Manuel Francisco da Costa Vitor - Estudo Geral - Universidade de ...

3. Resultados
píxeis desta zona (≈ píxel 40) apresentam valores claramente superiores aos
píxeis finais (≈ píxel 128). Este comportamento é devido ao facto de a
substância estar mais concentrada no fundo do tubo de ensaio, zona essa que
é captada pelos fotodíodos iniciais do array de fotodíodos do sensor.
Os testes realizados com Conventional right-angle, apresentam
características diferentes uma vez que o sistema recolhe a fluorescência
emitida principalmente pela parte central onde incidiu o feixe de excitação. Para
concentrações inferiores a 1x10 -3 g/ml a luz é apenas ligeiramente atenuada
através do tubo de ensaio ou cuvette. Uma vez que para o estudo que se fez
apenas se utilizaram concentrações até 500ng/ml o efeito de atenuação
praticamente não se faz sentir. [10]
Quando se usa este ângulo de lâmpada de fenda (90º), pode existe um
efeito de filtro interno (auto-absorção), ou seja, substâncias presentes na
solução podem absorver luz do mesmo comprimento de onda que a
fluoresceína, diminuindo a intensidade da fluorescência a captar pelo detector
[11]. Uma vez que a substância usada é água destilada este efeito não é
perturbador.
Uma vantagem deste ângulo de iluminação é o facto de ao se optar pelo
uso de uma cuvette quadrada, as arestas não perturbarem a curva de
aquisição. Sendo assim, usa-se preferencialmente a cuvette, uma vez que no
suporte para fixação da amostra é mais fácil encontrar uma posição estável e
repetível para a cuvette, cuja base é uma superfície plana, relativamente ao
tubo de ensaio que tem uma base curva (semi-esférica).
O gráfico seguinte mostra uma aquisição feita nestas condições.
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