน และหยุดปอนสารดังกลาวแกหนูขาวเบาหวานทุก<br />
กลุมเปนเวลา 7 วัน (วันที่8-14) ผลการทดลองดังแสดงในตารางที่ 4.4 และภาพที่ 4.4 ดังนี้ ใน<br />
วันที่ 14 ของการทดลอง พบวาระดับ BUN มีแนวโนมเพิ่มขึ้นในหนูขาวเบาหวานกลุม 4 และ<br />
5 แตไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลา<br />
เดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตน (วันที่ 1; กอนปอนสารทดสอบ) ในกลุมเดียวกัน สวนหนูขาว<br />
เบาหวานกลุม 2 ระดับ BUN มีแนวโนมเพิ่มขึ้น และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ<br />
(p0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน และหนูขาวเบาหวานกลุม 3 ระดับ BUN มี<br />
แนวโนมเพิ่มขึ้น และมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับกลุม<br />
ควบคุมในเวลาเดียวกัน
ตารางที่ 4.4 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ BUN ในเลือดหลังไดรับสารสกัดจาก<br />
เปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม<br />
กลุม<br />
1<br />
2<br />
3<br />
4<br />
5<br />
ระดับ Blood urea nitrogen (มิลลิกรัม/เดซิลิตร)<br />
วันที่ 1 วันที่ 14<br />
19.25±0.95<br />
(17.6±1.14) g 28.00±10.86<br />
18.00±1.00<br />
(15.4±1.14) g 22.40±2.07 b<br />
21.00±2.00<br />
(17.4±1.34) g 24.80±2.77 a<br />
21.20±1.78<br />
(16±1.87) g 21.20±3.03<br />
21.40±1.94<br />
(17.2±0.84) g 22.80±4.38<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
g = คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ BUN กอนฉีด STZ
50<br />
ระดั บ BUN (มก./ดล.)<br />
40<br />
30<br />
20<br />
10<br />
0<br />
1 1 4<br />
เว ลา (วั นที่ )<br />
กลุ ม 1 กลุ ม 2 กลุ ม 3 กลุ ม 4 กลุ ม 5<br />
ภาพที่ 4.4 ผลของระดับ BUN ในเลือดของหนูขาวเบาหวานภายหลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผล<br />
ทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปนเวลา 7 วัน และหยุดไดรับสารดังกลาวเปน<br />
เปนเวลา 7 วัน<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
g = คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ BUN กอนฉีด STZ
ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับ Cr ในเลือดของหนู<br />
ขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
จากการวัดระดับ Cr ในเลือดของหนูขาวเบาหวานกลุม 3 4 5 และ 2 กอนไดรับ<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ Glibenclamide<br />
5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ตามลําดับ ในวันที่ 1 พบวาระดับ Cr ไมมีความแตกตางกันอยางมี<br />
นัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) ในหนูขาวเบาหวานกลุม 2 3 และ 4 เมื่อเทียบกับกลุมควบคุม (กลุม<br />
1 ; ปอนน้ํากลั่น) ในเวลาเดียวกัน สวนหนูขาวเบาหวานกลุม 5 ระดับ Cr มีความแตกตางกันอยาง<br />
มีนัยสําคัญทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
และหนูขาวเบาหวานกลุม 4 ระดับ Cr มีแนวโนมลดลง และไมมีความแตกตางกันอยางมี<br />
นัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน และเทียบกับคาเริ่มตนใน<br />
กลุมเดียวกัน สวนหนูขาวเบาหวานกลุม 5 ระดับ Cr มีแนวโนมลดลง และไมมีความแตกตาง<br />
กันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน แตมีความแตกตาง<br />
กันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p
ตารางที่ 4.5 คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ Cr ในเลือดหลังไดรับสารสกัด<br />
จากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ของหนูขาวเบาหวานทั้ง 5 กลุม<br />
กลุม<br />
1<br />
2<br />
3<br />
4<br />
5<br />
ระดับ Creatinine (มิลลิกรัม/เดซิลิตร)<br />
วันที่ 1 วันที่ 14<br />
0.55±0.06<br />
(0.66±0.05) h 0.70±1.41<br />
0.64±0.05<br />
(0.7±0.1) h 0.82±0.08 b<br />
0.64±0.05<br />
(0.68±0.15) h 0.72±0.08<br />
0.66±0.05<br />
(0.62±0.16) h 0.62±0.04<br />
0.72±0.08 *<br />
(0.7±0.12) h 0.58±0.04 a<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
h = คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ Cr กอนฉีด STZ
1<br />
0.8<br />
ระดั บ Cr (มก./ดล.)<br />
0.6<br />
0.4<br />
0.2<br />
0<br />
1 1 4<br />
เว ลา (วั นที่ )<br />
กลุ ม 1 กลุ ม 2 กลุ ม 3 กลุ ม 4 กลุ ม 5<br />
ภาพที่ 4.5 ผลของระดับ Cr ในเลือดของหนูขาวเบาหวานภายหลังไดรับสารสกัดจากเปลือกผล<br />
ทับทิม และ Glibenclamide วันละครั้งเปนเวลา 7 วัน และหยุดไดรับสารดังกลาว<br />
เปนเวลา 7 วัน<br />
กลุม 1 หมายถึง กลุมควบคุม<br />
กลุม 2 หมายถึง กลุมปอน Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 3 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 4 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 400 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
กลุม 5 หมายถึง กลุมปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
* p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
** p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
*** p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน<br />
a = p < 0.05 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
b = p < 0.01 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
c = p < 0.001 เมื่อเปรียบเทียบกับคาเริ่มตนในกลุมเดียวกัน<br />
h = คาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานของระดับ Cr กอนฉีด STZ
บทที่ 5<br />
สรุปผลการวิจัย อภิปรายผล และขอเสนอแนะ<br />
สรุปผลการทดลอง<br />
หนูขาวเบาหวานกลุมที่ปอนดวยสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ<br />
600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม สามารถลดระดับน้ําตาลในเลือดไดใกลเคียงกัน อยางมีนัยสําคัญทางสถิติ<br />
สวนหนูขาวเบาหวานกลุมที่ปอนดวย Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม สามารถลดระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานไดดีที่สุด และผลตอระดับเอนไซม Asparate aminotransferase<br />
(AST) Alanine aminotransferase (ALT) และระดับ Blood urea nitrogen (BUN) Creatinine (Cr)<br />
ไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) ในหนูขาวเบาหวานกลุมที่ปอนดวยสาร<br />
สกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และหนูขาวเบาหวานกลุม<br />
ที่ปอนดวย Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ยกเวนระดับเอนไซม Asparate<br />
aminotransferase (AST) มีแนวโนมเพิ่มขึ้นอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับกลุม
ควบคุมในเวลาเดียวกัน และสารสกัดดังกลาวสามารถลดระดับน้ําตาลในเลือดไดอยางมีนัยสําคัญ<br />
ทางสถิติ (p
สถิติ (p0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน ซึ่งสอดคลองกับการศึกษาของ Anon ที่พบวา<br />
เมื่อฉีดสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมสวนที่มี Gallotannin ความเขมขน 0.5% เขาชองทองหนูถีบ<br />
จักร วันละ 20 มิลลิลิตร/กิโลกรัม เปนเวลา 2 วัน เมื่อตรวจตับของหนูถีบจักรวันที่ 3 5 และ 9<br />
หลังจากใหสารสกัด พบวาตับถูกทําลายอยางรุนแรง (Anon. 1978: 388) และจากการศึกษาของ<br />
Tri Budhi Murdiati. ถึงการปองกันพิษของ Hydrolyzable tannin ในสารสกัดจากใบ Climedia<br />
hirta โดยแคลเซียมไฮดรอกไซม พบวาในใบ Climedia hirta (harendong) มี Hydrolyzable<br />
tannin อยู 19% และเมื่อปอนสารสกัด 50% harendong เปนเวลา 28 วัน และตรวจวัดระดับ<br />
เอนไซม AST และ ALT พบวาระดับเอนไซมทั้งสองสูงขึ้นอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ จาก 50.20<br />
ยูนิต/ลิตร เปน 219.60 ยูนิต/ลิตร และ 20.6 ยูนิต/ลิตร เปน 63.3 ยูนิต/ลิตร ตามลําดับ และ<br />
เซลลตับมีขนาดใหญขึ้น (Murdiati, et al. 2006 : 325-331) สวนหนูขาวเบาหวานกลุมที่ปอนดวย<br />
Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม มีผลทําใหระดับเอนไซม AST เพิ่มขึ้น และมีความแตกตาง<br />
กันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p0.05) เมื่อเทียบ<br />
กับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน ซึ่งสอดคลองกับการศึกษาถึงผลของ Glibenclamide ที่มีผลตอการ<br />
ทํางานของตับ โดยให Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม วันละครั้งเปนเวลา 14 วัน ในหนู<br />
ขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน พบวาระดับเอนไซม AST และ ALT มี<br />
แนวโนมเพิ่มขึ้นอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน (กมลวรรณ
ศรีปลั่ง. 2546 : 68)จากผลการทดลองดังกลาวจะเห็นไดวาจากการศึกษาผลของสารสกัดจากเปลือก<br />
ผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับเอนไซม AST ในเลือดของหนูขาวเบาหวาน<br />
พบวาหนูขาวเบาหวานกลุม 1 ในวันที่ 1 กอนปอนน้ํากลั่น ระดับเอนไซม AST มีคามากกวา<br />
ปกติ (166.4±35.21 ยูนิต/ลิตร) ของหนูขาวเพศผูสายพันธุ Spraque Dawley (คาปกติเทากับ<br />
95±31.7 ยูนิต/ลิตร) สวนในวันที่ 7 ระดับเอนไซม AST มีแนวโนมเพิ่มขึ้น (221.80±43.45 ยู<br />
นิต/ลิตร) แตไมมีความแตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p >0.05) เมื่อเทียบกับคาเริ่มตนใน<br />
กลุมเดียวกัน แสดงใหเห็นวา STZ มีผลทําลายตับและทําใหระดับเอนไซม AST มีคาเพิ่มขึ้น<br />
