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Bioinformática e Biodiversidade: - Instituto Capixaba de Pesquisa ...

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MARCA<br />

S<br />

<strong>Bioinformática</strong> e <strong>Biodiversida<strong>de</strong></strong>:<br />

dos conceitos à aplicação na elucidação da estrutura da biota do<br />

solo<br />

José Roberto <strong>de</strong> Assis Ribeiro<br />

Guarapari — ES<br />

Setembro / 2010


Métodos <strong>de</strong> <strong>Bioinformática</strong> aplicados à<br />

elucidação da estrutura das comunida<strong>de</strong>s<br />

biológicas do solo


<strong>Bioinformática</strong> e <strong>Biodiversida<strong>de</strong></strong>:<br />

dos conceitos à aplicação na elucidação da estrutura da<br />

biota do solo<br />

1 – Introdução – Conceitos<br />

2 – Tecnologia:<br />

2.1 geração <strong>de</strong> dados: sequenciamento genomena,<br />

metagenoma, phylochip, microarray …<br />

2.2 Os dados - bancos <strong>de</strong> dados – ferramentas para<br />

enten<strong>de</strong>r os resultados<br />

3 - Estudos <strong>de</strong> caso 1-4 Conhecimento adquirido<br />

4 – Conclusão – Einstein falou informação não é<br />

conhecimento.


<strong>Bioinformática</strong><br />

•<br />

Biologia<br />

•<br />

Estudo dos seres vivos<br />

•<br />

Informática<br />

•<br />

Informação + automática<br />

ou matemática<br />

•<br />

Adquirir e trabalhar a<br />

informação <strong>de</strong> forma<br />

automática


Definições<br />

•<br />

<strong>Bioinformática</strong> – dados <strong>de</strong> Biologia Molecular, Genômica<br />

•<br />

<strong>Bioinformática</strong> – ciência que utiliza técnicas <strong>de</strong> informática para<br />

aquisição, gerenciamento, análise, etc, <strong>de</strong> dados (informação)<br />

<strong>de</strong> áreas da Biologia.<br />

•<br />

<strong>Pesquisa</strong>, <strong>de</strong>senvolvimento ou aplicação <strong>de</strong> ferramentas e<br />

abordagens computacionais para o tratamento <strong>de</strong> dados<br />

biológicos, incluindo aquisição, armazenamento, organização,<br />

arquivamento, análise e visualização <strong>de</strong> tais dados. (NIH –<br />

National Institute of Health).


Imuno-informática<br />

neuroinformática<br />

Análise <strong>de</strong><br />

imagens<br />

<strong>Bioinformática</strong><br />

informática em<br />

BioMol<br />

filoinformática<br />

Etc-informática


•<br />

Une biologia, ciência da computação e tecnologia da informação em uma única disciplina.<br />

Existem três importantes disciplinas na bioinformática:<br />

•<br />

1 – Desenvolvimento <strong>de</strong> novos algoritmos para acessar relações entre membros <strong>de</strong><br />

gran<strong>de</strong>s conjuntos <strong>de</strong> dados.<br />

•<br />

2 – Análise e interpretação <strong>de</strong> vários tipos <strong>de</strong> dados, incluindo seqüências nucleotídicas e<br />

<strong>de</strong> aminoácidos, domínios e estruturas <strong>de</strong> proteínas.<br />

•<br />

3 – Desenvolvimento e implementação <strong>de</strong> ferramentas que permitam o acesso eficiente e o<br />

gerenciamento <strong>de</strong> diferentes tipos <strong>de</strong> informação.


Porque utilizar a <strong>Bioinformática</strong> para estudar a<br />

<strong>Biodiversida<strong>de</strong></strong>?


<strong>Biodiversida<strong>de</strong></strong>


D<br />

e<br />

<strong>Biodiversida<strong>de</strong></strong><br />

e<br />

s<br />

p<br />

é<br />

c<br />

i<br />

e<br />

s<br />

-


comunida<strong>de</strong><br />

<strong>Biodiversida<strong>de</strong></strong><br />

espécies<br />

intraespecífica<br />

Funcional : genes, espécies,<br />

populações e comunida<strong>de</strong>s


Convenção da <strong>Biodiversida<strong>de</strong></strong> ECO-92<br />

Total (archea,<br />

eucaria, bacteria)<br />

No. espécies<br />

<strong>de</strong>scritas (M)<br />

No. espécies<br />

estimadas (M)<br />

1,8 5 a 100<br />

16-17mil espécies/ano, Déficit Taxonômico!!!


