Diagnostik im Dialog - Roche Diagnostics

Ausgabe 30 • 10/2010
Diader Roche Diagnostics Deutschland GmbH
Diagnostik im Dialog
News
Editorial
Sehr geehrte Leserin, sehr geehrter Leser,
haben Sie schon einmal das Wort „Kopfschmerzen“
in eine Internetsuchmaschine
eingegeben? Allein bei Google bekommen
Sie über 1,5 Millionen Ergebnisse. Wer
möchte, kann sich heutzutage im Internet
ausführlich über sämtliche medizinische
Themen informieren. Sich mit gesundheitlichen
Themen zu befassen, liegt im Trend.
Längst ist der behandelnde Arzt dabei nicht
mehr die einzige Informationsquelle. Viele
Patienten wollen auch selbst medizinische
Entscheidungen treffen. Nur: Die überwältigende
Masse der Informationen überfordert
medizinische Laien. Was ist richtig und
wichtig, was ist irreführend? Welche Aussagen
treffen auf den individuellen Fall zu?
Originäre Aufgabe der Ärzte in der Praxis
wie im Krankenhaus ist es, ihren Patienten
Orientierung zu bieten und sie darüber
aufzuklären, anhand welcher Kriterien eine
Therapie sinnvoll ausgewählt werden kann.
Der behandelnde Arzt muss der kompetente
medizinische Ansprechpartner für den
Patienten und der letztendliche Therapieentscheider
bleiben.
Sonderbeilage im Heft
DIAGNOSTIKUPDATE 2011
Laboratoriumsmedizin
Verbunden damit ist ein Weiterbildungsauftrag,
der nicht nur die Therapie, sondern
gleichermaßen die Diagnostik betrifft. Oft
ist eine sorgfältige Diagnostik die Voraussetzung
für eine fundierte Therapieauswahl.
Insbesondere in der Labordiagnostik wurden
in den vergangenen Jahren zahlreiche
neue Biomarker entdeckt und zu diagnostischen
Tests entwickelt, die eine gezieltere
oder frühzeitigere Therapieentscheidung
ermöglichen: ElecsysT IL-6 etwa unterstützt
als früher Marker akuter Entzündungen
das Sepsismanagement, ElecsysT
PlGF und ElecsysT sFLT-1 differenzieren
in einem frühen Schwangerschaftsstadium
die Präeklampsie von harmloseren Hochdruckerkrankungen,
ElecsysT Anti-CCP erweitert
die Diagnostik für Rheumatoide
Arthritis hinsichtlich Spezifität und Prognose
und Tina-quantT [a] Cystatin C weist
Nierenschädigungen früher nach als das
herkömmliche Kreatinin. Neben diesen Beispielen
aus den etablierten diagnostischen
Bereichen Klinische Chemie und Immunologie
gibt es zahlreiche und ganz neue
Ansätze in der Molekularen Diagnostik
und der Gewebediagnostik, sodass Therapieentscheidungen
zunehmend individualisierbar
werden.
Die neuen Möglichkeiten der in-vitro-Diagnostik
den behandelnden Ärzten transparent
zu machen, das ist Aufgabe und
Kernkompetenz des medizinischen Laborpersonals.
Eine enge Vernetzung mit Klinikern
und Praktikern sowie deren labormedizinische
Beratung verschaffen Patienten
nicht nur eine optimierte Betreuung, sondern
revidieren auch das Bild vom Labor
als technischem Dienstleister. Wir bei Roche
Diagnostics sehen unseren Auftrag darin,
diesen wichtigen Wissenstransfer mit zu
gestalten. Sprechen Sie uns an, auf welche
Weise wir Sie unterstützen können.
Mit besten Grüßen aus Mannheim
Jürgen Redmann
Geschäftsführer der Roche Diagnostics
Deutschland GmbH

Inhalt
Medizin
O Wie der Pathologe Leben rettet ................................................................................................................................................... S. 2
O Die Evolution der Pathologie: Von der Makroskopie zum Genom .............................................................................................. S. 4
O Gewissheit so früh wie möglich .................................................................................................................................................. S. 6
Produkte & Services
O Engagement für die Gewebediagnostik ....................................................................................................................................... S. 8
O Präzise Informationen zur Tumor-DNA beschleunigen Diagnosen ............................................................................................ S. 10
O Maßgeschneidertes LIS-Modul für die Pathologie ...................................................................................................................... S. 11
O Ersttrimester-Screening: Weniger invasive Untersuchungen ....................................................................................................... S. 12
O Weil einfach sicher ist – Reagenz einlegen und starten! ............................................................................................................. S. 13
O Erkennen, wenn Heparin zur Gefahr wird ................................................................................................................................. S. 14
O Produktnews .............................................................................................................................................................................. S. 16
Labormarkt & Gesundheitspolitik
O Krankenhäuser in Deutschland: Wettbewerbsfähig durch Effizienz und Qualität ...................................................................... S. 17
O Nachrichten aus der Gesundheitspolitik ..................................................................................................................................... S. 19
Medizin von morgen
O Auf die richtige Kombination kommt es an – Mehrfachfärbungen erweitern die Möglichkeiten der Tumordiagnostik .............. S. 20
Veranstaltungen & Kongresse
O Die ATHENA-Studie – richtungsweisend für ein erfolgreiches HPV-Screening ......................................................................... S. 22
O Veranstaltungen und Kongresse Oktober 2010 – Januar 2011 ..................................................................................................... S. 23
Medizin
Wie der Pathologe Leben rettet
Pathologen haben heute eine Lotsenfunktion
in der Diagnostik, der Therapiewahl
und der Verlaufskontrolle bei Tumor- und
zahlreichen anderen Erkrankungen. Ihre
Ergebnisse sind von höchster klinischer
und prognostischer Relevanz. Beispielsweise
stellen sie oft die Weichen dafür,
welche Operationstechnik oder Medikation
eingesetzt wird, um eine größtmögliche
Heilungschance zu erzielen. Die
Pathologie ist dabei einer der Wegbereiter
der Personalisierten Medizin, da über
intensive Untersuchungen an Patientengewebe
spezifische Tumorentitäten
erkannt und in individuelle Therapiestrategien
übertragen werden können.
Den Pathologen trifft – verstärkt durch
einschlägige Fernsehserien – eines der
häufigsten Missverständnisse in der
Medizin: Er arbeite mit Leichen, schwerpunktmäßig
mit solchen, bei denen ein
nicht-natürlicher Tod vorausgegangen ist.
Dies jedoch ist heutzutage nicht Fokus
der Pathologie, sondern der Rechtsmedizin.
Das Arbeitsspektrum der Pathologen
hat sich in den vergangenen 3 Jahrzehnten
gravierend gewandelt. Noch in den
frühen 70er-Jahren gehörten tatsächlich
Obduktionen und tierexperimentelle
Untersuchungen, z.B. zum Verständnis
der Krebsentstehung, zu den Hauptaufgaben.
Die Diagnostik am lebenden
Patien ten stand im Hintergrund, da es auf
Basis der damals verfügbaren Technologien
häufig zu kompliziert oder unmöglich
war, qualitativ hochwertige Gewebepräparate
zu gewinnen. Erst durch die
medizintechnischen Fortschritte in der
intravitalen Gewebegewinnung (Punktionen,
Stanzbiopsien etc.) wurde das
Arbeitsspektrum der Pathologen deutlich
erweitert. Heutzutage führen Pathologen
in Deutschland jährlich schätzungsweise
rund 30 000 Obduktionen durch.
Dem gegenüber beurteilen sie mehr als
20 Millionen Gewebe- und / oder zelluläre
Proben pro Jahr. Jede Probe, die
der Arzt heute seinem Patienten mittels
Punktions nadel, einem chirurgischen
Werkzeug oder durch eine Biopsie entnimmt,
wird vom Pathologen beurteilt.
Der Pathologe als Experte in der Krebsdiagnostik
Bei Tumoroperationen ist der Pathologe
ein wichtiger Partner des Chirurgen: In
Schnellschnittuntersuchungen, die noch
während der Operation stattfinden, wird
ein Verdacht auf Krebs innerhalb weniger
Minuten bestätigt oder entkräftet.
Abhängig vom Ergebnis wird der Operateur
dann kleinere oder ausgedehntere
Gewebeareale entfernen. Für die ausführliche
Gewebeuntersuchung existiert ein
differenziertes Methodenspektrum, mit
dem sowohl der Grad der Metastasierung
als auch biologische Prognosefaktoren
(Proteinexpression, Hormonrezeptorstatus,
Genregulation) bestimmt werden.
Nahezu alle Krebsdiagnosen werden von
Pathologen gestellt, ihre Aufgabe beinhaltet
außerdem die prognostische Einschätzung
des Krankheitsverlaufs. Keine
andere diagnostische Disziplin ist so nah
2
Ausgabe 30 • 10/2010

Patientenprobe
SpSt
Special Stains
am „Krankheitsherd“ und gleichzeitig so
treffsicher wie die histologische Beurteilung
von Gewebe. Wegen dieser hohen
klinischen Relevanz ist der Pathologe
essenzielles Mitglied eines interdiziplinären
Ärzteteams (z.B. Tumorboard) und
bestimmt entscheidend die optimale individuelle
Therapieauswahl und den Therapieerfolg
mit.
