Patologia do Trato Genital Inferior - MEAC

Métodos mais freqüentemente empregados em diagnóstico
complementar de patologia do trato genital inferior
Exame de conteúdo vaginal direto ou à fresco (Exame em tempo real).
» Indicado para estudo de quadros inflamatórios vaginais para diagnóstico
de patógenos tais como:
• Trichomonas vaginalis: aparece como estrutura piriforme móvel.
• Cândida sp: é identificada nas formas de blastoconídios (estruturas
ovaladas e que se apresentam aderidas a outras menores, diz-se
gemulando), pseudo-hifas (em “bambu” isoladas) e pseudomicélios
(em “bambu” ramificadas). Sua visualização é enaltecida com o uso de
hidróxido de potássio a 10 % (KOH a 10%).
• Mobiluncus sp: aparece como um pequeno bacilo móvel, com
movimento característico em turbilhão sobre seu próprio eixo e que
dá a impressão de penetração na célula escamosa ao se aderir a ela,
onde mantém um movimento “parkinsoniano”, formando a “comma
cell”, célula cabeluda ou célula porco espinho.
• Gardnerella vaginalis: identificação de células indicadoras, células
chave ou “clue cells”, que nada mais são do que células escamosas
com citoplasma preenchido por cocobacilos.
» Colheita do material:
• Deve ser feita em parede vaginal.
CAPÍTULO 13
PATOLOGIA DO TRATOGENITAL INFERIOR:
MÉTODOS COMPLEMENTARES
DE DIAGNÓSTICO
José Eleutério Junior
Francisco das Chagas Medeiros
Raquel Autran Coelho
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Protocolos de Conduta
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» Preparo e leitura:
• O material colhido pode ser colocado de imediato na lâmina ou pode
ser colocado em frasco com pequena quantidade de solução salina
(cerca de 1 a 2 ml).
• Se colocado em lâmina de adicionam duas gotas de solução salina
ou de KOH a 10 % e coloca lamínula sobre a lâmina para leitura em
microscópio óptico com aumentos de 100 e 400 vezes.
• Se diluído no frasco com salina, retirar duas a três gotas da solução
e colocar sobre lâmina cobrindo-a com lamínula para leitura em
microscópio óptico com aumentos de 100 e 400 vezes.
• No microscópio óptico é interessante que se feche parcialmente
o diafragma para que se consiga um melhor contraste entre as
estruturas.
pH vaginal
» Seu auxílio é para diagnóstico de condições como vaginoses bacteriana
e citolítica e candidíase.
» Com um papel de nitrazina colocado em contato com conteúdo e/ou
paredes vaginais se identifica o pH.
Teste do KOH a 10% (Whiff test)
» Colhe-se material da vagina que é posto em uma lâmina. A adição de
hidróxido de potássio alcaliniza o conteúdo vaginal e isto permite que
determinadas substâncias volatilizem e levem a odores característicos,
como é o caso de aminas liberadas por bactérias anaeróbias na vaginose
bacteriana. Assim, considera-se o teste positivo.
Estudo de microbiota por coloração de Gram
» Por ser um método para estudo microbiológico, o sítio de colheita
depende do patógeno que se quer pesquisar:
Patógeno Sítio
Gonococo Endocérvice
Uretra
Gardnerella vaginalis / Mobiluncus sp
Vagina
(vaginose bacteriana)
Candida sp Vagina
» Uma vez colhido o material a ser examinado, este deve ser espalhado
em forma de uma camada fina e em movimentos circular no centro

