Influence of mutational status in CLL after autologous stem cell ...

BLUT- und KNOCHENMARKDIAGNOSTIK: 

GRUNDLAGEN UND BEISPIELE 

WANN, WAS, WIE, WARUM? 

: 

Stefan Mahlmann 

Medizinische Klinik I 

Westpfalz-Klinikum 

GmbH

pluripotente 

HSC 

BLut-Zell Entwicklung im Knochenmark 

myeloisch determiniert 

lymphatisch 

determiniert 

Bearbeitet nach K. Dorshkind; 2000 

T-Vorläufer 

pro-B 

Erythrozyten 

Makrophagen 

Neutrophile 

Eosinophile 

Basophile 

Megakaryozyten 

Thymus 

CD34 

pre-B 

 

unreife reife 

B-Zelle 

IgM 

IgM 

IgD 

CD10 

CD19 

CD20 

CD21 

CD22 

CD24 

CD38 

CD40 

CD45

B-Zell Antigen Rezeptor Komplex 

NH 2 

V 

V 

J J J D 

D 

Ig- Ig- 

C C C C 

COOH 

V 

J 

V 

Ig- Ig- 

NH 2 

Zellmembran

MZL 

FL 

DGBL 

Burkitt 

B-Zell / NHL Entwicklung im Lymphknoten 

Bearbeitet nach R. Dalla-Favera; 2000 

Follikuläre Mantelzone 

naive B-Zellen 

sIgD + CD38 - CD23 - 

Keimzentrum 

apikale helle Zone 

sIgD + CD38 + CD77 - 

kleine Zentrozyten 

basale helle Zone 

sIgD + CD38 + CD77 - 

große Zentrozyten 

dunkle Zone 

sIgD - CD38 + CD77 + 

Zentroblasten 

Gedächtniszelle 

sIgD - CD38 - 

Plasmazelle 

CD38 + 

- Somatische Hypermutation 

- Klassenwechsel 

- Apoptose

B-Zell Antigen Rezeptor Komplex 

NH 2 

V 

V 

J J J D 

D 

Ig- Ig- 

C C C C 

COOH 

V 

J 

V 

Ig- Ig- 

NH 2 

Zellmembran

naive 

B Zelle 

B-NHL AUS UNTERSCHIEDLICH REIFEN LYMPHOZYTEN 

Splenisches 

Marginal- 

zonen Lymphom 

Keimzentrums- 

B Zelle 

Follikuläres 

Lymphom 

Burkitt Lymphom 

DLBCL (GC-Typ) 

Lymphozytenpredom. 

M. Hodgkin 

DLBCL (ABC-Typ) 

Primär 

Mediastinales 

B-Zell Lymphom 

Marginalzone 

Keimzentrum 

apoptotische 

B Zelle 

Gedächtnis 

B Zelle 

Mantel- 

zone 

CD5 

B Zelle 

Klassischer M. Hodgkin 

Post-Transplant 

Lymphom 

Haarzell Leukämie 

Prolymphozyten 

Leukämie 

Plasmablast 

MALT 

Lymphom 

Lymphoplasmozytisches 

Lymphom 

Mantelzell-Lymphom

Knochenmark 

Ursprungszellen von B-Zell 

Blut 

Neoplasien 

Lymphknoten 

Keimzentrum

U N I V E R S I T Ä T S K L I N I K U M 

E S S E N 

Knochenmark 

Blut 

Memo: B-Zellen, die noch keine Antigenkontakt hatten, sind 

damit nicht somatisch hypermutiert. Antigen-erfahrene B- 

Zellen haben dahingegen mutierte IgVH Gene!! 