Der aufwendige Weg bis zur Diagnose
Die Methoden im pathologischen Labor
sind vielfältig (Abb. 1), teilweise sehr
aufwendig und komplex. Deshalb und in
Anbetracht der hochsensiblen diagnostischen
Fragestellungen ist die Qualitätssicherung
von entscheidender Bedeutung.
Dazu müssen Ärzte und Assistenten vom
OP-Bereich bis zum pathologisch diagnostischen
Labor „Hand in Hand“ arbeiten.
Das erstreckt sich von der Gewebegewinnung
durch den Operateur über die
Einhaltung geeigneter Transportbedingungen,
der sachgerechten Präparation
der Probe im Labor bis hin zur finalen
molekularen und histologischen Bewertung
des Gewebe- und / oder Zellmaterials
durch den Pathologen. Die kompetente
Handhabung und Prozessierung
eines Gewebes ist von größter Bedeutung
für die nachfolgenden histologischen und
zytologischen Untersuchungen.
Gewebeschnitt
auf Objektträger
~100%
H&E
Hematoxylin und Eosin
IHC
Immunhistochemie
~70–80%
10% 15% 3–4%
Finale Diagnose
Benigne oder maligne
ISH
in-situ-Hybridisierung
Abb 1: Die häufig angewandten diagnostischen Methoden eines pathologischen Labors. Nahezu
alle Gewebeschnitte werden initial einer H&E-Färbung unterzogen. Nach dieser Färbung können ca. 70 %
aller Proben final diagnostiziert werden. Bei ca. 30 % mit unklarem Krankheitsbild kommen Spezialmethoden
wie Spezialfärbungen, Immunhistochemie und in-situ-Hybridisierung zum Einsatz.
Unmittelbar nach der Entnahme setzt in
Gewebeproben die Autolyse bzw. Heterolyse
ein. Das Präparat muss daher sofort
bearbeitet oder aber fixiert werden. Die
Fixierung beugt einer potenziellen Zersetzung
der zellulären und interzellulären
Strukturen vor, meist wird Formalin, eine
gepufferte Formaldehyd-Lösung, verwendet.
Da Formalin aber einige der antigenen
Zielstrukturen zerstört, erfolgt manchmal
auch eine alkoholische Fixierung. Die
Wahl des Fixierungsmittels hängt somit
von der jeweiligen diagnostischen Fragestellung
ab. Für immunhistologische,
zytologische und molekularpathologische
Untersuchungen ist die Verwendung von
frischem Gewebe in unfixiertem Zustand
von Vorteil.
Um einen „Einblick“ in das Tumormikromilieu
zu erhalten, werden die Gewebestücke
zur Stabilisierung der Strukturen
häufig in Paraffin eingebettet. Dazu
muss eine Entwässerung des Präparats
über eine Alkoholreihe erfolgen. Der
Alkohol wird dann mit einem Intermedium,
meist toxischem Xylol, entfernt
und das Gewebe in heißes Paraffinwachs
getaucht. Anschließend stellt ein Mikroton
in einem speziellen Schnittverfahren
1 – 5 μm dicke „Gewebescheiben“ her,
die – auf Objektträger aufgebracht – über
das Mikroskop einen detaillierten Einblick
in die zellulären Gegebenheiten des
Tumors und der peritumoralen Bereiche
bieten. Meist erfolgt die mikroskopische
Begutachtung nach einer passiven (H&E
Hematoxylin und Eosin) oder spezifischen
immunhistologischen Färbung der Proteinstrukturen
bzw. auf molekularpathologischer
Ebene nach Detektion von
hochmolekularen Nukleinsäuren (DNA,
RNA).
Gewebediagnostik im Fokus der Therapiewahl
Krebs ist nicht gleich Krebs. Verschiedene
Faktoren spielen bei der Entstehung bzw.
beim Wachstum eines Tumors eine Rolle.
Ein solcher Faktor ist HER2 (Humaner
Epidermaler Wachstumsfaktor-Rezeptor
2), auch als erbB2 oder HER2 / neu
bezeichnet. Es handelt sich um ein Protein,
das zu den Thyrosinkinase-Rezeptoren
gehört. Über diese Rezeptoren
werden Signale von der Zelloberfläche in
das Zellinnere und den Zellkern weitergeleitet.
Normale Zellen besitzen nur eine
geringe Menge an HER2-Rezeptoren, bei
etwa 25 % aller Mammakarzinome jedoch
ist deren Anzahl auf der Oberfläche der
Krebszellen massiv erhöht. Es resultiert
eine gesteigerte Signaltransduktionsrate
in den Zellkern, so dass die Zellen sich
völlig unkontrolliert teilen und übermäßig
vermehren. HER2-positive Brustkrebserkrankungen
verlaufen deutlich
aggressiver. Auch beim Magenkarzinom
wurden entsprechende Mechanismen
identifiziert.
HerceptinT-Infusion
Gegen HER2 konnte ein spezifischer
Antikörper (Handelsname HerceptinT)
entwickelt werden, der gezielt in das
Krankheitsgeschehen eingreift und den
Krebs „an der Wurzel“ packt. Die Bindung
des Antikörpers blockiert den
Rezeptor; die für das Tumorwachstum
benötigten Signale können nicht mehr
weitergeleitet werden. Zusätzlich aktiviert
der Antikörper die Immunabwehr, so dass
spezifische Tumorzellen erkannt und
zerstört werden. Die Therapie mit dem
spezifischen Antikörper ist hoch effektiv
Ausgabe 30 • 10/2010 3

– aber ausschließlich bei Brustkrebspatientinnen
mit einem Übermaß an HER2-
Rezeptoren. Aus medizinischen und ökonomischen
Gründen ist es daher wichtig,
bei jeder Brustkrebspatientin eine Gewebeprobe
zu entnehmen und frühzeitig
den HER2-Status zu bestimmen. Ziel ist,
das HER2-Vorkommen auf den Krebszellen
zu quantifizieren. Bei Karzinomen
mit nur mäßig überexprimierten HER2-
Rezeptoren muss eine entsprechende
Genamplifikation nachgewiesen werden.
Die Antikörpertherapie hat die Behandlung
und Prognose bei entsprechend
geeigneten Brustkrebspatientinnen
auf eine völlig neue Stufe gestellt. Das
Ergebnis aus dem pathologischen Labor
bestimmt, ob die Ampel für diese Therapie
im individuellen Fall auf Rot oder
auf Grün steht.
Automation für standardisierte Arbeitsabläufe
Die stetig wachsenden diagnostischen
und klinischen Anforderungen an
moderne pathologische Laboratorien
können nur mit hochsensitiven, spezifischen,
zunehmend komplexen und
immer spezielleren Methoden bewältigt
werden. Letzendlich aber erfolgt die Beurteilung
des Zell- und Gewebe materials
durch Pathologen. Neben jahrelanger
Erfahrung sind für sichere diagnostische
und prognostische Aussagen auch
reproduzierbare Arbeitsschritte essenziell.
Daher steigt in pathologischen Laboratorien
der Bedarf an automatisierten
Lösungen. Seit 2008 unterstützt Roche
Tissue Diagnostics / Ventana mit automatisierten
Geräte- und Reagenzlösungen
die anspruchsvollen Aufgaben der
Pathologen.
Details zu Roche Tissue Diagnostics / Ventana
und dem Produktportfolio lesen Sie
in den Beiträgen „Engagement für die
Gewebediagnostik“ und „Präzise Informationen
zur Tumor-DNA beschleunigen
Diagnosen“ in diesem Heft.
Ihr Absprechpartner
Dr. Daniel Nummer
Produktmanagement Tissue Diagnostics
(06 21) 7 59 33 02
daniel.nummer@roche.com
Die Evolution pathologischer Methoden: Von der Makroskopie bis zum Genom
Prof. Dr. Dr. Jörg Kriegsmann, Zentrum für Histologie, Zytologie und Molekulare Diagnostik Trier
Die Gewebediagnostik hat sich durch
Weiterentwicklungen der Immunhistochemie
und der Molekularpathologie in
den letzten Jahren stetig gewandelt. Neue
Methoden lassen immer differenziertere
Aussagen z.B. bei der Tumor- oder Infektionsdiagnostik
zu. Kleinste Gewebe- und
Zellbestandteile, selbst Punktmutationen
der DNA werden sichtbar gemacht. Vollautomatisierte
Systeme und computergestützte
Workflowlösungen standardisieren
komplexe Arbeitsabläufe und minimieren
Fehler. Die dadurch erzielte Präzisierung
der Diagnosen trägt zur Verbesserung und
Ausweitung personalisierter Therapien
bei.
