11520009 Resistens Final Report - Spildevandsinfo.dk

mg/l) og cefuroxim (8 mg/l). De angivne koncentrationer af ciprofloxacin, gentamicin
og cefuroxim er breakpoints, og bakteriekolonier dyrket ved eller over denne
antibiotikakoncentration må anses for at være resistente (EUCAST, 2011).
For bestemmelse af ”suspekte Klebsiella” blev der spredt spildevandsprøve i enkelt
udsæd på blodagar og i dobbelt udsæd på HiCrome TM agar, en selektiv agar for
Klebsiella. For begge typer agar blev der lavet plader uden antibiotika samt plader med
Ciprofloxacin (1 mg/l), Gentamicin (4 mg/l) og Cefuroxim (8 mg/l) tilsat agaren. Alle
lilla-mangenta røde kolonier blev talt som ”suspekte Klebsiella”.
Figur 3-4 Billede af E. coli, coliforme og ikke coliforme bakterier dyrket på Oxoid Brilliance agar. Foto:
DHI.
For at teste for multiresistens blev der udvalgt fem E. coli og Klebsiella fra hver plade
med henholdsvis ciprofloxacin, gentamicin og cefuroxim. De udvalgte kolonier blev
overført til nye agarplader, en plade pr. koloni. Kolonierne blev testet for Ciprofloxacin-,
Gentamicin-, Cefuroxim- og Meropenemresistens ved tabletmetoden. MALDI-
TOF-MS blev brugt til artsbestemmelse. Udvalgte isolater blev ribotypet og E-testet.
For bestemmelse af suspekte Enterokokker blev der spredt prøve i duplikat på Slanezt
agar uden antibiotika samt på agar med Vancomycin (4 mg/l). Der blev testet for
Vancomycinresistens ved tabletmetoden, og artsbestemmelse blev gennemført med
MALDI-TOF-MS. Udvalgte isolater blev ribotypet og E-testet.
For muslingeprøverne blev muslingekødet blendet i et våd vægt:volumen forhold på
1:10. Bakterier blev dyrket i MacConkey bouillon uden antibiotika samt med
henholdsvis Ciprofloxacin (1 mg/l), Gentamicin (4 mg/l) og Cefuroxim (8 mg/l).
Samme procedure blev fulgt for sedimentprøverne.
6
Violet:
E. coli
Pink:
coliform
Blå:
Ej coliform
eller E. coli