ตลอดการทดลอง ซึ่งสอดคลองกับการศึกษาของ Daniela M. Mori พบวาหนูขาวเบาหวานที่ถูก<br />
เหนี่ยวนําโดย STZ มีผลทําใหเนื้อเยื่อตับและไตถูกทําลาย และทําใหระดับเอนไซม AST และ<br />
ALT สูงขึ้น (Mori, et al. 2003 : 183-191) และผลการศึกษาของ Imeda, A. พบวา DNA ในเซลล<br />
ตับถูกทําลายในหนู mice ที่เหนี่ยวนําใหเปนเบาหวานโดยการฉีด STZ 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
ทาง Intraperitoneal (i.p) และสงผลใหระดับเอนไซม AST และ ALT เพิ่มขึ้น (Imeda, et al.<br />
2002 : 1415-1422) ดังนั้นการที่ระดับเอนไซม AST มีแนวโนมเพิ่มขึ้นในหนูขาวเบาหวานกลุม 2<br />
3 4 และ 5 นั้น อาจเกิดจากการออกฤทธิ์ของ STZ ที่มีผลทําลายตับสวนหนึ่งและการออกฤทธิ์<br />
ของสารทดสอบที่ปอนแกหนูขาวเบาหวานในการทดลองครั้งนี้<br />
3. ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม และ Glibenclamide ที่มีผลตอระดับ BUN<br />
และ Cr ในเลือดของหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโตโซโตซิน<br />
สารสกัดจากเปลือกผลทับทิมขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม และ<br />
Glibenclamide 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม มีผลทําใหระดับ BUN และ Cr เพิ่มขึ้น แตไมมีความ<br />
แตกตางกันอยางมีนัยสําคัญทางสถิติ (p>0.05) เมื่อเทียบกับกลุมควบคุมในเวลาเดียวกัน อาจเกิด<br />
จากภาวะขาดน้ําซึ่งพบไดในผูปวยโรคเบาหวานเนื่องจากมีอาการปสสาวะบอย จึงทําใหความ<br />
เขมขนของระดับ BUN และ Cr ในรางกายสูง ซึ่งสอดคลองกับการศึกษาของ กมลวรรณ พบวา<br />
ระดับ BUN และ Cr มีคาเพิ่มขึ้นอยางมีนัยสําคัญทางสถิติในหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนํา<br />
โดยสเตรปโตโซโตซิน 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ที่ไดรับสารสกัดจากใบหญาหนวดแมวเปนเวลา<br />
14 วัน (กมลวรรณ ศรีปลั่ง. 2546 : 68) และอาจเกิดจากกลไกการออกฤทธิ์ของสเตรปโตโซโตซิน<br />
ซึ่งมีผลทําใหเนื้อเยื่อตับและไตถูกทําลายจึงทําใหระดับ BUN และ Cr เพิ่มขึ้น (Mori, et al. 2003:<br />
183-191) และสวนหนึ่งอาจเกิดจากการออกฤทธิ์ของสารทดสอบที่หนูขาวเบาหวานไดรับในการ<br />
ทดลองครั้งนี้
ขอเสนอแนะ<br />
1. ควรมีการศึกษาองคประกอบและโครงสรางทางเคมี (Chemical composition and<br />
Chemical structure) ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมเพื่อแยกและจําแนกสารที่ออกฤทธิ์ลดระดับ<br />
น้ําตาลในเลือดเพื่อพัฒนาในเชิงพาณิชยตอไป<br />
2. ควรทําการปอนสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมเพิ่มขึ้นจากวันละ 1 ครั้ง หรือเพิ่ม<br />
ปริมาณของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมที่ปอนแกหนูขาวเบาหวาน ซึ่งอาจมีผลลดระดับน้ําตาล<br />
ในเลือดไดเพิ่มขึ้น และเห็นผลเร็วขึ้น<br />
3. การเหนี่ยวนําหนูขาวกลุม 1 (กลุมควบคุม ; ปอนน้ํากลั่น) ใหเปนเบาหวานโดย<br />
ฉีดสเตรปโซโตซิน 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม บริเวณหลอดเลือดดําที่หางของหนูขาวและตรวจวัด<br />