Über Jahrzehnte waren die Herstellung
von Paraffinschnitten und die anschließende
Färbung von Zellkern und Zellplasma
mit sauren und basischen Farbstoffen
(H&E-Färbung) die alleinigen
Werkzeuge des Pathologen, um Tumore
und andere Krankheitsprozesse über
das Lichtmikroskop zu klassifizieren.
Diese Methode wurde später durch die
Histochemie ergänzt. Damit gelang die
Darstellung von Zuckern, Schleimsubstanzen,
Hämosiderinverbindungen
oder Bindegewebsbestandteilen, d.h der
zusätzliche Nachweis typischer morphologischer
Veränderungen. Mit Einführung
der Elektronenmikroskopie
konnten auch subzelluläre Strukturen
sichtbar gemacht und diagnostische
Aussagen weiter präzisiert werden. In
der morphologischen Routinediagnostik
haben sich allerdings weitestgehend die
Immunhistochemie und die Immunzytochemie
gegenüber der Elektronenmikroskopie
durchgesetzt. Diese hochsensitiven
Techniken haben die Pathologie
revolutioniert. Sie weisen Antigene nach,
die sich auf oder in Zellen (Immunzytochemie)
bzw. im Gewebe (Immunhistochemie)
befinden.
Sichere Methoden sind Basis der
Personalisierten Medizin
Der Nachweis von Antigenen ermöglichte
es, histogenetische Tumorklassifikationen
(z.B. bei Lymphomen und Weichgewebstumoren)
zu verifizieren, zu präzisieren
oder zu revidieren – eine essenzielle Voraussetzung
für individuelle Therapiestrategien.
Auch lassen sich verschiedene
Erreger in Zellen oder im Gewebe, zu
denen neben Protozoen, Bakterien und
Pilzen auch Viren gehören, exakt identifizieren.
Virusinfektionen im Gewebe
konnten vor dem Zeitalter der Immunhistochemie
lediglich aufgrund ihrer zum
Teil spezifischen Zellveränderungen diagnostiziert
werden.
Besonders eindruckvoll ist die Rolle der
immunhistologischen Diagnostik bei der
Identifizierung therapeutischer Targetmoleküle.
Die Einführung der immunhistologischen
HER2 / neu-Testung bei
4
Ausgabe 30 • 10/2010

Mamma- und Magenkarzinomen, als
Vorrausetzung für eine HerceptinT-Therapie
bei entsprechendem Tumortyp, war
der Einstieg in die Personalisierte Medizin.
Heute erfolgt bereits bei verschiedenen
Krankheitsbildern eine individualisierte
Therapie, abhängig davon, welche
spezifischen Moleküle exprimiert werden.
Die qualitative, die semiquantitative und
die quantitative Erhebung immunhistochemischer
Parameter ist von erheblicher
therapeutischer Bedeutung. Daher war es
erforderlich, die Sensitivität und Spezifität
der Immunhistochemie zu erhöhen.
Halbautomatischen Geräten folgte die
flächenhafte Einführung geschlossener,
vollautomatisierter Systeme. Dadurch
wurden mögliche Qualitätsabweichungen
im Rahmen der technischen Bearbeitung
eliminiert. Die Entwicklung immunhistochemischer
Systeme mit kontinuierlicher
Probenzuführung folgte den Anforderungen
an moderne histopathologische
Labors: schnelle und präzise Bearbeitung
bei laufend neuem Probeneingang.
Ein Problem bei der Quantifizierung
immunhistochemischer Befunde stellt
nach wie vor die Inter- und Intra observervariabilität
dar. Diese beeinträchtigt z.T.
erheblich die Ergebnisqualität im Rahmen
der Targettherapie, da die exakte
quantitative Aussage zur Expression der
individuellen diagnostischen Targets Voraussetzung
für eine optimale Therapie ist.
Computergestützte morphometrische
Analysesysteme (z.B. Ventana Image Analysis
System / VIAS) minimieren subjektive
Fehler. Sie liefern individuelle Quantifizierungsverfahren
und unterstützen
unter anderem
O die präzise Evaluierung des
HER2 / neu-Status
O die qualitative und quantitative Beurteilung
des Hormonrezeptorstatus
O die exakte Bestimmung der Proliferationsrate
litätsmanagement. Dazu gehört z.B. die
stetige Nachverfolgbarkeit aller verwendeten
Reagenzien, einschließlich Haltbarkeitskontrollen.
Ventana BenchMark Ultra: Automatische
Bearbeitung von bis zu 30 Proben gleichzeitig
Neue Entwicklungen in der Molekularpathologie
Seit mehr als 10 Jahren ergänzt die
molekularpathologische Diagnostik das
methodische Spektrum. Im Wesentlichen
haben zwei Methoden Einzug in
den diagnostischen Alltag gehalten: die
Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) und
die in-situ-Hybridisierung. Unter Nutzung
sogenannter Bio-Chips oder -Strips
werden beide Methoden kombiniert. Die
Hybridisierung von PCR-Produkten auf
Bio-Chips ermöglicht
O die Subtypisierung von Erregern –
eine wichtige Information für die
optimale Therapiewahl
O Nukleinsäuresequenzen bis zum
einzelnen DNA-Basenaustausch kostengünstig
zu identifizieren, ohne aufwendige
Sequenzierung
Die Detektion von in-situ-Hybridisierungsprodukten
erforderte in der
Vergangenheit fluoreszenmikroskopische
Techniken. Neuere Entwicklungen
ermöglichen die Identifizierung mittels
konventioneller Lichtmikroskopie auf
Basis histochemischer Techniken. Neben
den klassischen histochemischen Detektionsverfahren
wie Peroxidase- oder alkalische
Phospahatase-Technik, kommt auch
die Immunogold-Silber-Technik (SISH)
in der diagnostischen Routine zum
Tragen. Der Pathologe kann jetzt einen
molekularpathologischen Test präzise
Die Einbindung der beschriebenen Analysenmethoden
in Pathologie-Informationssysteme
bildet eine wesentliche Basis
für das Qualitätsmanagement in großen
Pathologie-Einheiten. Effiziente Workflowlösungen
sparen durch die automatisierte,
papierlose Dokumentation
manuelle Arbeitsschritte und erfüllen die
Anforderungen an ein zeitgemäßes Quaauswerten,
ohne seinen Arbeitsplatz – das
Lichtmikroskop – zu verlassen. Das spart
Arztarbeitszeit.
ISH-Techniken erlauben nicht nur die
Detektion von Genamplifikationen sondern
auch von Translokationsereignissen.
Dafür werden simultan zwei Hybridisierungen
mit unterschiedlichen Reaktionsprodukten
durchgeführt, wobei entweder
Split-Sonden oder Fusionssonden eingesetzt
werden. Diese Methoden spielen z.B.
in der Lymphomdiagnostik aber auch in
der Beurteilung spezifischer Translokationen
in Weichgewebstumoren eine
Rolle.
Eine ganz aktuelle Innovation in der
Molekularpathologie stellen massenspektrometrische
Methoden dar. Erste
Publikationen zeigen die Anwendungsmöglichkeit
bei Gewebeschnitten. In den
vergangenen Jahren wurden bereits die
Voraussetzungen für die Durchführung
der MALDI-TOF-Massenspektrometrie*
am Paraffinschnitt geschaffen. Der neueste
Zweig dieser Entwicklung ist das
„MALDI-TOF-Imaging“. Dies gestattet
nicht nur Aussagen zum Proteom, sondern
auch spezifische Masse / Ladungsverhältnisse
bestimmten Lokalisationen
im Schnitt zuzuordnen und deren
Quantität darzustellen. Die potenziellen
Anwendungsgebiete in der Pathologie
sind vielfältig, z.B.:
O Objektivierung und Präzisierung der
Diagnose von Tumoren
O objektives Tumor-Grading
O Quantifizierung verschiedener Biomarker
O Detektion von Metaboliten im
Gewebe
O präzise Diagnose von therapierelevanten
Amyloidsubtypen
O exakte Einordnung des zeitlichen
Ablaufs degenerativer Prozesse, da
bei akuten Entzündungszuständen
oder nach Traumata andere Moleküle
exprimiert werden als in der chronischen
Phase pathologischer Reaktionen
Die Methode „in-situ-Proteomics“ wird
in der Zukunft individuelle Interpretationsmöglichkeiten
in der histopathologischen
Diagnostik ergänzen und zur weiteren
Objektivierung und Präzisierung
histopathologischer Diagnosen beitragen.
Ausgabe 30 • 10/2010 5

Zusammenfassung
Neben der konventionellen histomorphologischen
Technik haben die Histochemie,
die Elektronenmikroskopie, die Immunhistochemie
mit Automatisierung und
computerassistierter Auswertung sowie
molekularpathologische Techniken (PCR
und in-situ-Hybridisierung) und massenspektrometrische
Methoden als hochsensitive
Techniken die gewebediagnostische
Aussagekraft optimiert. Die dadurch
erzielbare Präzisierung der Diagnosen
trägt zur stetigen Verbesserung und Ausweitung
der personalisierten Therapie bei.
