laboratoriniai darbai - Biochemijos ir biofizikos katedra - Vilniaus ...

1. 3. Saugaus Tirpalø pH. darbo Buferiniai biochemijos tirpalai laboratorijoje _____________________________________________________
pagrindinës taisyklës ________________________ 31
9. Nustatykite deðimt kartø atskiestø tirpalø, kuriø pH 6,8 ir 5,8 buferinæ talpà
pagal rûgðtá ir ðarmà.
10. Palyginkite nustatytà buferinës talpos reikðmæ pH = pK = 6,8 su teoriðkai
apskaièiuota atsiþvelgiant á (4).
11. Paruoðkite 100 ml 0,05 M fosfatiná buferá, kurio pH bûtø 6,8, antruoju bûdu,
t. y. titruodami KH 2 PO 4 tirpalà 0,1N KOH iki reikiamo pH:
• apskaièiuokite, koks kiekis KH 2 PO 4 turi bûti pasvertas, norint paruoðti 0,05M
tirpalà;
• iðtirpinkite druskà maþame tûryje vandens (≅60ml);
• maþomis porcijomis pridëdami 0,1 N KOH, pasiekite, kad tirpalo pH bûtø
6,8
• tirpalo tûrá menzûroje papildykite iki 100 ml.
Kontroliniai klausimai :
1. Buferiniai tirpalai. Hendersono ir Haselbacho lygtis buferiniams tirpalams, á
kuriø sudëtá áeina silpna rûgðtis ir tirpalams, á kuriø sudëtá áeina silpna bazë.
2. Tarp daugybës buferiniø sistemø, kurios dalyvauja palaikant vidulàsteliniø
organizmo skysèiø pastovø pH [6,8; 7,8], labai svarbios yra HCO 3 – –H2 CO 3
(pK a =8,3) ir HPO 4 2– – H2 PO 4 – (pKa =6,8) sistemos. Paraðykite lygtis, kaip ðiø
buferiniø sistemø sudedamosios dalys reaguoja su rûgðtimis ir bazëmis.
3. Kokios aminorûgðtys pasiþymi buferinëmis savybëmis fiziologinëse (t. y. pH
[6,8; 7,8]), sàlygose?
4. Glicino α-COOH grupës pK a =2,34, NH 2 – grupës pK a = 9,60. Nubrëþkite
glicino titravimo kreivæ. Kuriais pH intervalais glicino tirpalas turi buferiniø
savybiø? Koks glicino pI?
5. Tribazës fosforo rûgðties pKa reikðmës yra 2,2; 7,2; 12,3. Paraðykite kokios
formos H 3 PO 4 molekulë bus pH 0, pH 4, pH 9 ir pH14. Koks tirpalo, sudaryto
ið 0,1 M NaH 2 PO 4 ir Na 2 HPO 4 pH?
Literatûra:
1. Rilbe H.(1996) pH and Buffer Theory – a new Approach, Wiley, New York.
2. Reed R., Holmes D., Weyers J., Jones A. (2003) Practical skills in Biomolecular
sciences, Pearson Educated Limited.