ระดับน้ําตาลในเลือดทุก 3 วันเปนเวลา 1 สัปดาห พบวาระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวนอย<br />
กวา 132 มิลลิกรัม/เดซิลิตร เปนจํานวน 2 ครั้งติดตอกันจํานวน 3 ตัว จึงไดทําการเหนี่ยวนําอีก<br />
ครั้ง และตรวจวัดระดับน้ําตาลในเลือดพบวามากกวา 132 มิลลิกรัม/เดซิลิตร จึงนําหนูขาว<br />
เบาหวานเขาสูการทดลองตอ ซึ่งอาจมีผลทําใหคาระดับน้ําตาลในเลือดของหนูขาวเบาหวานกลุม<br />
1 (กลุมควบคุม ; ปอนน้ํากลั่น) มีคาเฉลี่ยและสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานสูงกวาหนูขาวเบาหวานกลุม<br />
อื่นๆ เพราะฉะนั้นควรคัดเลือกหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดยสเตรปโซโตซิน 50 มิลลิกรัม/<br />
กิโลกรัม เพียงครั้งเดียวและมีคาระดับน้ําตาลในเลือดมากกวา 132 มิลลิกรัม/เดซิลิตร เปนจํานวน<br />
2 ครั้งติดตอกัน เขาทําการทดลอง
บรรณานุกรม<br />
กนกอร ริ้วเหลือง. (2537). อนุกรมวิธานพรรณไม. กรุงเทพฯ : สถาบันราชภัฏจันทรเกษม.<br />
กมลวรรณ ศรีปลั่ง. (2546). ฤทธิ์ลดน้ําตาลในเลือดและผลตอการกระตุนการหลั่งอินสุลินของสาร<br />
สกัดจากใบหญาหนวดแมวในหนูขาวปกติและหนูขาวเบาหวานที่ถูกเหนี่ยวนําโดย<br />
สเตรปโตโซโตซิน. วิทยานิพนธวิทยาศาสตรมหาบัณฑิต สาขาเภสัชวิทยา (สหสาขา)<br />
จุฬาลงกรณมหาวิทยาลัย.<br />
จารุวรรณ สุมมาตย. (2541). องคประกอบทางเคมีและฤทธิ์ของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิมตอเชื้อ<br />
แบคทีเรียที่กอใหเกิดโรคในระบบทางเดินอาหาร. รายงานการวิจัยมหาวิทยาลัย-<br />
มหาสารคาม.<br />
เภสัชศาสตร, คณะ. (2533). กาวไปกับสมุนไพร. กรุงเทพฯ : ศูนยขอมูลสมุนไพร คณะเภสัชศาสตร<br />
มหาวิทยาลัยมหิดล.<br />
มาลี บรรจบ, และสุธิดา ไชยราช. (2541). การศึกษาสรรพคุณลดน้ําตาลในเลือดของพันธุไมไทย.<br />
นนทบุรี : เอส. อาร. พริ้นติ้ง แมสโปรดักส.<br />
วิทยา ศรีมาดา. (2540). โรคตอมไรทอ และเมตาบอลิสม. กรุงเทพฯ : 21 เซ็นจุรี.<br />
วิทยา ศรีมาดา. (2541). การดูแลรักษาผูปวยเบาหวาน. กรุงเทพฯ : ยูนิตี้ พับลิเคชั่น.<br />
วีกูล วีรานุวัตต, และกนกนาถ ชูปญญา. (2520). เคมีคลินิค. กรุงเทพฯ : อมรินทรการพิมพ.<br />
สุเขตร ศรีบุญเรือง. (2548). องคประกอบทางเคมีและการออกฤทธิ์ตานอนุมูลอิสระของน้ํามัน<br />
หอมระเหยและสารสกัดจากใบหนาดใหญและใบสาบแรงกา. วิทยานิพนธวิทยาศาสตร<br />
มหาบัณฑิต มหาวิทยาลัยมหาสารคาม.<br />
สุนทรา หองแซง. (2542). ผลของสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม (Punica granatum Linn. ) ตอการ<br />
ยับยั้งการเจริญของ Shigella บางชนิดซึ่งเปนสาเหตุของโรคบิด. วิทยานิพนธ<br />
ศึกษาศาสตรมหาบัณฑิต มหาวิทยาลัยมหาสารคาม.<br />
สุวรรณา หังสพฤกษ. (2532). สรีรวิทยา 2. (พิมพครั้งที่ 3). กรุงเทพฯ : เรือนแกวการพิมพ.<br />
สุวัฒน วิมลวัฒนาภัณฑ. (2543). ตําราเภสัช เลมที่ 1. (พิมพครั้งที่ 4). กรุงเทพฯ : ภาควิชาเภสัช<br />
ศาสตร คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล มหาวิทยาลัยมหิดล.<br />
อภิชาติ วิชญาณรัตน, สาธิต วรรณแสง, และวรรณี นิธิยานันท. (2527). Endocrinology<br />
ทางอายุรศาสตร. (พิมพครั้งที่ 6). กรุงเทพฯ : เรือนแกวการพิมพ.