*MALDI-TOF-Massenspektrometrie: Matrix-assistierte
Laser-Desorptions / Ionisations-time-of-flight-Massenspektrometrie
Prof. Dr. med. Dr. Phil. Jörg Kriegsmann
Korrespondenzadresse:
Prof. Dr. med. Dr. Phil. Jörg Kriegsmann
Zentrum für Histologie, Zytologie und
molekulare Diagnostik Trier
Wissenschaftspark Trier
Max-Planck-Straße 18 + 20
54296 Trier
j.kriegsmann@patho-trier.de
Gewissheit so früh wie möglich
Dr. Gert Huesgen, synlab Medizinisches Versorgungszentrum, Leinfelden-Echterdingen GmbH
Das Ersttrimester-Screening ist eine pränatale
Untersuchung mit dem Ziel, der
Schwangeren zu einem frühen Zeitpunkt
ihrer Schwangerschaft eine zuverlässige
Kenntnis über das Risiko einer fetalen Trisomie
zu geben. Die Untersuchung hat in
den letzten 10 Jahren weite Verbreitung
gefunden, da sie kein nennenswertes
Risiko für Mutter oder Kind birgt. Die
Schwangere kann dadurch zu einem frühen
Zeitpunkt der Schwangerschaft die
möglichen Konsequenzen überdenken
und sich bewusst auf die Situation einstellen.
Zur Anwendung kommen nichtinvasive
Ultraschallverfahren sowie die
Bestimmung der zwei Schwangerschaftshormone
freies β-hCG und PAPP-A im
mütterlichen Blut.
Eine Trisomie entsteht aufgrund einer
gestörten Reifeteilung (Meiose) der
Keimzellen. Einzelne Chromosomen im
Erbgut liegen dann nicht einfach, sondern
doppelt vor. Mit der Befruchtung
entsteht schließlich eine Triploidie für
dieses Chromosom. Die häufigsten fetalen
Trisomien betreffen die Chromosomen
13, 18 und 21. Jede Schwangere trägt
ein gewisses Risiko (Hintergrund- oder
A-priori-Risiko), ein Kind mit einer Chromosomenstörung
zu gebären. Die Höhe
des Hintergrundrisikos korreliert positiv
mit dem Alter der Schwangeren und
negativ mit der Schwangerschaftsdauer,
da ca. 30 % der Feten mit Trisomie 21 und
Trisomie 21 Trisomie 18 Trisomie 13
Alter 12. SSW 40. SSW 12. SSW 40. SSW 12. SSW 40. SSW
20 1:1 100 1:1 500 1:2 500 1:18 000 1:7 800 1:42 500
35 1:250 1:350 1:600 1:4 200 1:1 800 1:10 000
42 1:40 1:55 1:90 1:650 1:280 1:1 500
Tab. 1: Hintergrundrisiko für die drei häufigsten Trisomien (SSW: Schwangerschaftswoche)
80 % der Feten mit Trisomie 13 bzw.18
zwischen der 12. und 40. Schwangerschaftswoche
versterben (Tab. 1).
Was wird untersucht und wie wird das
individuelle Risiko abgeschätzt?
Über das Screening sollen mindestens
85 % der relevantesten Chromosomenanomalie
(Trisomie 21) bei einer maximalen
falsch positiven Rate von 5 %
erkannt werden. Gemessen werden folgende
Kenngrößen:
O per Ultraschall die Scheitel-Steißlänge
des Feten, die fetale Nackentransparenz
(subkutane Flüssigkeitsansammlung
im Nacken, die bei Fehlbildungen
erhöht ist) sowie die fetale
Herzfrequenz
O die Spiegel der Schwangerschaftshormone
freies β-hCG und PAPP-A im
mütterlichen Blut
Prof. Krypos Nicolaides – Gründer der
Fetal Medicine Foundation (FMF) – und
seine Arbeitsgruppe haben den Einfluss
dieser Messgrößen bei unauffälligen
Schwangerschaften und solchen mit Tri­
somie untersucht. Evaluiert wurde auch
die Rolle anamnestischer Daten wie Körpergewicht
der Schwangeren, Ethnizität,
Raucherstatus, Parität, in-vitro-Fertilisation
und Chorionizität bei Zwillingsschwangerschaften.
Auf dieser Basis hat
die FMF einen mathematischen Algorithmus
abgeleitet, mit dessen Hilfe aus
den Daten der Patientin das persönliche
Risiko für eine fetale Trisomie ermittelt
werden kann.
Bei der Kalkulationssoftware der FMF
wird aus dem individuellen Patienten-
Messwert der untersuchten Kenngröße
und dem Median einer Referenzpopulation
ein Quotient gebildet (Multiple of
Mean oder MOM-Wert). Der Quotient
dieses normierten Messwerts aus den
Häufigkeiten in unauffälligen Schwangerschaften
und solchen mit Trisomie ist
die „likelihood ratio“ (LR). Diese wird für
jede Messgröße ermittelt. Die Multiplikation
des Hintergrundrisikos mit der LR
ergibt das individuelle Risiko der Patientin.
Parallel dazu hat die FMF-Deutschland
ein alternatives Auswerteprogramm
6
Ausgabe 30 • 10/2010

8. bis 13. SSW deutlich. Unter Berücksichtigung
dieser Tatsache ist die 11. SSW der
beste Kompromiss, wenn alle Untersuchungen
an einem Termin durchgeführt
werden (Tab. 2).
Untersuchung
in
Detektionsrate
für Trisomie 21
SSW 11 92 %
SSW 12 86 %
SSW 13 80 %
Tab. 2 : Detektionsrate für Trisomie 21 in
Abhängigkeit vom Untersuchungszeitpunkt bei
einer falsch positiven Rate von 3 %
Standardisierte Ultraschallaufnahme eines Föten
entwickelt. Die individuellen Messwerte
der Kenngrößen werden hier als Differenz
vom Median einer Referenzpopulation
(Difference of Extremness, DOE) berechnet.
Die Risikoermittlung erfolgt ebenfalls
über ein komplexes Verfahren. Auf Populationsbasis
ergeben beide Methoden vergleichbare
Ergebnisse. Im Fall von Extremen,
z.B. hohes Körpergewicht, kann
es zu divergierenden Aussagen kommen.
Entsprechende Patienten-individuelle
Anpassungen sind für das Programm der
FMF-Deutschland in Vorbereitung.
Wie wird das Ergebnis mitgeteilt?
Das Ergebnis wird als Wahrscheinlichkeit
ausgedrückt und in sogenannte Risikoklassen
eingeteilt, die unterschiedliche
Vorschläge zur weiteren Abklärung beinhalten.
O Hohes Risiko: Risiko ist 1:50 und
höher (bzw. 1:230 und höher im PRC-
Programm der FMF-Deutschland). In
diese Risikoklasse fallen etwa 1,5 %
aller Screeninguntersuchungen und
85 % aller Fälle mit Trisomie 21. Für
diese Schwangeren wird eine Empfehlung
zu invasiven Maßnahmen wie
Chorionzottenbiopsie oder Amniozentese
ausgegeben. Dabei werden
fetale Zellen für die direkte Chromosomenanalyse
gewonnen.
O Intermediäres Risiko: Risiko ist
1:51 – 1:100 (bzw. 1:231 – 1:1106 im
PRC-Programm). In diese Risikoklasse
fallen 15 % aller untersuchten
Schwangeren und 14 % aller Fälle mit
Trisomie 21. Empfohlen wird eine
erweiterte Ultraschalluntersuchung,
mit Messung z.B. des fetalen Nasenbeins,
des Kiefer-Gesichtswinkels
und / oder Parametern des fetalen
Kreislaufs. Ist das Risiko unter Bewertung
dieser zusätzlichen Kriterien
1:100 oder größer, wird ebenfalls
ein invasives Vorgehen empfohlen,
ansonsten gelten die Empfehlungen
für die Gruppe mit niedrigem Risiko.
O Niedriges Risiko: Risiko ist kleiner
als 1:1 000 (bzw. kleiner als 1:1 106
im PRC-Programm). In diese Risikogruppe
fallen 83,5 % aller untersuchten
Schwangeren und 1 % aller Fälle
mit Trisomie 21. Die Zuordnung der
Schwangeren in die niedrige Risikogruppe
schließt ein Kind mit Trisomie
zu 99 % aus. Eine invasive Abklärung
in dieser Gruppe erscheint nicht
sinnvoll, da bei einer Komplikationsrate
von 1 % mehr gesunde Kinder
geschädigt als betroffene gefunden
würden.
Wann sollte das Screening erfolgen?
Die Trennschärfe, mit der die einzelnen
Kenngrößen des Ersttrimester-Screenings
am besten zwischen betroffenen und nicht
betroffenen Schwangerschaften differenzieren
können, ist zeitlich verschieden
und verändert sich im Zeitraum von der
Wie wird die Qualität sichergestellt?