da lâmina e deixado secar ao ar para ser submetido no laboratório à
coloração de Gram.
» Alguns serviços usam o escore de Nugent.
Estudo citopatológico por coloração de Papanicolaou
» Este é um método de identificação de lesões precursoras e neoplásicas
do colo de útero. Sobre seu laudo e interpretação há um capítulo
específico.
Um bom exame de Papanicolaou começa por um colheita adequada.
Daí a grande responsabilidade do profissional que faz este procedimento
Um bom exame de Papanicolaou começa por uma colheita adequada. Daí
a grande responsabilidade do profissional que faz este procedimento. A noção de
que as alterações no colo do útero ocorrem na JEC implicam na necessidade da
amostragem desta região.
» A colheita de material pode ser em um único sítio (ectocérvice), em
dois sítios (ectocérvice e endocérvice) ou em três sítios (fundo de saco
posterior, ectocérvice e endocérvice).
» Em mulheres pós menopausadas e não usuárias de terapia hormonal a
JEC freqüentemente está na endocérvice. Assim, nestas circunstâncias,
o uso de escovinha para colheita endocervical é obrigatória.
» Métodos:
• Convencional: Uma vez colhido o material a ser estudado, este deve
ser espalhado de maneira homogênia e mais fina possível sobre uma
lâmina limpa de ponta fosca devidamente identificada. Em seguida,
de imediato, esta lâmina deve ser fixada, colocada em frasco com
álcool a 95% ou através de spray fixador, no qual é aplicado jato
com uma distância de cerca de 15 a 20 cm e em pequena quantidade
para que o excesso de fixador não prejudique a leitura por causa de
artefatos que não poderão ser retirados no laboratório.
• Citologia em meio líquido:
▪ Técnicas:
- Thin prep (Cytic ®)
- SurePath(BD ®)
▪ Qualquer que seja a técnica específica, os sítios de colheita não
diferem e a necessidade de amostragem da JEC se mantém.
▪ O material colhido é colocado em um meio de transporte, devidamente
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Protocolos de Conduta
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identificado, e apenas no laboratório é que lâminas serão confeccionadas
e fixadas.
▪ Considera-se que teria as seguintes vantagens:
- Maior sensibilidade para detecção de lesões intra- epiteliais
escamosas.
- Possibilidade de uso de material residual para novas lâminas e
para testes de biologia molecular, como como pesquisa de HPV.
• Desvantagens:
- Necessidade de treinamento de pessoal.
- Menor sensibilidade na detecção de alguns patógenos
Cultura
» Culturas específicas podem ajudar na identificação de determinadas
espécies. Algumas culturas são relativamente mais fáceis podendo
ser utilizadas no dia a dia. Tais como a cultura de Thayer-Martin para
gonococo ou da Sabouraud para fungos.
» A colheita do material deve direcionada ao sítio de preferência do
patógeno a ser pesquisado e o material deve ser acondicionado em
meio de transporte específico. Caso não haja esta disponibilidade a
colheita deverá ser feita no próprio laboratório.
Biologia molecular
» Métodos que se utilizam de reações para pesquisa de material genético
específico do microorganismo pesquisado.
» Opções: PCR e captura de híbridos
Histopatológico
» O diagnóstico histopatológico é o marco dentro do diagnóstico de
lesões do trato genital inferior que pode comprovar uma suposição
diagnóstica.
» A importância de se ter uma localização precisa para o melhor sítio de
biopsia é capital.
» O manuseio do material antes, durante e após o procedimento da
biópsia é essencial. Não se pode esperar que o patologista seja um
mágico que vai corrigir todos os erros cometidos antes de lhes chegar
às mãos o material a ser estudado.

Regras para um bom manuseio de material de biopsia
• Identificar adequadamente o sítio a ser biopsiado.
• Proceder a biópsia conforme a experiência e respeitando a técnica do
métodoempregado (saca-bocado, cirurgia de alta freqüência, cone a frio,
pinça e tesoura).
• Evitar escassez de material, que pode comprometer a avaliação histopatológica.
É essencial haver estroma para identificação de eventual invasão.
• Acondicionar o material de biópsia em uma quantidade adequada de formalina
a 10 % (10 vezes o volume da peça).
• Certificar-se de que pequenas biópsias não fiquem aderidas a tampa do
frasco, mas sim imersas no formol a 10%.
• Identificar corretamente o frasco e enviar dados clínicos mínimos para
adequada correlação histopatológica.
Imunohistoquímica
» Métodos imunohistoquímicos consistem do uso de anticorpos
identificadores de elementos associados a determinadas lesões
e que podem ser reveladas por reação específica em tecidos
(imunohistoquímica) e células (imunocitoquímica).
» Substâncias elaboradas por células alteradas são o foco desta
metodologia que identificaria, por exemplo, lesões com maior
potencial evolutivo podendo traduzir prognóstico através dos
chamados marcadores tumorais.
» Alguns estudos já foram realizados com MIB-1, P53 e, mais recentemente
p16. O último tem se mostrado mais útil no reconhecimento de lesões
escamosas de alto grau.
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