IgVH unmutiert 

Lymphknoten 

Somatische 

Hypermutation 

Keimzentrum 

IgVH mutiert 

K L I N I K F Ü R 

H Ä M A T O L O G I E

Knochenmark 

Blut 


Akute lymphatische 

Leukämie (ALL) 

Lymphknoten 

Keimzentrum 

Somatische 

Hypermutation IgVH mutiert

Knochenmark 

Blut 


Chronische lymphatische Leukämie 

(CLL), IgVH unmutiert 

Lymphknoten 

Keimzentrum 

Somatische 


Knochenmark 

Blut 


Chronische lymphatische 

Leukämie (CLL), IgVH mutiert 

Lymphknoten 

Somatische 

Hypermutation 

Keimzentrum 

B-CLL mit mutierten 

IgVH Genen haben 

eine bessere Prognose! 

IgVH mutiert

Knochenmark 

Blut 


Maligne Lymphome 

Lymphknoten 

Keimzentrum 

Somatische 


ONKOGEN- 

ACTIVIERUNG 

TUMOR- 

SUPPRESSOR 

INAKTIVIERUNG 

WACHSTUMSFAKTOR 

BLOCK IN DER 

DIFFERENZIERUNG 

UNGEHEMMTE 

PROLIFERATION 

MECHANISMEN DER TUMORGENESE 

GENETISCHE VERÄNDERUNGEN 

EFFEKTOR 

REGION 

DNA 

Y Y 

„SECOND MESSENGER“ 

RNA 

TRANSKRIPTIONSFAKTOREN 

TRANSCRIPTION 

WACHSTUMSFAKTORREZEPTOR 

CELL CYCLE 

CONTROL PROTEINS 

mRNA PROTEIN 

SIGNAL TRANSDUCER

Große Konsequenzen bei 

• Transkription – 

• Translation – 

Störungen der DNA- 

Umschreiben 

Übertragen der 

Sequenz! 

der DNA in RNA 

RNA in Proteine 

Zellkern 

Zellmembran 

Zellplasma

Mutation/Translokation 

Deletion Duplikation Inversion

U N I V E R S I T Ä T S K L I N I K U M 

E S S E N 

K L I N I K F Ü R 

H Ä M A T O L O G I E 

Mutation/Translokation 

Insertion Translokation

z.B. JAK2 

• Januskinasen sind zytoplasmatische 

Tyrosinkinasen 

• Spielen eine Rolle u.a. in der 

Hämatopoese und der Immunantwort 

• Das JAK2 Gen liegt auf Chromosom 

9p24 

• Die onkogene Funktion entsteht durch 

Genfusion/Translokation oder 

Mutation 

#9p24 JAK2 

JAK2 Protein

JAK2 Mutation 

• Die häufigste Mutation betrifft das 

Exon 14 (JAK2-V617F) 

• Diese Mutation führt zur milden 

Aktivierung der JAK2-Kinase 

• Die Mutation kommt vor bei 

Polycythämia vera rubra 95% 

Primären Myelofibrose 60% 

Essentiellen Thrombzythämie 50%

Morphologie: 

Histologie mit Immunhistochemie 

Zytologie mit Zytochemie (POX, Esterase) 

Zytogenetik 

„klassische Zytogenetik“ 

Molekulargenetik: FISH, PCR 

Zelloberfächenanalyse (CD, Antigene) 

Durchflußzytometrie, FACS 

Immunphänotypisierung

KNOCHENMARKHISTOLOGIE 

UNENTBEHRLICH BEI DER 

LYMPHOMDIAGNOSTIG (MIT 

IMMUNZYTOCHEMIE) 

OFT BEI MPS, 

BZW. PUNCTIO SICCA 

ENTBEHRLICH BEI DER 

LEUKÄMIEDIAGNOSTIK 

NACHTEIL: 

DAUERT MEHRERE TAGE BIS 

ERGEBNIS VORLIEGT

IE BASISUNTERSUCHUNG! 