Sowohl an die Ultraschallmessungen
als auch an die Laboruntersuchungen
sind sehr hohe Qualitätsanforderungen
gestellt. Die Messgenauigkeit für die
Nackentransparenz liegt im 1/10-mm-
Bereich. Um diese Genauigkeit zu erreichen,
muss die Messung in hohem Maße
standardisiert sein. Dies betrifft den
Bildausschnitt, die Körperhaltung des
Feten, die Schnittebene der Messung
und die Positionierung der Messmarken
(Abb.).
Labore, die Untersuchungen für das Ersttrimester-Screening
durchführen (freies
β-hCG und PAPP-A), müssen neben der
Teilnahme an den UKNEQAS-Ringversuchen
nachweisen, dass
O vorgegebene Variationskoeffizienten
(CV) für die Messungen von Tag zu
Tag eingehalten werden (Tab. 3). In
Abhängigkeit von der Analytkonzentration
der Ringversuchsprobe liegen
die Grenzen der CVs bei 3 – 4 %.
Wichtiger Faktor dafür ist auch die
Qualität der eingesetzten Testmethode
(s.a. Beitrag „Ersttrimester-Screening:
Weniger invasive Untersuchungen“ in
diesem Heft).
O die gemessenen Werte im Ringversuch
innerhalb von 10 % des Methoden-
Vergleichswerts liegen
O die Mediane über alle Patientenmesswerte
des Labors innerhalb der Grenzen
von MOM 1,0 +/– 10 % liegen
Die FMF führt ein jährliches Zertifizierungs-
bzw. Rezertifizierungsverfahren
für die Ultraschalluntersucher durch,
um sicherzustellen, dass die aufgestellten
Untersuchungsregeln eingehalten
werden. Nur bei erfolgreicher Zertifizie­
Ausgabe 30 • 10/2010 7

ung wird die Risikokalkulationssoftware
mit einem Nutzungscode für weitere 12
Monate freigegeben.
Bei auffälligen Screeningergebnissen im
Ultraschall und / oder bei den Laborparametern
soll eine Dokumentation des
klinischen Ausgangs der Schwangerschaft
erfolgen. Damit können die Detektionsrate
und die falsch positive Rate als er ­
folgsrelevante Kenngrößen kontinuierlich
überprüft werden.
Zusammenfassung
Trotz intensiver Anstrengungen in den
letzten Jahren ist es noch nicht gelungen,
zuverlässig fetale Zellen oder fetale
DNA zur Abklärung von Chromosomenanomalien
aus dem mütterlichen Blut
zu gewinnen und so durch eine einfache
Blutentnahme eine definitive Aussage
vorzunehmen. Das Ersttrimester-
Screening ist jedoch dem in den 1970er-
Jahren gesetzlich etablierten, kostenfreien
Screening mittels Amniozentese für alle
Schwangeren ab 35 Jahren deutlich überlegen:
O bessere Detektionsrate für Trisomie
O großer Sicherheitsvorteil besonders
bei älteren Erstgebärenden durch
deutliche Reduktion invasiver Diagnostik
O auch Schwangere unter 35 Jahren können
von einem Screening profitieren.
Literatur:
Kypros Nicolaides: American Journal of Obstretics and
Gynecology 2004, 191, 45-67
Weitere Informationen für Ärzte und Schwangere
unter www.fetalmedicine.com und www.info@fmfdeutschland.de
Somit ist das Ersttrimester-Screening
gegenwärtig die effizienteste und risikoärmste
Pränataluntersuchung zur
Abklärung von Chromosomendefekten.
In Deutschland ist diese Untersuchung
allerdings derzeit ausschließlich als privat
zu zahlende Leistung verfügbar und wird
von daher nur von ca. 30 % der Schwangeren
genutzt.
Dr. Gert Huesgen
Korrespondenzadresse:
Dr. Gert Huesgen
synlab Medizinisches Versorgungszentrum
Leinfelden-Echterdingen GmbH
Max-Lang-Straße 58
70771 Leinfelden-Echterdingen
(07 11) 90 33-0
Gert.Huesgen@synlab.com
Produkte & Services
Engagement für die Gewebediagnostik
Der Geschäftsbereich Tissue Diagnostics
/ Ventana von Roche Diagnostics
entwickelt und produziert vollautomatische
Geräte und Reagenzien-Systeme für
die Analyse von Patientengeweben bei
Verdacht auf Krebs oder Infektionen. Alle
Bereiche der automatisierten Probenfärbung
und das Qualitätsmanagement werden
abgedeckt. Mit den Produkten des
Ventana-Portfolios arbeiten Pathologieund
Histologielabore, aber auch medizinische
und pharmazeutische Forschungszentren
in aller Welt.
Die Gewebediagnostik wird für Therapieentscheidungen
bei Krebs- und Infektionserkrankungen
immer wichtiger. Um
dieses sich schnell entwickelnde diag ­
nostische Fachgebiet weiter voran zu treiben,
steht bei Roche Tissue Diagnostics /
Ventana die enge Zusammenarbeit mit
externen und internen Experten aus den
Bereichen der pharmazeutischen und klinischen
Forschung, der Pathologie und
Onkologie im Fokus.
Die Anforderungen an moderne pathologische
Laboratorien sind in den letzten
Jahren stetig gestiegen. Probenanzahl,
Zeit- und Kostendruck nehmen zu, personelle
Ressourcen werden knapper, die
Testabläufe sind komplex. Die vollautomatisierten
Systemlösungen von Roche
Tissue Diagnostics / Ventana wurden zur
Optimierung von Laborprozessen entwickelt.
Pathologische Labore können ihre
Routineabläufe beschleunigen und individuell
abstimmen sowie reproduzierbar
und kosteneffizient bearbeiten.
Die Produkte
O SYMPHONY, eine der jüngsten Neuentwicklungen
im Systemportfolio,
ersetzt bei der Hämatoxilin-und-
Eosin-Färbung (H&E) die zeitintensive,
aufwendige und fehleranfällige
manuelle Bearbeitung der Proben.
Im Gegensatz zu gängigen Abläufen
verwendet Ventana SYMPHONY für
jede Patientenprobe frische Reagenzien
und verhindert falsche Ergebnisse
durch Verunreinigungen mit fremdem
Probenmaterial. Bei der vollautomatisierten
Probenbearbeitung auf
diesem System entfällt unter anderem
das Eindeckeln – das Abdecken des
gefärbten Gewebeschnittes mit einem
Deckgläschen. Ventana SYMPHONY
hilft, Produktivität, Sicherheit und
Qualität der Diagnostik zu steigern.
8
Ausgabe 30 • 10/2010

O Die Färbesysteme BenchMark, Bench-
Mark XT und BenchMark ULTRA
automatisieren sämtliche Schritte der
Immunohistochemie (IHC), Fluoreszenz-IHC
(FIHC), in-situ-Hybridisierung
(ISH), Fluoreszenz-ISH (FISH)
und Silber-ISH (SISH). Das steigert
Probendurchsatz und Ergebnissicherheit.
BenchMark ULTRA ermöglicht
darüber hinaus die simultane Bearbeitung
aller Patientenproben zu jeder
Zeit, wodurch das Labor ein hohes
Maß an Flexibilität erreicht.
O VANTAGE, das neue elekronische
Systemmanagement, steuert die
Kommunikation zwischen allen Automationseinheiten
eines Labors. Dies
bedeutet einen neuen Standard für
kontrollierte Arbeitsabläufe und den
nachfolgenden Informationsaustausch
zwischen einzelnen Arbeitsstationen.
Die eindeutige Identifizierung der
Patientenproben zu jeder Zeit optimiert
den Workflow und erhöht die
Sicherheit in der Routine. Gerade
bei einem höheren Probendurchsatz
bedeutet VANTAGE einen großen
Fortschitt für das Qualitätsmanagement
und schafft Freiräume für die
eigentliche Diagnostik.
Das Portfolio von Roche Tissue Diagnostics
/ Ventana für das pathologische
Workflow
Histologie
Primärfärbung
Beschreibung
Roche
Produkte
Probenbearbeitung
Fixierung,
Schneiden
Morphologie
z.B. H & E
SYMPHONY
Labor umfasst neben Geräten und Softwarelösungen
auch vollautomatisierte
ISH-Testmethoden sowie viele Antikörper
und Sonden für die Untersuchung
von Gewebeproben (Abb. 1).
Das Team
Kompetenz und Kundennähe – diesem
Leitgedanken folgt das Team von Roche
Tissue Diagnostics / Ventana (Abb. 2). Die
Mitarbeiter der drei regionalen Verkaufsteams
im Norden, Westen und Süden sind
vor Ort – in pathologischen Laboren und
NexES
„Advanced
Staining“
Protein/DNA Tests
(IHC/ISH/FISH/FITC)
z.B. Pathway HER2
Workflow Management VANTAGE
Abb. 1: Produktportfolio von Roche Tissue Diagnostics / Ventana
BenchMark Serie
Automatische
Bildanalyse und
Archivierung
Software und
Mikroskopie
VIAS
Forschungsinstituten – im Einsatz. Unterstützt
durch die Funktionen Marketing
und Produktmanagement, Service-Hotline
und Logistik in Mannheim werden
die Anforderungen und Wünsche der
Kunden schnell und kompetent bearbeitet.
