Dokument 1.pdf - RWTH Aachen University
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III Material und Methoden 15<br />
Nach ausreichendem Aushärten des Paraffins werden die Paraffinblöcke am Schlittenmikrotom<br />
der Firma Reichert Jung mit Klingenhaltern der Firma Feather (Enno Vieth,<br />
Mikrotome GmbH, Wiesmoor) und entsprechenden Klingen (Microtome blades N35,<br />
Feather, Enno Vieth, Mikrotome GmbH, Wiesmoor) geschnitten.<br />
Die Schnittdicke beträgt 5 µm. Die Schnitte werden im Wasserbad gestreckt und auf<br />
Objektträger aufgezogen. Für die Hämatoxylin- Eosin- Färbung werden geschliffene<br />
Superfrost Color Objektträger der Firma Menzel, Braunschweig und für die<br />
immunhistochemische Färbung Superfrost Plus Objektträger (# 0413000) der Firma<br />
Menzel, Braunschweig verwandt.<br />
Alle Schnitte werden über Nacht bei 42°C im Wärmeschrank getrocknet.<br />
3.3.2.1 Hämatoxylin- Eosin- Färbung<br />
Durch die Färbung mit Farbstoffen erhält das natürliche Präparat mehr Bildkontrast. Die<br />
Hämatoxylin-Eosin- Färbung zählt zu den Übersichtsfärbungen, bei der sich die<br />
Zellkerne blau, das Zytoplasma, Kollagenfasern und Erythrozyten auf Grund ihrer<br />
elektrischen Ladung rot anfärben. Die Hämatoxylin- Eosin- Färbung wird in Anlehnung<br />
an die Methode von Burck (H.C. Burck, Histologische Technik, 1966, Thieme- Verlag)<br />
durchgeführt.<br />
3.3.2.2 Histomorphometrische Auswertung der histologischen<br />
Präparate<br />
Die Epithelhöhe des luminalen Rattenendometriumepithels wird an Hämatoxylin-<br />
Eosin- gefärbten Präparaten gemessen. Zusätzlich wird bei Mehrfachbehandlung die<br />
Epithellänge des luminalen Rattenendometriumepithels gemessen.<br />
Hierzu dient ein Photomikroskop (Axiophot2, Zeiss, Jena) mit angeschlossenem<br />
Bildanalyseprogramm (KS 400 Imaging System, Release 3.0, Carl Zeiss Vision GmbH,<br />
Division Bildanalyse).<br />
Die Epithelhöhe wird mit 20fachem Objektiv (Ph 2 Plan – Neofluar 20x/0,50, Zeiss,<br />
Jena) an fünf repräsentativen Stellen pro Präparat, an denen das einschichtige<br />
Plattenepithel senkrecht zum darunterliegenden Stroma geschnitten ist, gemessen. Pro