6. ZaključciIspitano je djelovanje gliceriltrinitrata (GTN), kao donora NO, na propusnost krvno-moždanebarijere in vivo u šarana (C. carpio L.). Određivanje koncentracije ukupnih nitrata initrita u serumu pokazalo je bifazični obrazac ponašanja sa statistički značajnim povećanjemkoncentracije u odnosu na kontrolne životinje 15 minuta i 1 sat nakon primjene GTN tenajvećim povećanjem koncentracije nakon 6 do 8 sati, što upućuje na endogenu sintezu NOpotaknutu primjenom GTN.Šest sati nakon primjene GTN došlo je do otvaranja krvno-moždane barijere što se vremenskipodudara sa značajnim povećanjem koncentracije serumskih nitrita i nitrata te drži da sute dvije pojavnosti uzročno povezane. Krvno-moždana barijera zatvara se nakon 12 sati odprimjene GTN, što upućuje na reverzibilnost promjene. Propusnost krvno-moždane barijeredokazali smo na temelju istjecanja Evansovog plavila koje veže albumin, a za koji je krvno-moždanabarijera u normalnim uvjetima nepropusna. Otvaranje krvno-moždane barijerevremenski prati nastanak moždanog edema koji smo dokazali metodom mjerenja omjerasuhe i mokre tvari te histološki. Osim histoloških znakova moždanog edema, dokazali smopromjene karakteristične za vazodilataciju, tipično uzrokovanu djelovanjem NO.Naše je istraživanje pokazalo da postoji statistički značajna pozitivna povezanost izmeđukoncentracije ukupnih nitrata i nitrita u serumu šarana i propusnosti krvno-moždane barijerete između koncentracije ukupnih nitrata i nitrita i postojanja moždanog edema.Promatrani u cjelini, naši rezultati podupiru nekoliko pretpostavki. Donor NO može uzrokovatireverzibilno i vremenski predvidljivo povećanje propusnosti krvno-moždane barijere ušarana, vjerojatno tako da potiče sintezu peroksinitrita. Posljedično dolazi do razvoja moždanogedema i vazodilatacije. Slijed navedenih promjena u ovoj nižoj kralježnjačkoj vrstiodgovara sličnim do sada istraženim promjenama koje su utvrđene u sisavaca.55
7. Sažetak na hrvatskom jezikuCilj ovoga istraživanja bio je utvrditi djelovanje dušik (II) oksida (NO) na propusnost krvno-moždanebarijere in vivo u šarana korištenjem gliceriltrinitrata (GTN) kao donora NO.Ustanovili smo i vremenski odredili reverzibilnost procesa povećane propusnosti krvnomoždanebarijere, pratili, opisali i vremenski odredili razvoj moždanog edema te utvrdilisličnost mehanizma povećanja propusnosti krvno-moždane barijere u kojem sudjeluje NOna nižim kralježnjacima u odnosu na do sada istraživane vrste.Pokus je izveden na dvogodišnjoj šaranskoj mlađi (Cyprinus carpio L.) tretiranoj gliceriltrinitratomu dozi od 1 mg/kg tjelesne mase. U serumu životinja u vremenskim je razmacima od15 minuta te 1 sat, 3 sata, 6 sati, 8 sati, 12 sati i 24 sata nakon tretmana određena koncentracijaukupnih nitrita i nitrata komercijalnim test-paketom. U kontrolnoj skupini i u tretiranim skupinamaanalizirana je propusnost krvno-moždane barijere 6 sati, 12 sati i 24 sata nakon primjeneGTN na temelju istjecanja Evans plavila na makroskopskom uzorku mozga i mikroskopskimpreparatima s pomoću fluorescentnog mikroskopa. U vremenskim razmacima od 6 sati i 24sata nakon tretmana gravimetrijskom metodom odredili smo pojavu moždanog edema, kojismo opisali na hemalaun-eozin obojenim preparatima mozga pod svjetlosnim mikroskopom.Ukupna koncentracija nitrata i nitrita pokazala je bifazičan obrazac promjene s najvišimkoncentracijama 15 minuta nakon primjene GTN, srednja vrijednost ± SEM: 188,1 ± 23,82μmol/l te nakon 6 sati (236,4 ± 64,67 μmol/l) i 8 sati (255,2 ± 25,81 μmol/l). Dinamikapromjene koncentracije nitrata odgovara ukupnoj koncentraciji nitrata i nitrita. Najviše suvrijednosti 15 minuta nakon primjene GTN (180,2 ± 25,76 μmol/l) te 6 sati (232,4 ± 63,84μmol/l) i 8 sati nakon primjene (236,9 ± 89,12 μmol/l). Koncentracije nitrita su značajnoniže od koncentracije nitrata, a maksimalne vrijednosti pokazuju nakon 3 sata (14,28 ± 9,63μmol/l) i 8 sati (16,17 ± 5,94 μmol/l) od primjene donora NO, iako se te vrijednosti statističkiznačajno ne razlikuju u odnosu na kontrolnu skupinu.56
- Page 1 and 2:
Središnja medicinska knjižnicaKov
- Page 3:
Doktorska disertacija izrađena je
- Page 6 and 7: Popis kratica i simbolaKBCOBNOEDRFG
- Page 8 and 9: SADRŽAJZahvala 3Popis kratica i si
- Page 10 and 11: 1. UvodEngleski prirodoslovac, istr
- Page 13 and 14: se nalaze mediane brazde. Dorzalna
- Page 15 and 16: Evolucijski put riba razreda zrakop
- Page 17: oja čvrstih spojeva i transcelular
- Page 23 and 24: (127, 128). Povećana aktivnost MMP
- Page 25: 2. Ciljevi i svrha radaKoncept važ
- Page 28: 3. Materijali i metode3.1. Pokusne
- Page 34 and 35: nakon 8 sati. Nema statistički zna
- Page 36 and 37: trolnu skupinu. Skupina kojoj je ko
- Page 38 and 39: Skupina kojoj je koncentracija nitr
- Page 40 and 41: Kontrolna skupina15 minuta nakon pr
- Page 42 and 43: abSlika 8. a. Mozak šarana obojen
- Page 44 and 45: 4.2.2. Rezultati utvrđivanja propu
- Page 46 and 47: **Slika 11. Utvrđivanje moždanog
- Page 48 and 49: Slika 14. Infiltracija mononuklearn
- Page 50 and 51: Statistički neznačajna povezanost
- Page 52 and 53: (175, 176). Metabolizira se u NO un
- Page 54 and 55: Naše istraživanje također pokazu
- Page 58 and 59: Svi dijelovi mozga životinja (pred
- Page 60 and 61: 63.84 μmol/l) and 8 hours (236.9
- Page 62 and 63: 11. Cerda´-Reverter JM, Zanuy S, M
- Page 64 and 65: 42. Stewart PA, Wiley MJ. Developin
- Page 66 and 67: 71. Farquhar MG, Palade GE. Cell ju
- Page 68 and 69: 101. Murphy S. Production of nitric
- Page 70 and 71: 128. Gum R, Wang H, Lengyel E, Juar
- Page 72 and 73: 154. Venturini G, Colasanti M, Fior
- Page 74 and 75: 182. Peter RE, Fryer JN 1983 Endocr
- Page 76: 10. Životopis autoriceMr. sc. Sanj