Zur umfassenden und hochqualitativen
Betreuung sind unterschiedliche
Kompetenzen im Team vereint. Auf diese
Weise werden die Bereiche Immunhistochemie,
in-situ-Hybridisierung, Systeme
sowie Lösungen für die H&E-Färbung
und für den Workflow abgedeckt. Die
enge Zusammenarbeit mit dem Applikations-
und technischem Serviceteam sorgt
für professionelle Unterstützung im Kundenlabor.
Sie haben Fragen zu unseren Systemen
und Reagenzien, zur Labororganisation
oder zu Workflow-Lösungen? Dann sprechen
Sie uns an!
Ihr Ansprechpartner:
Dr. Ines Sauer
Leitung Marketing Tissue Diagnostics
(06 21) 7 59 22 31
ines.sauer@roche.com
Abb 2: Das Team von Roche Tissue Diagnostics / Ventana (von links nach rechts):
Hinten: Dr. Frank Unterseher, Holger Schlaszus, Dr. Jörg Dosch, Jan Schreiber, Karin Steybe
Mitte hinten: Michael Götzl, Dr. Katja Erlach, Stefan Reininghaus, Dr. Melanie Kaiser, Adnan Sabbah,
Sarah Bölke, Nicole Reinhold
Mitte vorne: Thomas Fengel, Gabriele Poplutz, Sylvia Katzke, Dr. Ines Sauer, Meike Leutke, Christiane
Linßner, Dr. Daniel Nummer
Vorne: Dr. Piotr Kos, Kevin Knecht, Markus Bierod
Nicht auf dem Bild: Karleen Benney-Wagner, Emmeran Elahi, Carsten Kässner, Thomas Märsch, Marco
Schnaars, Carlo Sirna, Todd Templar, Christian Voike, Monika Vosen, Torben Wolf, Hannah Zepp
Ausgabe 30 • 10/2010 9

Präzise Informationen zur Tumor-DNA beschleunigen Diagnosen
Für Patienten, die mit der Diagnose Brustoder
Magenkrebs konfrontiert werden,
fühlt sich die tage- oder sogar wochenlange
Wartezeit auf verlässliche Testergebnisse
wie eine Ewigkeit an. Ärzteteams
sind sich darin einig, dass die
schnelle und exakte Diagnosestellung für
einen gezielten Therapieplan von entscheidender
Bedeutung ist. Vor diesem
Hintergrund hat Roche Tissue Diagnostics
den INFORM HER2 Dual ISH DNA Probe
Cocktail Assay entwickelt.
Brustgewebe
Dual Colour ISH
Chr. 17
HER2
Der HER2-Status ist bei Brust- und
Magenkrebs therapieentscheidend. Ziel
der pathologischen Laboren ist es daher,
das HER2-Vorkommen auf den Krebszellen
zu quantifizieren und zu analysieren,
ob HER2 massiv vermehrt ist. Bei mäßig
überexprimierenden Karzinomen muss
noch eine entsprechende Genamplifikation
nachgewiesen werden. Die Genamplifikation
wird durch SISH (Silber
in-situ-Hybridisierung), duale ISH oder
durch FISH (Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung)
dargestellt. Die Ergebnisse
der SISH Färbung zeigen eine sehr hohe
Korrelation mit der „klassischen“ FISH-
Methode. Darüber hinaus sind aber bei
der SISH Technologie die morphologisch-zellulären
Informationen aufgrund
der chromogenen Färbung auswertbar. 1)
Der neue HER2-Dual-ISH-Assay ist das
Ergebnis einer kontinuierlichen Weiterentwicklung
von Molekularsonden und
Nachweissystemen durch Roche Tissue
Diagnostics. Die Sonden – eine für
das Gen, die andere für das Chromosom
– werden in einem einzigen Dispenser
zu einem Cocktail gemischt. Der
Assay umfasst das bewährte SISH- und
ein neuartiges Red Chromogenic (Red
ISH)-Nachweissystem, womit sowohl
das HER2-Gen als auch die Genkopien
von Chromosom 17 in einem einzigen
Gewebeschnitt sichtbar werden (Abb. 1).
Die Dual-Colour-ISH-Tests werden
am Lichtmikroskop ausgewertet, der
Gen- und der Chromosomen-Status der
Zellen können simultan und im vollständigen
Gewebe-Morphologiekontext
bestimmt werden. Die Tests visualisieren
die hybridisierten Zielstrukturen also
durch Kombination der SISH mit einer
Abb. 1: Vergleich der HER2- / Zentromer-Färbung in tumorfreiem Kontroll-Brustgewebe (links)
und primärem Tumor-Brustgewebe (rechts). Die HER2-Überexpression im Tumorgewebe (schwarze
Silberpartikel) ist deutlich zu erkennen. Rot: Chromosom-17-Färbung.
Enzym-basierten chromogenen Detektion
auf dem gleichen Objektträger. Die
zweifache Färbung zeigt eine SISH-markierte
Sonde und eine Rot-markierte Zentromersonde.
Durch die gleichzeitige Darstellung beider
Signale in einem Präparat wird die
Bestimmung des HER2-Genstatus präziser,
da der Pathologe Informationen über
die gesamte Tumormorphologie erhält
und sicher sein kann, dass er nur die Signale
innerhalb des relevanten Bereichs
des Tumorgewebes erfasst.
Silber
in-situ-Hybridisierung
HER2
Duale Silber
in-situ-Hybridisierung
Der HER2-Dual-ISH-Assay wird vollautomatisiert
auf den Ventana-BenchMark-
Geräten eingesetzt. Er verbessert den
Arbeitsablauf in Pathologielabors, weil
sich die erforderlichen Ressourcen und
die Bearbeitungszeit von der Probenvorbereitung
bis zur Bewertung durch
den Pathologen auf 11 – 15 Stunden reduzieren.
Dies ist ein großer Fortschritt im
Vergleich zur überwiegend manuellen
FISH, die 24 – 36 Stunden dauern kann.
Der vollautomatisierte HER2-Dual-ISH-
Assay ist ein Test, der über Nacht und
ohne Aufsicht ablaufen kann. Die Gewe­
Cocktail Duale Silber
in-situ-Hybridisierung
SISH DS-ISH DD-ISH
Chr17
getrennte
Hybridisierung
HER2
Chr17
sequnzielle
Hybridisierung
HER2
Chr17
simultane
Hybridisierung
2 Objektträger 1 Objektträger 1 Objektträger
> 6h TAT > 16h TAT ~ 11h TAT
Abb. 2: Die Vorteile des neuen Sonden-Cocktails für Brust- und Magenkarzinom
(TAT = Turn-around-time)
verbesserte
Morphologie
10
Ausgabe 30 • 10/2010

eschnitte werden am Tag vorbereitet
und am Abend in das Gerät eingelegt,
am nächsten Morgen stehen sie zur Auswertung
durch den Pathologen bereit. Die
Vorteile des Sonden-Cocktails und der
automatisierten Bearbeitung zeigt Abb. 2.
dass er die Anforderungen und Erwartungen
der Kunden erfüllt. Die Einführung
erfolgte außerhalb der USA Ende Juni
2010 als CE-gekennzeichnetes in-vitro-
Diagnostikum.
Ihr Ansprechpartner:
Stefan Reininghaus
Key Account Produktspezialist Reagenzien
(01 73) 58 61 934
stefan.reininghaus@roche.com
Der HER2-Dual-ISH-Assay hat nachweislich
eine sehr hohe Übereinstimmung
mit den etablierten FISH-Tests, und die
Ergebnisse sind von Labor zu Labor
reproduzierbar. 2) Der Assay wurde während
der Entwicklung intern und extern
ausgiebig geprüft, um zu gewährleisten,
Literatur:
1) McElhinny A. et al: Breast Cancer Symp, 2009,
Abstract 54
2) J.M.S. Bartlett et al: Cancer Res. 2009, 69 (24
Suppl): Abstract 6011
Maßgeschneidertes LIS-Modul für die Pathologie
Die Untersuchung von Gewebeproben
zählt zu den wichtigsten und zugleich
komplexesten Bereichen der Labordiagnostik.
Entscheidend für eine erfolgreiche
Behandlung des Patienten ist die akkurate
Dokumentation der Befunde und ihre
schnelle Verfügbarkeit für den behandelnden
Arzt. Das jüngste Produkt des
SWISSLAB Laborinformationssystems
(LIS) ist ein Modul, das die Arbeitsprozesse
im Pathologie-Labor effizienter
gestaltet, weil es den speziellen Workflow
perfekt abdeckt und dafür sorgt, dass alle
Arbeitsschritte von der Präparation bis zur
Berichterstellung reibungslos organisiert
werden.
