Øvelsesvejledninger til laboratoriekursus i Kemi A - VUC Aarhus

VUC Aarhus. Kemi A. Laboratoriekursus.
Risici:
Resorcinol er giftig ved hudkontakt. Derfor anvendes transferpipetter. Anvend også pipettebakker
når pipetten ikke er i brug, og smid pipettespidsen ud i skraldespanden efter endt brug.
Affaldshåndtering:
Kemikalierne indeholdende Seliwanoff's reagens hældes i dunken for organisk affald.
Fremgangsmåde:
1. Fructosestandarderne fremstilles i 6 reagensglas ved at tilsætte 0,2 M fructoseopløsning
og demineraliseret vand således, at den endelige fructosekoncentration er
på henholdsvis 0.0 - 0.005 - 0.01 - 0.02 - 0.03 - 0.05 M, og det endelige volumen er
på 2,0 mL. Anvend eventuelt skemaet nedenunder. I hvert af de 6 reagensglas
afpipetteres 2.0 mL Seliwanoff's reagens med fuldpipette. Stil reagensglas stativet til
side.
Glasnummer V(fructose) V(vand) c(fructose)
1 0,0 M
2 0,005 M
3 0,01 M
4 0,02 M
5 0,03 M
6 0,05 M
2. I 6 reagensglas afpipetteres med fuldpipette 2,0 mL Seliwanoff's reagens.
I et 100 mL bægerglas (eller stort reagensglas) blandes:
22,5 mL 0,5 M glucose, afmålt med måleglas
2,5 mL puffer (pH=8), afmålt med engangspipette
50 µL 1.0 M magnesiumsulfat
Bægerglasset anbringes i et vandbad ved 60 o C, og fastholdes ved hjælp af et stativ
og en klemme. Opløsningen tempereres i 3-5 minutter.
Der afvejes 0,5 g Sweetzyme T.
Reaktionen startes ved at tilsætte de 0,5 g Sweetzyme T (t=0) til bægerglasset.
Samtidig startes uret. Der omrøres fra tid til anden med en spatel. 2,0 mL prøver
udtages fra bægerglasset med transferpipette og overføres til reagensglassene med
Seliwanoff's reagens. Bægerglasset forbliver i vandbadet under hele tidsintervallet.
Den første prøve udtages umiddelbart før man tilsætter Sweetzyme T. Der udtages
ialt 6 prøver til tiderne 0 - 2 - 5 - 10 - 15 - 20 minutter.
30