KNOCHENMARKZYTOLOGIE: 

NACHTEILE: 

DIE DIFFERENZIERUNG VON 

VERSCHIEDENEN BLASTEN KANN 

SCHWIERIG SEIN 

DIE DIFFERENZIEUNG VON 

LYMPHOMARTEN KANN 

SCHWIERIG SEIN

KNOCEHENMARKZYTOLOGIE: ZYTOCHEMIE 

PEROXIDASEFÄRBUNG 

AML M3 FAB 

ESTERASEFÄRBUNG 

AML M5a FAB

PRINZIP DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE

BEISPIEL EINER FACS ANALYSE 

FLUORESCENCE ACTIVATED CELL SORTING 

UNABDINGBAR BEI DER LYMPHOM UND LEUKOSEN- 

DIAGNOSTIK INSBESONDERE ALL (SUBTYPISIERUNG)

KARYOGRAMM 

KLASSISCHE ZYTOGENETIK 

-NUMERISCHE VERÄNDERUNGEN 

-DELETION, -DERIVATIVE 

-INSERTION, -INVERSION 

-ISOCHROMOSOM, -DELETION 

-TRANSLOKATION 

NACHTEILE: 

TELOMER 

KURZER ARM „p“ 

ZENTROMER 

LANGER ARM „q“ 

TELOMER 

KLEINERE VERÄNDERUNGEN 

PUNKTMUTATIONEN, MRD!

FISH: FLUORESCENCE IN SITU HYBRIDISATION 

NORMAL TRANSLOKATION 

DENATURIERUNG 

HYBRIDISIERUNG 

SONDE

TRANSLOKATION t(9;22) BEI DER CML

ERGEBNIS EINER FISH - ANALYSE 

VORTEIL: 

SENSITIV 

MRD DIAGNOSTIK 

MÖGLICH 

NACHTEIL: 

NICHT ALLE GENSONDEN 

SIND VORHANDEN 

KEIN KARYOTYP

OLEKULARGENETIK: POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR) 

UNABDINGBAR BEI 

-FUSIONSTRANSKIPTEN: 

z:B. BCR-ABL 

-KLEINEN VERÄNDERUN- 

GEN, z.B. 

-PUNKTMUTATIONEN 

MRD!! 

-SUBTYPISIERUNG ALL 

SONDERFORMEN: 

-MULTIPLEX PCR 

-NESTED PCR 

-QUANTITATIVE PCR 

-REALTIME PCR

SH2 BINDING DBL-HOMOLOGY RHO GAP MYR SH3 SH2 SH1 DNA-BINDING 

P210 

PCR MIT DEM BCR-ABL FUSIONSTRANSKRIPT 

SH2 BINDING 

22 9 

CML 

DBL-HOMOLOGY 

DBL-HOMOLOGY 

SH3 SH2 

SH3 SH2 

SH1 DNA-BINDING 

SH1 

KEIN PCR-PRODUKT 

MYR RHO GAP 

PCR-PRODUKT

NACHWEIS VON DELETIONEN UND INSERTIONEN MIT DER 

PCR - REAKTION 

A 

B 

NORMAL DELETION 

PCR 

NORMAL INSERTION 

PCR

A 

B 

NACHWEIS VON PUNKTMUTATIONEN MIT DER PCR - 

REAKTION 

NORMAL „KRANK“ 

T 

T 

T 

A 

A 

PCR PRIMER 

SEQUENZIERUNG 

DER PCR - PRODUKTE 

A 

PCR-PRODUKT 

A

BLUT- KNOCHENMARKDIAGNOSTIK BEI: 

• AKUTEN LEUKOSEN; AKUTEN MYELOISCHEN LEUMÄMIEN 

• MYELODYSPLASTISCHEN SYNDROMEN 

• MYELOPROLIFERATIVEN SYNDROMEN 

• AKUTEN LYMPHATISCHEN LEUKÄMIEN 

• LYMPHOMEN

2 KASUISTIKEN:

Autom. Diff-BB: 