Die diagnostische Informationsplattform
von Swisslab ist modular aufgebaut
und bildet neben den Arbeitsplätzen
im Zentrallabor auch Spezialbereiche
wie Mikrobiologie, Transfusionsmedizin
oder Neugeborenen-Screening ab.
SWISSLAB
Zentrallabor
Klinische Chemie
Immunologie
Hämatologie
Gerinnung
Urinanalytik
SWISSLAB – die diagnostische Informationsplattform
SWISSLAB
Mikrobiologie
Bakteriologie
Virologie
Serologie
Hygiene
Parasitologie
Das neue SWISSLAB Modul Pathologie
umfasst die zentrale Datenverwaltung –
einschließlich Bilddateien der Proben –
und eine integrierte Schnittstelle für eine
Diktat-Software. Der Pathologe diktiert
seinen Befund direkt am Mikroskop. Mit
der speziellen Software können die Diktate
unmittelbar nach Abschluss abgerufen
und transkribiert werden. Zugleich
wird die Gutachtenerstellung erleichtert:
Der „Arztdialog“ bietet eine Übersicht
über alle Vorbefunde des Patienten aus
unterschiedlichen Laboren. Individuelle
Formatierungsmöglichkeiten, Textbausteine,
eine automatische Fehlerkorrektur
und die Speicherfähigkeit im Microsoft-
Word-Format erleichtern die Befundbeschreibung.
Es ist möglich, Gutachten
und Konziliarbriefe automatisch an vordefinierte
Einsender zu verschicken. Auch
SWISSLAB
Transfusionsmedizin
Blutgruppenserologie
&
Blutdepot
Spende & Herstellung
HLA Labor
Stammzellen
SWISSLAB Funktionen
SWISSLAB
Pathologie
Histologie
Zytologie
Gynäkologische
Zytologie
Autopsie
SWISSLAB
Speziallabore
Spezialimmunologie
Neugeborenen
Screening
Psychopharmakologie
PCR Labor
... und weitere
Dokumentendatenbank Abrechnung Statistik Regelwerk Befundgestaltung Probenarchiv
LIS-Portfolio von Swisslab
LAURIS Order Communication System
Krankenhausinformationssystem
bei der Abrechnung leistet das Modul
Hilfe, indem es alle Leistungen bereits
im Labor und beim Arzt erfasst. Zugleich
lässt es sich flexibel konfigurieren, d.h.
individuellen Anforderungen anpassen.
Langjährige Markterfahrung
Seit 1979 bietet Swisslab Laborinformationssysteme
(LIS) für Großlabore und
Universitätskliniken an. Das Unternehmen
mit Sitz in Berlin ist für LIS einer
der führenden Anbieter in Europa. In
Deutschland z.B. arbeiten über 60 % der
Universitätskliniken mit dem LIS von
SWISSLAB. Im Dezember 2008 übernahm
Roche Diagnostics die Swisslab
GmBH als 100-prozentige Tochter und
erweiterte damit das eigene Portfolio an
IT- und Workflowlösungen für hochautomatisierte
Großlabore.
Ausgabe 30 • 10/2010 11

Das SWISSLAB LIS sorgt in großen Einrichtungen
mit sehr hohem Probenaufkommen
– nicht selten mehrere Millionen
Proben pro Jahr – für effiziente Prozesse
und den reibungslosen Austausch von
Informationen – ein Schlüsselfaktor in
der immer komplexeren Laborlandschaft.
Eine besondere Stärke dieser Laborsoftware
liegt darin, Zentral-, Satelliten- und
Speziallabors, die oft räumlich getrennt
sind, über ein einheitliches LIS auf einer
zentralen Datenbank abzubilden und
damit alle Informationen zu einem Patienten
in den Labors oder auf Station
zugänglich zu machen.
Einzelne Module können problemlos
in ein bereits bestehendes SWISSLAB
LIS integriert werden. Die Kombination
der einzelnen LIS-Module von Swisslab
nach den hauseigenen Erfordernissen
ermöglicht einen ganzheitlichen, interdisziplinären
Blick auf den Patienten und
unterstützt eine schnellere und präzisere
Diagnosefindung.
Besuchen Sie Swisslab
auf der Medica
(17. – 20.11.2010 in Düsseldorf)
in der IT-Halle Nr. 15, Stand E32.
Ihre Ansprechpartnerin:
Beate Kießling
Marketing & Sales SWISSLAB
(030) 62 601 136
beate.kiessling@swisslab.roche.com
www.swisslab.com
Ersttrimester-Screening: Weniger invasive Untersuchungen
Das Ersttrimester-Screening unter Beteiligung
der biochemischen Parameter
PAPP-A und free βhCG erreicht bei
95 % Spezifität eine so hohe Detektionsrate,
dass die Zahl der invasiven Untersuchungen
deutlich reduziert werden
konnte. 1, 2) Voraussetzung dafür waren die
Qualitätsstandards der FMF (Fetal Medicine
Foundation); die jetzt verfügbaren
ElecsysT Assays erfüllen deren Anforderungen.
Zusätzlich ist eine weitere Konsolidierung
von qualitativ hochwertigen
Tests auf den immunologischen Systemen
von Roche möglich.
PAPP-A (Pregnancy associated Plasma
Protein A) und freies βhCG (humanes
Choriongonadotropin) sind Glykoproteine,
die vom plazentaren Trophoblasten
synthetisiert und im mütterlichen Blut
gemessen werden. Beide Parameter zeigen
einen charakteristischen Verlauf während
der Schwangerschaft. PAPP-A ist ab der
6. Schwangerschaftswoche (SSW) nachweisbar
und steigt bis zum Ende der Schwangerschaft
an. Bei Schwangerschaften mit Trisomie
21 sind die Werte im ersten Trimenon
niedriger (ca. 0,5 MOM*). Freies βhCG ist
bereits etwa 10 Tage nach der Ovulation
nachweisbar. Es erreicht in der 8. – 10. SSW
einen Peak, fällt dann kontinuierlich ab und
geht im 3.Trimenon in ein Plateau über. Bei
Schwangerschaften mit Chromosomenaberrationen
werden erhöhte Werte gemessen
(ca. 2.0 – 2,5 MOM*).
Beim Ersttrimester-Screening wird aus
jeweils mehreren Parametern der bildgebenden
und der biochemischen Untersuchungen
und unter Berücksichtigung anamnestischer
Daten das individuelle Risiko
der Schwangeren für eine Schwangerschaft
mit Trisomie 21 (Down-Syndrom) oder
anderen Chromosomenanomalien ermittelt.
Das Ergebnis dieser Risikokalkulation
entscheidet darüber, ob eine weiterführende
Diagnostik mit invasiven Verfahren
empfohlen wird (s.a. Beitrag „Gewissheit
so früh wie möglich“). Da invasive Ver­
cobas e Systeme
KRYPTOR
cobas e Systeme
KRYPTOR
0
0
10
1
20
2
30
fahren eigene Risiken bergen, gilt es, das
Nutzen-Risiko-Verhältnis abzuwägen.
Essenziell für die valide Risikoabschätzung
ist, dass jeder einzelne Parameter
des Ersttrimester-Screenings mit höchster
Qualität ermittelt wird. In der Vergangenheit
waren die Ergebnisse des sog. Downscreenings
(erstes und zweites Trimester)
nicht zuverlässig genug, um als erste Stufe
der invasiven Fruchtwasseruntersuchung
vorgeschaltet zu werden. Erst die Einführung
von Zertifizierungsverfahren der
FMF Deutschland und der FMF England
machte die Untersuchungen deutlich
1, 3)
zuverlässiger und vergleichbarer.
Roche kann mit den neuen Assays ElecsysT
PAPP-A und ElecsysT free βhCG einen weiteren
wertvollen Beitrag für die Schwangerschaftsdiagnostik
leisten. Beide Tests
wurden ausgiebig evaluiert und mit etablierten
Assays verglichen (Abb. 1). ElecsysT
PAPP-A und ElecsysT free βhCG erfüllen
mit einem Variationskoeffizienten von
40 50 60
Detektionsrate [%]
65,6
70
3 4 5 6 7
Falsch positiver Anteil [%]
75,0
80 90 100
8 9 10
Abb 1: Richtig positive (oben) und falsch positive (unten) Ergebnisse von ElecsysT free βhCG
(grün) und ElecsysT PAPP-A (grau) bei der Risikoabschätzung auf Trisomie 21 von 1047 Schwangeren.
Vergleich mit einem zweiten kommerziellen Test (Mulitcenter-Evaluierung Roche Diagnostics, 2009)
5,8
7,7
12
Ausgabe 30 • 10/2010

Elecsys /
cobas e Systeme
KRYPTOR/
K. compact
DELFIA Xpress/
AutoDELFIA
IMMULITE
FMF-Anforderung
* MOM (Multiple of Mean): Wert für die Abweichung
des individuellen Schwangerschaftswertes
von einer Referenzpopulation
Literatur:
1) Merz et al: Der Gynäkologe, 2006, 39, 847-853
2) Kozlowski P.: Ultraschall Med 2008, Apr. 29 (2)
3) Nicolaides KH et al: Ultrasound Obstet Gynecol,
2005, 25, 221-226
free βhCG
PAPP-A
0
etwa 3 % voll die FMF-Anforderungen,
die für Routinemessungen bei 6 % liegen
(Abb. 1). Die Tests haben die Zertifizierung
beider Institutionen er halten.
