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3. Vergleich von kulturellem und PCR-
Nachweis
Von 167 untersuchten Kotproben auf pathogene
Darmerreger wurden kulturell 15%
(n=25) und mittels PCR 11,4% (n=19) positive
Proben ermittelt. Bei kulturellen Untersuchungen
von Kotproben, die lediglich auf
Salmonellen untersucht wurden, konnte mittels
PCR zusätzlich in zwei Proben (1%) C.
jejuni und in sechs Proben (3,6%) Y. enterocolitica
nachgewiesen werden. Von den Proben,
die auf Salmonellen untersucht wurden
n=137 konnten 16,1% (n=22) mit Hilfe der
Bakteriologie und 12,4% (n=17) mittels PCR
als positiv identifiziert werden (s. Tab.). Die
etwas geringere Sensitivität der PCR-
Methode beruht auf Inhibitoren in der Probe,
wie z.B. Bestandteile von Körperflüssigkeiten,
Lebensmittelbestandteile, bestimmte Enzymgruppen
usw. In Kotproben spielen besonders
DNasen und Proteasen eine große
Rolle. Mit Hilfe von speziellen Aufreinigungsverfahren
und dem Einsatz von Reagenzien
zur Unterdrückung inhibitorischer
Substanzen wurde die PCR-Methode erfolgreich
evaluiert. Dies wird bei der vergleichenden
Analyse von Y. enterocolitica und C.
jejuni deutlich. Bei beiden Erregern zeigte
sich bei beiden Untersuchungsmethoden eine
annähernd gleiche Sensitivität.
4. Diskussion
Der entscheidende Vorteil der etablierten
Multiplex Real-time PCR gegenüber der konventionellen
Bakteriologie liegt in der kürzeren
Untersuchungszeit, besonders im Hinblick
auf die Diagnostik von Y. enterocolitica, die
in der Bakteriologie bis zu 4 Wochen dauern
kann.
Ein weiterer Vorteil besteht darin, dass auch
der Nachweis von vermehrungsunfähigen und
toten Keimen möglich ist. Dies ist wichtig
beim Nachweis von empfindlichen Keimen,
zu denen C. jejuni zählt. Die PCR-Methode
ist besonders zu empfehlen, wenn ein Zoonoseverdacht
besteht oder man eine mögliche
Übertragung vom Tier auf immungeschwächte
Kontaktpersonen schnellstmöglich ausschließen
möchte.
Der bedeutende Pluspunkt der Bakteriologie
liegt darin, dass beim Nachweis von Salmonellen
und Yersinien gleichzeitig ein Antibiogramm
erstellt wird. Desweiteren können die
Salmonellen mittels Serotypisierug genauer
identifiziert werden, ein wichtiger Hinweis
für die Epidemiologie und bei Durchfallerkrankungen
der Patientenbesitzer mit entsprechendem
Zoonoseverdacht. Ein weiterer
Pluspunkt der bakteriologischen Untersuchung
ist, dass auch andere für das Tier pathogene
Subspezies von Campylobacter (z.B.
C. upsaliensis) und Yersinien (z.B. Y. pseudotuberculosis)
identifiziert werden können.
Fazit:
Liegt eine Durchfallerkrankung bei den Patientenbesitzern
vor und besteht der Verdacht
auf eine Infektion über das eigene Haustier
sollte eine möglichst schnelle Diagnostik auf
die häufigsten darmpathogenen Erreger vorgenommen
werden. Hierfür eignet sich die
PCR Methode am besten.
Leidet das Tier an Diarrhoe und zeigt womöglich
auch noch Fieber ist die Bakteriologie
die Methode der Wahl, da hier gleichzeitig
(außer bei Campylobacter) ein Antibiogramm
erstellt wird. So kann je nach Prämisse
die geeignete Untersuchungsmethode ausgewählt
werden.
LABOR FÜR KLINISCHE DIAGNOSTIK GMBH & CO.KG Info 2/2005 Seite 2
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