L: 47,7/nl 

Ly:85% 

Neutr:10% 

Mono:3% 

Eo:2% 

Baso:0% 

Hämatologische Stufendiagnostik 

Beispiel: Isolierte Lymphozytose im PB 

Blutausstrich


Multiparameter-Immunphänotypisierung 

DD: reaktiv vs. NPL 

NW einer monoklonalen B-Zellpopulation mit Hilfe der Ig-LK-Färbung 

l-LK+ B-Zellpopulation


Multiparameter-Immunphänotypisierung 

Immunphänotyp: CD19+, 5+, 23+, l-LK+ B-Zellpopulation im PB 

Diagnose: Chronische lymphatische Leukämie 

80%


Prognoseabschätzung bei der CLL 

CD38+ PT, 65% der Zellen weisen eine del17p- auf: Hochrisikokonstellation 

Chr. 12 

Chr.17p

Prognoseabschätzung bei der CLL durch Nachweis 

von CD38 auf der Oberfläche der leukämischen Zellen 

CD38-Positivität in der Literatur unterschiedlich 

definiert:>6, 20 oder30% des leukämischen Zellklons 

-Vorteil: leicht zu bestimmen, niedrige Kosten im 

Vgl. zu anderen molekularen Prognosemarkern 

93% 

Proportion of surviving patients 

Time (months) 

CD38- (N=76) 

P=0.016 

CD38+(N=53) 

Dürig et al., 2002

STEM CELL 

PROGENITOR 

CELLS 

MATURE 

CELLS 

PROGRESSION OF CML 

NORMAL CML CHRONIC PHASE CML BLAST CRISIS

SIGNAL TRANSDUCTION BY THE BCR-ABL PROTEIN 

STAT 

BCR-ABL 

RAS 

PI3KINASE 

RAF JUN KINASE 

MYC 

AKT

MONOMORPES BILD

PANOPTISCHE 

FÄRBUNG 

+ 

ZYTOCHEMIE 

POX, 

ESTERASE, 

(PAS) 

KEINE SICHERE 

ZUORDNUNG MÖGLICH: 

FACS: AML + ALL PANEL 

AML BASISDIAGNOSTIK: 

BLUTAUSSTRICH + KNOCHENMARK, KEINE HISTOLOGIE 

BLASTEN > 20% MIT 

AUERSTÄBCHEN 

ODER GRANULA 

AML 

POX+ AML M1-3 

POX+, ESTERASE+ AML M4 

ESTERASE+ AML M5 

POX+ (PAS+) AML M6 

FACS: AML PANEL, 

VERLAUFSKONTROLLE 

ZYTOGENETIK: DIAGNOSE, 

PROGNOSE UND THERAPIE

AKUTE LEUKÄMIE: FAB KLASSIFIKATION 

MO MYELOBLASTÄR OHNE DIFFERENZIERUNG 

M1 MYELOBLASTÄR OHNE REIFUNG 

M2 MYELOBLASTÄR MIT REIFUNG 

M3 HYPERGRANULÄR-PROMYELOZYTÄR 

M4 MYELOMONOZYTÄR 

M4 EO WIE M4 EOSINOPHILE > 5% 

M5 MONOZYTÄR/MONOBLSTÄR 

M5A >80% UNDIFFERENZIERTE BLASTEN 

M5B

AML M3 PROMYELOZYTENLEUKÄMIE 

ZYTOLOGIE: 

FAGOTT-ZELLEN 

TRANSLOKATION t (15;17) 

BEWEISEND FÜR DIE 

ERKRANKUNG 

NACHWEIS: PCR, FISH 

KONSEQUENZ: 

SPEZIFISCHE THERAPIE 

ATRA

DNA-Bindung 

(Zink-Finger) 

Liganden- 

Bindung 

APL: Genetische Veränderungen 

RAR 

(17q21) 

Nukleärer Rezeptor 

Differenzierung u. Reifung 

myeloischer Zellen 

t(15;17) 

PML 

(15q22) 

Stabilisierung von Dimeren 

Wachstumsblockade 

Differenzierungsblockade 

Transkriptionsfaktor 

pro-apoptotisch, antiproliferativ

PML (15q22) 

PLZF (11q23) 

NPM (5q35) 

NuMA (11q13) 

