laboratoriniai darbai - Biochemijos ir biofizikos katedra - Vilniaus ...

Recommendations

Info

1. 4. Saugaus Audiniø ir darbo làsteliø biochemijos ardymas ir laboratorijoje frakcionavimas pagrindinës __________________________________________ taisyklës ________________________ 41 4.5.1. Diferencinis centrifugavimas 4.9 pav. Nenustatyto kampo (swing-arm) rotorius Dalelës frakcionuojamos, atsiþvelgiant á dydá ir tanká. Keièiant centrifugos apsisukimø skaièiø, rotoriaus spindulá, terpës tanká, galima iðskirti atskiras làstelës organeles. 4.10 pav. Diferencinio centrifugavimo bûdu galima frakcionuoti làstelës organeles
42 _________________________________ BIOCHEMIJOS LABORATORINIAI DARBAI 4.5.2. Centrifugavimas tankio gradientu Suspendavimo terpës klampumas lemia dalelës sedimentavimo greitá (4.6 pav.). Gradientas formuojamas ið CsCl, sacharozës, Ficol, Percol ir kitø medþiagø. Gradientà formuojanèios medþiagos tankis turi bûti maþesnis uþ sedimentuojanèiø daleliø tanká. Gradientas gali bûti tolygus arba laiptinis. Tolygus gradientas savaime susidaro, centrifuguojant klampø tirpalà arba specialiai supylant komponentus. Maþiausias tirpalo tankis mëgintuvëlio virðuje, didþiausias – mëginys centrifugavmas lëtai sedimentuojanti greitai sedimentuojanti 4.11. Centrifugavimas tankio gradientu mëgintuvëlio dugne. Laiptinis gradientas sudaromas atsargiai vienas ant kito uþlaðinant skirtingo tankio tirpalus. Kartais taikoma vieno laiptelio tankio uþtvara vienos rûðies dalelëms atskirti. Centrifuguojant tankio gradientu gauname atskiras zonas (4.11 pav.). Zoninis centrifûgavimas. Centrifuguojama daþniausiai maþu (5–20 %) sacharozës ar CsCl tankio gradientu. Mëginys atsargiai uþlaðinamas ant suformuoto gradiento. Vienodo dydþio ir formos dalelës po centrifugavimo sudaro zonà, jos sustoja, kai yra pusiausviros su terpe. Po centrifugavimo susidaro daug juostø, turinèiø skirtingos masës ir dydþio daleles. Po centrifugavimo mëgintuvëlio dugnas praduriamas ir atsargiai surenkamos frakcijos. Vienodo tankio (izopikninis) centrifugavimas. Centrifuguojama dideliame sacharozës arba CsCl tankio gradiente (20–70 %). Frakcionuojama atsiþvelgiant á dalelës tanká (daleliø masë ir forma atskyrimui neturi átakos). Mëginys atsargiai uþlaðinamas ant suformuoto gradiento. To paties tankio (buoyant density) dalelës po centrifugavimo sudaro zonà, dalelës „sustoja“, kai yra pusiausviros su gradientu. Po centrifugavimo susidaro daug juostø, turinèiø skirtingo tankio daleliø. Po centrifugavimo mëgintuvëlio dugnas praduriamas ir atsargiai surenkamos frakcijos. Centrifuginiai mëgintuvëliai Centrifuguojant frakcionuojama medþiaga bûna suspenduota centrifuginiuose mëgintuveliuose. Labai svarbios centrifuginiø mëgintuvëliø savybës – mëgintuvëliø talpa ir medþiaga, ið kurios pagaminti mëgintuvëliai. Mëgintuvëliø talpa lemia didþiausià tirpalo tûrá, kurá galima mëgintuvëliuose centrifuguoti. Medþiaga, ið kurios pagaminti mëgintuvëliai, riboja centrifugavimo greitá ir taip pat centrifuguojamos medþiagos cheminæ sudëtá. Yra keletas taisykliø, kurias þinant garantuojamas saugus darbas.
Page 1 and 2: VILNIAUS UNIVERSITETAS BIOCHEMIJOS
Page 3 and 4: 4 _________________________________
Page 5 and 6: 6 _________________________________
Page 7 and 8: 8 _________________________________
Page 9 and 10: 10 ________________________________
Page 11 and 12: 12 ________________________________
Page 13 and 14: 14 ________________________________
Page 15 and 16: 16 ________________________________
Page 17 and 18: 18 ________________________________
Page 19 and 20: 20 ________________________________
Page 21 and 22: 22 ________________________________
Page 23 and 24: 24 ________________________________
Page 25 and 26: 26 ________________________________
Page 27 and 28: 28 ________________________________
Page 29 and 30: 30 ________________________________
Page 31 and 32: 32 ________________________________
Page 33 and 34: 34 ________________________________
Page 35 and 36: 36 ________________________________
Page 37 and 38: 38 ________________________________
Page 39: 40 ________________________________
Page 43 and 44: 44 ________________________________
Page 45 and 46: 46 ________________________________
Page 47 and 48: 48 ________________________________
Page 49 and 50: 50 ________________________________
Page 51 and 52: 52 ________________________________
Page 53 and 54: 54 ________________________________
Page 55 and 56: 56 ________________________________
Page 57 and 58: 58 ________________________________
Page 59 and 60: 60 ________________________________
Page 61 and 62: 62 ________________________________
Page 63 and 64: 64 ________________________________
Page 65 and 66: 66 ________________________________
Page 67 and 68: 68 ________________________________
Page 69 and 70: 70 ________________________________
Page 71 and 72: 72 ________________________________
Page 73 and 74: 74 ________________________________
Page 75 and 76: 76 ________________________________
Page 77 and 78: 78 ________________________________
Page 79 and 80: 80 ________________________________
Page 81 and 82: 82 ________________________________
Page 83 and 84: 84 ________________________________
Page 85 and 86: 86 ________________________________
Page 87 and 88: 88 ________________________________
Page 89 and 90: 90 ________________________________
Page 91 and 92:
92 ________________________________
Page 93 and 94:
94 ________________________________
Page 95 and 96:
96 ________________________________
Page 97 and 98:
98 ________________________________
Page 99 and 100:
100 _______________________________
Page 101 and 102:
102 _______________________________
Page 103 and 104:
104 _______________________________
Page 105 and 106:
106 _______________________________
Page 107 and 108:
108 _______________________________
Page 109 and 110:
110 _______________________________
Page 111 and 112:
112 _______________________________
Page 113 and 114:
114 _______________________________
Page 115 and 116:
116 _______________________________
Page 117 and 118:
118 _______________________________
Page 119 and 120:
120 _______________________________
Page 121 and 122:
122 _______________________________
Page 123 and 124:
124 _______________________________
Page 125 and 126:
126 _______________________________
Page 127 and 128:
128 _______________________________
Page 129 and 130:
130 _______________________________
Page 131 and 132:
132 _______________________________
Page 133 and 134:
134 _______________________________
Page 135 and 136:
136 _______________________________
Page 137 and 138:
138 _______________________________
Page 139 and 140:
140 _______________________________
Page 141 and 142:
142 _______________________________
Page 143 and 144:
144 _______________________________
Page 145 and 146:
146 _______________________________
Page 147 and 148:
148 _______________________________
Page 149 and 150:
150 _______________________________
Page 151 and 152:
152 _______________________________
Page 153:
154 _______________________________
show all

laboratoriniai darbai - Biochemijos ir biofizikos katedra - Vilniaus ...

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?