อภิชาติ วิชญาณรัตน, กอบชัย พัววิไล, วรรณี นิธิยานันท, และสาธิต วรรณแสง. (2546)<br />
ตําราโรคเบาหวาน. กรุงเทพฯ : เรือนแกวการพิมพ.<br />
อธิกา จารุโชติกมล. (2543). ฤทธิ์ตานออกซิแดนซของผักแพว. วิทยานิพนธวิทยาศาสตร<br />
มหาบัณฑิต มหาวิทยาลัยขอนแกน.<br />
Beck-Nielsen, H., Hother-Neilsen, O., & Pedersen, O. (1998, October). Mechanism of action of<br />
Sulfonylureas with special reference to the extrapancreatic effect : an overview.<br />
Diabetic Med, 5, 613-620.<br />
Chen, H. S. (2002). A Comparison of fructosamine and HbA 1C for home self-monitoring<br />
Blood glucose levels in type 2 diabetes. Zhonghua Yi Xue Za Zhi (Taipei),<br />
65, 151-155..<br />
Das, A.K. (2001, November). Studies on the hypoglycemic activity of Punica granatum Seed in<br />
Streptozotocin induced diabetic rats. Phytother Res, 15(7), 628-9.<br />
Federic, M. (2001). High glucose caused Apoptosis in cultured human pancreatics<br />
Islets of langerhans : A potential role for regulation of specific Bcl family gene<br />
toward an apoptotic cell death pogram. Diabetes, 50, 1290-301.<br />
Herr, R. R., Jahnke, J. K., & Argoudelis, A. D. (1967, Augus). The Structure of Streptozotocin.<br />
J. Am. Chem. Soc, 87, 4808-4809.<br />
Hertzel, C. G. (2001). Evidence-Based Diabetes Care. Ontario : Decker Inc.<br />
Jafri, M. A. (2000). Effect of punica granatum Linn. (Flowers) blood glucose level in<br />
Normal and alloxan-induced diabetic rats. Journal of Ethnopharmacology,<br />
70, 309-314.<br />
James, G. F., Lynn, C. A., Franklin, M. L., & Fred, W. Q. (2002). Laboratory animal medicine.<br />
(2nd ed). USA : Elsevier Science.<br />
Michael, T. M. (1995). Endocrine Secrets. Singapore : Hanley & Belfus Inc.<br />
Murthy, K.N. (2004). Study on wound healing activity of Punica granatum Peels. Journal<br />
of Med Food, 7, 256-9.<br />
Ragavan, B. & Krishnakumari, S. (2006). Antidiabetic effect of T. Arjura bark extract in<br />
alloxan induced diabetic rats. Journal of Clinical Biochemistry, 21(2),<br />
123-128.
Reginald, H., David, E., & Raymond, G. (1979). A Colour Atlas of Endocrinology.<br />
Holland : Wolfe Medical Publications Ltd.<br />
Richard, M. C. (1995). Diabetes. New York : Nestec & Raven Press Ltd.<br />
Vidal, A. (2003). Studies on the toxicity of Punica granatum L. (Punicaceae) Whole Fruit<br />
Extracts. Journal of Ethnopharmacol, 89, 295-300.