2 klinische Syndrome 

Bearbeitet nach: Melnick A, Licht JD, Blood 93:3167-3215, 1999 

Akute Promyelozyten Leukämie 

Molekulare Pathogenese 

N / RAR 

RAR (17q21) 

Ansprechen auf all-trans Retinsäure 

PML, NPM, NuMA 

Nicht-Ansprechen auf all-trans Retinsäure 

PLZF 

>99% 

RXR-RAR 

RXR 

DR5 

RAR 

DR5 

PML-RAR 

PML 

RAR 

DR5 

PML 

RAR 

DR5 

N-CoR/SMRT 

Sin3 

HDAC 

Deacetyliertes, inaktiv 

X 

Myelopoese-spezifische Gene 

N-CoR/SMRT 

Sin3 

HDAC 

ATRA, 10 -8 M 

Deacetyliertes, inaktiv 

X 

RXR 

DR5 

PML 

RAR 

DR5 

Bearbeitet nach: Slack JL, Rusiniak ME, AnnHematol 97:227-238, 2000 

RAR 

DR5 

PML 

RAR 

DR5 

ATRA, 10 -8 M 

SRC 

ACTR 

Acetyliertes, aktiv 

SRC 

ATRA, 10 -6 M 

ACTR 

Acetyliertes, aktiv

Akute Promyelozyten Leukämie 

Pathogenese 

Das PML-RAR Fusionsprodukt 

• unterdrückt die direkte transkriptionelle Kontrolle 

der RAR-abhängigen Zielgene 

• interferiert mit anderen Transkriptionsfaktoren 

• induziert post-transkriptionale Effekte (z.B. TGF-) 

• wirkt anti-apoptotisch

ZYTOGENETIK: DIAGNOSE, PROGNOSE UND THERAPIE 

GÜNSTIGER KARYOTYP: 

TRANSLOKATION t (8;21) AML M2 20%, 

STANDARDTHERAPIE 

TRANSLOKATION t (15;17) AML M3 + VARIANTE 

BEWEISEND (PCR, FISH) 

EIGENE THERAPIE 

INVERSION 16 AML M4EO 

BEWEISEND (PCR, FISH) 

STANDARDTHERAPIE

ZYTOGENETIK: DIAGNOSE, PROGNOSE UND THERAPIE 

HOCHRISIKOMERKMALE 

-5 / del (5q) / -7 / +8 

inv(3)(q21q26) / t(3;3)(q21;q26) 

t(6;9)(p23;q34) 

t 6;11)(q27;q23) 

t(11;19)(q23;p13.1) 

t(9;11) 

del(17)(p13.1)(p53-Deletion) 

11q23 (MLL)-TRANSLOKATION 

AML NACH 

TOPOISOMERASEINHIBITOR 

KURZES INTERVALL 

KMT 

KOMPLEX 

ABERRANTER 

KARYOPYP + 

ALTER 

KEINE THERAPIE? 

SONST KMT

MYELODYSPLASTISCHE SYNDROME 

ZYTOLOGIE: UNBEDINGT; DYSPLASIEZEICHEN 

EISENFÄRBUNG: EISENÜBERLADUNG DER KM- 

MAKROPHAGEN 

ZYTOGENETIK: UNBEDINGT; DIAGNOSE UND PROGNOSE 

DD: HYPOPLASTISCHES MDS, APLASTISCHE ANÄMIE 

UNKLARE MAKROZYTÄRE ANÄMIE (5q-) 

60% ALLER PRIMÄREN UND BIS ZU 80% ALLER 

SEKUNDÄREN MDS HABEN ZYTOG. VERÄN- 

DERUNGEN 

PROGNOSEABSCHÄTZUNG 

HISTOLOGIE: UNTERGEORDNET 

FACS: UNTERGEORDNET

Gesund 

MDS 

Hyperzelluläres 

Knochenmark 

Dysplasiezeichen 

Kleeblattkerne Hypogranulation Mikromegakaryozyten 

Megaloblastoide F. hyposegmentierte F. kleine Einzelkerne 

Mehrkernigkeit bizzar segment. K. hypolobulierte Formen 

Erythropoese Granulopoese Megakaryopoese

ZYTOGENETISCHE PARAMETER ZUR 

RISIKOABSCHÄTZUNG BEI MDS 

RISIKO KARYOTYP 

NIEDRIGES RISIKO: 5q-, 20q-, -Y 

HOHES RISIKO: KOMPLEXE KARYOTYPVERÄN- 

DERUNDEN (MIND. 3 ANOMALIEN) 