Conceito <strong>de</strong> espécie<br />

•<br />

Morfoespécie ou conceito tipológico – semelhança morfológica<br />

•<br />

Genoespécie – semelhança genética<br />

•<br />

Conceito biológico <strong>de</strong> espécie – barreira sexual


Porque tão diverso?<br />

•<br />

Ambiente é diverso;<br />

•<br />

Inter<strong>de</strong>pendência das espécies;<br />

•<br />

Competição;


“Antes se achava que a Biologia era complexa<br />

<strong>de</strong>mais para aplicar Matemática. Agora pensamos<br />

que ela é complexa <strong>de</strong>mais para NÃO usar”


C<br />

o<br />

m<br />

o<br />

g<br />

e<br />

r<br />

e<br />

n<br />

c<br />

i<br />

a<br />

•<br />

v. 289, n. 5488, 2000.


Tsai & Caldas (Cena – USP)


GM<br />

ei<br />

nc<br />

or<br />

mo<br />

ab<br />

i<br />

Ho<br />

um<br />

ma<br />

a<br />

nH<br />

ou<br />

m<br />

Metagenômica<br />

Metagenômica do Solo - ??????? genes


DDBJ Bank – Japão<br />

http://www.ddbj.nig.ac.jp/in<strong>de</strong>x-e.html<br />

GenBank NCBI – EUA<br />

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gui<strong>de</strong>/<br />

EMBL Bank – europeu<br />

http://www.ebi.ac.uk/embl/


RDP<br />

http://rdp.cme.msu.edu/<br />

Projeto Arb - Silva<br />

http://www.arb-home.<strong>de</strong>/<br />

http://www.arb-silva.<strong>de</strong>/<br />

Green Genes<br />

http://greengenes.lbl.gov


BIOIONFORMÁTICA como uma ferramenta<br />

http://molbiol-tools.ca/molecular_biology_freeware.htm<br />

Clique para editar o estilo do subtítulo mestre


5<br />

0<br />

-<br />

6<br />

0<br />

%<br />

Desenho <strong>de</strong> Iniciadores (Primers)<br />

C<br />

G<br />

T<br />

e<br />

m<br />

p<br />

.<br />

d<br />

e


Código <strong>de</strong> nucleotí<strong>de</strong>o - IUB


T<br />

a<br />

x<br />

a<br />

Como escolher um gene ou uma<br />

região <strong>de</strong> um gene?<br />

d<br />

e<br />

e<br />

v<br />

o<br />

l<br />

u<br />

ç


Seqüências não alinhadas <strong>de</strong><br />

16s RNA


Região conservada<br />

16s RNA


Região variável<br />

rrn


Arrays<br />

Phylochip


Estudos <strong>de</strong> caso<br />

Diversida<strong>de</strong> e Ecofisiologia <strong>de</strong><br />

Leveduras em Plantio<br />

Orgânico<br />

<strong>de</strong> Cana-<strong>de</strong>-Açúcar<br />

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO<br />

INSTITUTO DE AGRONOMIA<br />

CURSO DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA - CIÊNCIA DO<br />

SOLO


Basi<strong>de</strong>omiceto<br />

Ascomiceto<br />

Análise filogenética, gene LSU região D1-D2, método Máxima Parsimônia


A<br />

s<br />

d<br />

i<br />

f<br />

e<br />

r<br />

e<br />

n<br />

t<br />

e<br />

s


Archeae<br />

terra preta <strong>de</strong> índio (TPI) X solo adjacente (ADJ)<br />

UT<br />

Os<br />

obs<br />

erv<br />

ado<br />

s<br />

Taketani & Tsai 2010<br />

Microbial Ecology<br />

Volume 59, Number 4<br />

Clones amostrados


Distribuição dos grupos <strong>de</strong> Archeae em terra preta<br />

<strong>de</strong> índio (TPI) e solo adjacente (ADJ)<br />

Taketani & Tsai 2010<br />

Microbial Ecology<br />

Volume 59, Number 4


System Workflow Overview


Estudo da diversida<strong>de</strong> da comunida<strong>de</strong><br />

bacteriana presente na rizosfera <strong>de</strong> duas<br />

plantas vasculares na Baía do<br />

Almirantado Iha do Rei George, Antártica.<br />

Objetivos:<br />

Variações na estrutura da comunida<strong>de</strong> do solo em<br />

relação a planta e ao tipo <strong>de</strong> solo


Plantas Vasculares<br />

We examined bacterial community compositions for five paired samples (samples collected at the same<br />

coordinates) of two vascular plant rhizosphere from three different sites at Admiralty bay, King George Island,<br />