ภาคผนวก
ภาคผนวก ก
การเตรียม Citrate buffer pH 4.5<br />
โดยเตรียม 10 มิลลิลิตร ประกอบดวย 0.1 M Citric acid 4.5 มิลลิลิตร และ 0.1 M Trisodium<br />
citrate 5.5 มิลลิลิตร การเตรียม 0.1 M Citric acid 100 มิลลิลิตร โดยชั่งสาร Citric acid<br />
(MW 210.14) 2.1014 กรัม ละลายในน้ํากลั่น 100 มิลลิลิตร และเตรียม 0.1 M Tri-sodium<br />
citrate 100 มิลลิลิตร โดยชั่งสาร Tri-sodium citrate (MW 294.1) 2.941 กรัม ละลายในน้ํากลั่น<br />
100 มิลลิลิตร หลังจากนั้นปเปต 0.1 M Citric acid 4.5 มิลลิลิตร และปเปต 0.1 M Tri-sodium<br />
citrate 5.5 มิลลิลิตร ในบีกเกอรและทําการตรวจวัดคา pH ถา pH4.5 หยด Citric acid ลงจน pH 4.5<br />
การเตรียม Streptozotocin (STZ)<br />
การเตรียม Streptozotocin (STZ) เพื่อฉีดเหนี่ยวนําหนูขาวใหเปนเบาหวาน โดยใช<br />
STZ ขนาด 50 มิลลิกรัม/กิโลกรัม เตรียมใน Citrate buffer pH 4.5 โดยใช STZ 0.050 กรัม<br />
ละลายใน Citrate buffer pH 4.5 1 มิลลิลิตร โดยฉีดเขาหลอดเลือดดําบริเวณหางของหนูขาว<br />
ขนาด 0.1 มิลลิลิตร ตอน้ําหนักหนู 100 กรัม ภายใน 30 นาที<br />
การเตรียมสารสกัดจากเปลือกผลทับทิม<br />
นํา Crude ทับทิมที่สกัดได 14.6632 กรัม ละลายในน้ํากลั่น 20 มิลลิลิตร ใชแทง<br />
แกวคนใหละลายเขากันเพื่อปอนแกหนูขาวเบาหวานขนาด 200 400 และ 600 มิลลิกรัม/กิโลกรัม<br />
การเตรียม Glibenclamide<br />
นํา Glibenclamide 5 มิลลิกรัม มาบดใหละเอียดละลายในน้ํากลั่น 3 มิลลิลิตร ใช<br />
แทงแกวคนใหละลายเขากันเพื่อปอนแกหนูขาวเบาหวานขนาด 5 มิลลิกรัม/กิโลกรัม
ภาคผนวก ข
ตารางผนวกที่ ข -1 Clinical Chemistry Reference Ranges for Adult Spraque<br />
Dawley Rats<br />
Analyte Units Male Female<br />
Glucose mg/dl 115±16.9 111±17.2<br />
Blood urea nitrogen mg/dl 19±2.2 21±3.4<br />
Creatinine mg/dl 0.70±0.11 0.70±0.13<br />
Asparate<br />
aminotransferase<br />
Alanine<br />
aminotransferase<br />
U/L 95±31.7 99±54.5<br />
U/L 49±24.1 69±44.9<br />
ที่มา : Jame, G. F.2002 : 128
ภาคผนวก ค
ภาพผนวกที่ ค-1 ทับทิมที่ใชในการศึกษา
ภาพผนวกที่ ค-2 หนูขาว Spraque Dawley ที่ใชในการศึกษา
ภาคผนวก ง
ประวัติผูวิจัย<br />
ชื่อ-สกุล นางสาวสุมิตรา เมืองขวา<br />
เกิดวันที่ 5 กรกฏาคม 2521<br />
สถานที่เกิด อําเภอเลิงนกทา จังหวัดยโสธร<br />
ที่อยู 681 วิทยาลัยแพทยศาสตรกรุงเทพมหานครและวชิรพยาบาล ถนนสามเสน<br />
แขวงวชิรพยาบาล เขตดุสิต กรุงเทพมหานคร 10300<br />
ตําแหนง พยาบาลวิชาชีพ 5<br />
สถานที่ทํางาน วิทยาลัยแพทยศาสตรกรุงเทพมหานครและวชิรพยาบาล ถนนสามเสน<br />
แขวงวชิรพยาบาล เขตดุสิต กรุงเทพมหานคร 10300<br />
ประวัติการศึกษา<br />
พ.ศ. 2538 มัธยมศึกษาตอนปลาย โรงเรียนเบ็ญจะมะมหาราช อําเภอเมือง<br />
จังหวัดอุบลราชธานี<br />
พ.ศ. 2542 พยาบาลศาสตรบัณฑิต วิทยาลัยพยาบาลเกื้อการุณย<br />
กรุงเทพมหานคร<br />
พ.ศ. 2550 วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต มหาวิทยาลัยราชภัฏพระนคร กรุงเทพมหานคร