CHROMOSOM 7 ABBERATIONEN 

INTERMEDIÄRES 

RISIKO: ALLE ANDEREN ANOMALIEN

ZYTO- 

LOGIE 

HISTO- 

LOGIE 

ZYTO- 

GE- 

NETIK 

PCR 

KNOCEHMARKDIAGNOSTIK BEI MYELOPROLIFERATIVEN 

ERKRANKUNGEN 

CML PV OMS ET 

HYPERZELLULÄR HYPERZELLULÄR P. SICCA MEGAKARYO- 

BASOPHILIE ZYTEN 

EO‘S u.MEGA‘S 

GRANULOP. ZELLGEHALT AUSGEPRÄ- MEGAKARYO- 

MEGAKARYOZ. GTE FIBROSE ZYTEN 

BCR-ABL, immer! del (20q),+8,+9 -7,+8,+9,+1 SEHR 

t(9;22) +1q, u.a u.a SELTEN 

BCR-ABL AUSSCHLUSS: BCR-ABL 

t(9;22) JAK2 MUTATION 

QUANTI- VERLAUF 

TATIVE BCR-ABL UNTER 

PCR THERAPIE

IMMUNOLOGISCHE KLASSIFIKATION DER ALL 

B-VORLÄUFERZELL-ALL T-LINIEN-ALL 

PRO-B COMMON PRÄ-B B PRO-T PRÄ-T KORTIKALE REIFE 

PROGENITORZELL-ANTIGENE 

TdT + + + - + + + +/- 

HLA-DR + + + - +/- - - - 

CD10 - + +/- +/- +/- +/- +/- - 

B-ZELL-ANTIGENE 

CD19 + + + + - - - - 

cyCD22 + + + + - - - - 

CD79a + + + + - - - - 

cyIgM - - + - - - - - 

mIg - - - + - - - - 

T-ZELL-ANTIGENE 

cyCD3 - - - - + + +/- - 

CD7 - - - - + + + + 

CD2 - - - - - - - - 

CD1a - - - - - - + -

T-VORLÄUFER ALL 

THY EARLY T 

MATURE T 

SR 

STANDARDRISIKO 

RISIKOGRUPPEN DER GMALL-STUDIEN 

ALL 

PH/BCR-ABL neg 

KEINE PRO B 

KEINE t(4;11) 

WBC 

< 30.000/yl 

CR TAG 26 

HR 

HOCHRISIKO 

B-VORLÄUFER ALL 

PRO B 

t(4;11) 

WBC 

> 30.000/yl 

CR TAG 46 

PH/BCR-ABL+ 

VHR 

HÖCHSTRISIKO

MRD- 

NIEDRIGRISIKO 

MRD- 

HOCHRISIKO 

MRD- 

INTERMEDIÄR- 

RISIKO 

MRD-BASIERTE THERAPIEENTSCHEIDUNG 

DEFINITION 

TAG 71 WOCHE 16 BIS WOCHE 52 

B ALL 

MORPHOLOGIE: 

L3 

IMMUNPHÄNOTYP: 

SIg+, KAPPA ODER LAMBDA+, 

CD 19/20/79a+, CD10 +/-, TdT- 

ZYTOGENETIK: 

t(8;14)(q24;q32) 

SELTEN t(2;8) ODER t(8;22) 

MOLEKULARBIOLOGIE: 

AKTIVIERUNG VON C-MYC 

PROGNOSE: 