part of the South Shetlands Archipelago, maritime Antarctica.<br />

Colobanthus quitenses<br />

Deschampsia antarctica


Locais <strong>de</strong> amostragem<br />

EACF<br />

Ipanema Arctowski


Amostragem<br />

Samples Site Cover Plant<br />

IC1 Braziian Station1 -IPANEMA Colobanthus<br />

IC2 Braziian Station1 -IPANEMA Colobanthus<br />

ID1 Braziian Station1 -IPANEMA Deschampsia<br />

ID2 Braziian Station1 -IPANEMA Deschampsia<br />

QC7 Braziian Station2- EACF Colobanthus<br />

QC8 Braziian Station2- EACF Colobanthus<br />

QD7 Braziian Station2- EACF Deschampsia<br />

QD9 Braziian Station2- EACF Deschampsia<br />

AD10 Polish Station Deschampsia<br />

AD11 Polish Station Deschampsia


SSU rRNA Pyrosequencing Results<br />

Microbial diversity in the Antarctic Continent using<br />

pyrosequencing<br />

About 25,000 sequences of DNA fragments i<strong>de</strong>ntified<br />

GS FLX 454<br />

Number of Phylotypes<br />

1200<br />

1000<br />

800<br />

600<br />

400<br />

AD<br />

IC<br />

ID<br />

QC<br />

QD<br />

200<br />

1000 2000 3000 4000 5000<br />

Number of sequences


Rarefaction curves<br />

AD<br />

Number of Phylotypes<br />

2000<br />

1500<br />

1000<br />

500<br />

0<br />

3<br />

5<br />

10<br />

20<br />

Number of Phylotypes<br />

1200<br />

1000<br />

800<br />

600<br />

400<br />

AD<br />

IC<br />

ID<br />

QC<br />

QD<br />

200<br />

1000 2000 3000 4000 5000 6000<br />

Number of sequences<br />

1000 2000 3000 4000 5000<br />

Number of sequences<br />

Curvas <strong>de</strong> rarefação para diferentes níveis<br />

<strong>de</strong> dissimilarida<strong>de</strong> para as bibliotecas <strong>de</strong> 16S<br />

das amostras do ponto A<br />

Curvas <strong>de</strong> rarefação para todas as bibliotecas<br />

para 3% <strong>de</strong> dissimilarida<strong>de</strong>


Pyrosequence library – Phylum distribution<br />

The phylum distribution presents a peculiar pattern.<br />

Firmicutes = the most abundant phyla


Pyrosequence library – Phylum distribution<br />

In a generally way, only minor differences were observed in<br />

bacteria rhizosphere communities in response to different plant<br />

species or sample site


Cluster analyses from DGGE profiles and pyrosequence<br />

data<br />

IC1 000000<br />

IC2 000000<br />

ID1 000000<br />

ID2 000000<br />

QC7 000000<br />

AD10 00000<br />

QC8 000000<br />

AD11 00000<br />

QD9 000000<br />

QD7 000000<br />

Clique para editar o estilo do subtítulo mestre<br />

0.02<br />

Open Symbols represented Colobanthus, and closed Symbols represent Deschampsia<br />

95% Complete linkage clustering, Chao-Sorensen abundance based similarity indices, and UPGMA method<br />

were used.


•<br />

Os filos <strong>de</strong> bactérias presentes são semelhantes aos encontrados em outros solos<br />

(Proteobacteria, Actinobacteria, Acidobacteria, Chloroflexi, Verrucomicrobia,<br />

Bacteroi<strong>de</strong>tes, Planctomycetes, Gemmatimona<strong>de</strong>tes, and Firmicutes) porém apresentam<br />

um padrão peculiar com o filo Firmicutes sendo abundante em todas as amostras.<br />

• Actinobacteria e Proteobacteria possuem algum grau <strong>de</strong> variação entre as amostras<br />

e, com Firmicutes, são os três filos mais abundantes.<br />

•<br />

A Classe Clostridia representa mais <strong>de</strong> 70% das sequencias <strong>de</strong> Firmicutes obtidas, o<br />

que po<strong>de</strong> indicar uma alta frequencia anaeróbica nas amostras.


Complexida<strong>de</strong> do<br />

Solo<br />

Fonte: S. Rose e<br />

E.T. Elliott fao.org


Obrigado.<br />

José Roberto <strong>de</strong> Assis Ribeiro<br />

jose.roberto@gctbio.com.br<br />

+55 (21) 3245 7543<br />

+55 (31) 9268 4600<br />

gctbio@gctbio.com.br

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