GÜNSTIG 

(B-ALL THERAPIE)

PRÄ-B ALL 

MORPHOLOGIE: 

L1 ODER L2, KERNEINKERBUNGEN 


CD10 +, CD 19/22/24/79a+, 

cyIgM+, sIg-, TdT+ 

Zytogenetik: 

t(1;19)(q23;q13) 

HYPERDIPLOIDIE 

t(12;21)(p13;q22); t(9;22)(q34;q11) 


E2A-PBX1; TEL-AML1; BCR-ABL 

PROGNOSE: 

ABHÄNGIG VON ZYTOGENETIK / 

MOLEKULARBIOLOGIE

COMMON ALL 

MORPHOLOGIE: 

L1 ODER L2 


CD10+, CD 19/20/24/79a+, 

cyIgM/Sig-, TdT+ 

ZYTOGENETIK: 

HYPERDIPLOIDIE 

t(12;21)(p13;q22), t(9;22)(q34;q11) 


TEL/AML1, BCR/ABL 

PROGNOSE: 

ABHÄNGIG VON ZYTO- 

GENETIK/MOLEKULARBIOLOGIE

PRO-B ALL 

MORPHOLOGIE: 

L2 (L1) 


CD 19/22/79a+, CD24+/- 

CD10 -, cyIgM/Sig-, TdT+ 

KOEX: CD15, CD65s; moAK 7.1 

ZYTOGENETIK: 

11q23-UMGRUPPIERUNG BEI 60- 

70% DER SÄUGLINGE, 2-6% 

ÄLTERER KINDER, BIS ZU 10% 

DER ERWACHSENEN 

MOLEKULARGENETIK: 

11q23-UMGRUPPIERUNG Z.B. 

t(4;11)(q21;q23) Z.B. MLL-AF-4 

PROGNOSE: UNGÜNSTIG

T ALL 

MORPHOLOGIE: 

L2/L1, sPh+ (45-85%) 


cy (m) CD3+; CD7+ 

PRO-/PRÄ-T ALL 30-40% 

KORTIKALE T ALL 40-50% 

REIFE T ALL 20% 

ZYTOGENETIK: 

SPEZIF. CHROMOSOMALE ANO- 

MALIEN BEI 45% DER T ALL Z.B. 

t(11;14); t(10;14), 14q11; ABBERA- 

TIONEN VON 7q34-36, 7 p15 


z.B. TAL1, c-myc, HOX 11, RBTN1

PRO-T/PRÄ-T-ALL 

MORPHOLOGIE: 

L1/L2 


cyCD+; CD7+ CD 5/2/10+/-; 

CD1a-; MEMBRAN CD3- 

ZYTOGENETIK: 

z.B. t(11;14); t(10;14); 

del (1p32) 


Z.B. Ttg1/2; HOX11; TAL1 

PROGNOSE: 

UNGÜNSTIG

LYMPHOME: KM-BEFALL 

HISTOLOGIE: UNABDINGBAR (MIT IMMUNHISTOCHEMIE) 

ZYTOLOGIE: BEDINGT; KEINEN STELLENWERT BEIM 

MORBUS HODGKIN 

FACS: UNABDINGBAR 

ZYTOGENETIK: JA, DIAGNOSESICHERUNG 

PROGNOSEFAKTOR BEI CLL UND 

PLASMOZYTOM (DELETION 13) 

KEINE MRD DIAGNOSTIK 

FÜR t(14;18) ETABLIERUNGSVERSUCHE 

IM RAHMEN DER STIL-STUDIE

OBERFLÄCHENMARKER BEI NIEDRIG MALIGNEN NHL 

MARKER B-CLL B-PLL HCL FL MCL SLVL T-CLL LGL SS T-PLL ATLL 

S Ig (+) ++ ++ ++ ++ ++ - - - - - 

CD 2 - - - - - - + + + + + 

CD 3 - - - - - - + - + + + 

CD 4 - - - - - - - - + +/- + 

CD 5 ++ - - - + - - - + + + 

CD 7 - - - - - - - - +/- + +/- 

CD 8 - - - - - - + +/- +/- +/- +/- 

CD 19/20/24 ++ ++ ++ + + ++ - - - - - 

CD 22 +/- ++ ++ + + ++ - - - - - 

CD 10 - - - +/- - - - - - - - 

CD 25 - - ++ - - +/- - - - - - 

CD 56 - - - - - - - + - - - 

CD 103 - - ++ - - - - - - - -

ZYTOGENETISCHE BEFUNDE BEI NHL 

A: INDOLENT 

FOLLIKULÄRES LYMPHOM: t(14;18)(q32;q21) bcl-2, 70-95% ALLER 

FÄLLE, IN DER REGEL KOMBINIERT MIT ANDEREN ANOMALIEN 

B-CLL: DELETION 13, 50% ALLER FÄLLE, B-ZELL-REZEPTOR-REARR. 

M. WALDENSTRÖM: t(9;14)(q13;q32) in 50% ALLER FÄLLE 

MANTELZELL-LYMPHOM: t(11;14)(q13;q32) CYCLIN D1, 5 - 10% 

ALLER FÄLLE 

PLASMOZYTOME: DELETION 13 

T-ZELL-LYMPHOME: T-ZELL-REZEPTOR-REARR.

ZYTOGENETISCHE BEFUNDE BEI NHL 

B. HOCHMALIGNE 

LYMPHOBLASTISCHE LYMPHOME: t(9;22)(q34;q11.2) UNGÜNSTIG 

t(4;11)(q21;q23) UNGÜNSTIG 

t(1;19)(q23;p13.3) UNGÜNSTIG 

t(12;21(p13;q22) GÜNSTIG 

HYPERDIPLOID > 50 GÜNSTIG 

HYPODIPLOID UNGÜNSTIG 

BURKITT-LYMPHOM: t(8;14) MYC-TRANSLOKATION 

DIFFUS GROSSZELLIGES L: t(14;18) IN 20-30% DER FÄLLE, 

B-ZELL-REZEPTOR-REARRANGEMENT

DIFFUS GROSSZELLIGES 

B-ZELL LYMPHOM 

BURKITT LYMPHOM

Hochmalignes NHL Primärtherapie: 

Spielarten von R-CHOP 

• Cyclophosphamid 750 mg/m² i.v. d1 

• Hydroxy-Adriamycin 50 mg/m² i.v. d1 

• Oncovin (Vincristin) 2 mg i.v. d1 

• Prednison 100 mg p.o. d1-5 

WH Tag 14 (+G-CSF); WH Tag 21 

+ Rituximab, 6-8 Zyklen, 

• + Etoposid 100 mg/m² d1-3 (CHOEP)

Alter 

Non-Hodgkin-Lymphome 

Klinische Prognoseabschätzung 

Internationaler Prognostischer Index (‚IPI score‘) 

Allgemeinzustand 

Ann Arbor Stadium 

Extranodalbefall 

LDH-Aktivität i. S. 

International NHL Prognostic Factors Project, 1993

Prinzip der cDNA Mikrochip Technologie 

Population A 

polyA RNA 

Population B 

AAAAA 

analysieren 

cDNA 

Cy-5 

IVT 

Cy-3 

waschen 

Cy-5 Cy-5 Cy-5 Cy-5 

Cy-3 Cy-3 Cy-3 Cy-3 

markiertes Fragment 

hybridisieren 

Lockhardt DJ et al., Nature Biotech 14:1675-1696, 1996

Diffuses 

großzelliges 

B-Zell-Lymphom 

(DGBL) 

Gen-Expressionsprofile 

zweier Untergruppen 

(Alizadeh et al., Nature 403 : 503, 2000)

Das Genexpressionsprofil definiert zwei klinisch 

unterschiedlich verlaufende Gruppen der DGBL 

Alizadeh et al., Nature 403 : 503, 2000)

Influence of mutational status in CLL after autologous stem cell ...

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