Erstklassige Präzision und Reproduzierbarkeit
der Werte – dafür steht die Kombination
aus Elektrochemilumineszenzund
Biotin-Streptavidin-Technologie
seit über 10 Jahren.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Maximaler Gesamt-VK in % (Mittlere Konzentrationsbereiche)
Abb.2: Variationskoeffizienten verschiedener kommerzieller PAPP-A und free βhCG-Tests
(Zusammenstellung aus den einzelnen Packungsbeilagen)
Die Parameterpalette für die Schwangerschaftsdiagnostik
mit dieser qualitativ
hochwertigen Technologie umfasst neben
den etablierten Tests jetzt auch die Parameter
ElecsysT PAPP-A und ElecsysT free
βhCG für das Ersttrimester-Screening
und die Parameter ElecsysT PlGF und
ElecsysT sFlt1 für die Abklärung einer
Präeklampsie.
Ihre Ansprechpartnerin:
Dagmar Winnefeld
Produktmanagement Immunologie
(06 21) 7 59 48 20
dagmar.winnefeld@roche.com
Weil „einfach“ sicher ist – Reagenz einlegen und starten!
Der Laboralltag ist vielfach von Routine
geprägt, angefangen von der Reagenzlogistik
über die Vorbereitung der Reagenzien
bis hin zur Bestückung der Systeme.
In vielen Fällen sind diese Tätigkeiten zeitaufwendig
und führen je nach Gerätepark
zu komplexen Arbeitsschritten. Das
cobasT Reagenzkonzept für die Klinische
Chemie und die Immunologie geht neue
Wege, es bietet Flexibilität und vereinfacht
die Laborroutine erheblich.
Die cobasT Reagenzien für den Serumarbeitsplatz
sind in kompakten Kassetten
abgefüllt, für die Klinische Chemie in die
cobas c packs (Abb. 1), für die heterogene
Immunologie in die cobas e packs
Abb. 1: cobasT Reagenzkassetten für die Klinische
Chemie (c pack)
(Abb. 2). Folgende Eigenschaften und
Vorteile kennzeichnen das cobasT Reagenzkonzept:
O Die Analytik kann sofort starten,
kein Mischen und Vorbereiten mehr.
cobasT Reagenzien sind sofort verwendbar:
Kassetten einsetzen und mit
den Analysen starten. Diese einfache
Handhabung spart Zeit und gibt
Sicherheit, weil sie Fehler im Umgang
mit Reagenzien vermeidet.
O Wenn es schnell gehen muss – Resultate
mit den STAT-Testvarianten
innerhalb von 9 Minuten verfügbar.
Unabhängig davon, ob eine Notfallprobe
in nur 9 Minuten oder ein Routine-Test
in 18 Minuten durchgeführt
Abb. 2: cobasT Reagenzkassette für die heterogene
Immunologie (e pack)
werden soll, für zeitkritische Anforderungen
gibt es bei den immunologischen
Parametern bedarfsadaptierte
Applikationen.
O Weniger manuelle Verdünnungen
erhöhen die Ergebnissicherheit. In
der täglichen Laborarbeit machen
hohe Analyt-Konzentrationen häufig
Verdünnungsschritte notwendig. Dies
kostet Zeit und Geld, außerdem birgt
jeder manuelle Schritt ein potenzielles
Kontaminationsrisiko, da Nachverdünnungen
oft manuell durchgeführt
werden müssen. cobasT Reagenzien
kombinieren hohe Sensitivität mit
weiten Messbereichen, um das Risiko
der Kontamination so gering wie
möglich zu halten.
O Die hohe Haltbarkeit der cobasT Reagenzien
reduziert Reagenzverfall. Die
cobasT Kassetten sind mehr als nur
einfache Reagenzbehälter. Spezielle Entlüftungssysteme
in den cobas c packs
large verhindern Schaumbildung. Die
cobasT Reagenz behälter sind so entwickelt,
dass der Einfluss von Sauerstoff
und CO 2 minimiert wird. Dies stellt
eine lange on-board-Stabilität der Reagenzien
– parameterabhängig zwischen
14 und 180 Tagen – sicher.
Ausgabe 30 • 10/2010 13

O Die Wertelage bei Chargenwechsel
bleibt konstant. Die interne Qualitätskontrolle
bei Roche sorgt für
eine hohe Chargenkonstanz. Dies
garantiert bei Verlaufskontrollen mit
therapiekritischen Parametern die
Zuverlässigkeit, die klinische Entscheidungen
benötigen.
O In der cobas e library sind jederzeit
die aktuellen Packungsbeilagen
verfügbar. cobas e link schafft eine
direkte Verbindung zwischen Labor
und Roche. Dies garantiert rund um
die Uhr den Zugriff auf die aktuellsten
Informationen.
O Kompakte Reagenzkassetten sparen
Lagerfläche. Große Kühlräume als
Reagenzlager gehören der Vergangenheit
an. Mit dem platzsparenden Kassettenständer
(Abb. 3) können bis zu
1 000 Tests pro Liter Lagerraum untergebracht
werden. Ein einziger handelsüblicher
Kühlschrank bietet somit
ausreichend Platz für mehr als 300 000
klinisch-chemische und immunologische
Tests.
Abb. 3: Aufbewahrungsständer für cobasT-
Reagenzkassetten
O Verbrauchsadaptierte Reagenzkassetten
bedienen unterschiedliche
Anforderungen. Neben dem Standard
cobas c pack gibt es für mehr als 80
Hochvolumenparameter der Klinischen
Chemie das cobas c pack large.
Das bedeutet z.B. bei dem Parameter
Alanine-Aminotransferase statt der
üblichen 500 Bestimmungen pro Kassette
1 100 Bestimmungen. Bei hohem
Anforderungsaufkommen in Hochdurchsatzlaboren
müssen Reagenzkassetten
somit weniger häufig nachgeladen
werden, bei geringerem Bedarf
wird ein Reagenzverfall vermieden.
O Mehr als 180 Parameter verhelfen
zur Konsolidierung des Workflows.
Die Verfügbarkeit dieses breiten Parameterportfolios,
kombiniert mit der
langen Haltbarkeit der Reagenzien,
ermöglicht es, auch seltene Anforderungen
auf der Routineplattform zu
bearbeiten und eine maximale Konsolidierung
zu erreichen.
O Die Testergebnisse sind innerhalb
der Systemfamilie vergleichbar. Die
modularen Systemkomponenten der
cobasT modular platform mit insgesamt
48 möglichen Konfigurationen
sind die Basis einer maßgeschneiderten
Systemlösung für jeden Labortyp.
Die cobasT Reagenzien dagegen sind
innerhalb der Systemfamilie universell
einsetzbar. Das bedeutet absolut
vergleichbare Ergebnisse – essenziell
z.B. für Laborverbünde oder Back-up-
Lösungen. Darüber hinaus vereinfacht
das einheitliche Konzept die Reagenzlogistik
innerhalb kooperierender
Labors erheblich.
Das cobasT Reagenzkonzept ist in puncto
Effizienz, Zuverlässigkeit und Sicherheit
wegweisend. Mehr als 180 Parameter stehen
bereits zur Verfügung, darunter innovative
Biomarker z.B. aus den Bereichen
Schwangerschaftsvorsorge, Endokrinologie,
Kardiologie oder Infektionsdiagnostik,
die neue diagnostische Möglichkeiten
eröffnen. Roche, als eines der forschungsintensivsten
Gesundheitsunternehmen
weltweit, wird das Parameterportfolio
der cobasT Reagenzlinie auch zukünftig
mit medizinisch wertvollen Produkten
erweitern.
Ihr Ansprechpartner:
Dr. Marc Böhm
Produktmanagement SWA und Gerinnung
(06 21) 7 59 36 40
marc.boehm@roche.com
Erkennen, wenn Heparin zur Gefahr wird
Die Behandlung mit Heparin zur Therapie
oder Prophylaxe thromboembolischer
Ereignisse birgt die Gefahr einer
Heparin-induzierten Thrombozytopenie
(HIT). Zwei Ausprägungstypen sind
bekannt: Während sich der Typ1 mit
mäßigem und spontan reversiblem
Thrombozytenabfall präsentiert, ist der
Typ2 eine schwerwiegende Komplikation
immunologischer Ätiologie. Als Folge
der Immunreaktion verklumpen Thrombozyten
und werden aktiviert, es resultieren
Thrombosen im venösen und arteriellen
System. Da Heparin derzeit immer
noch das am häufigsten eingesetzte
Antikoagulans in der Behandlung v.a.
stationärer Patienten darstellt, ist HIT
Typ2 mit einer Häufigkeit von 1 – 5 % bei
Therapie mit unfraktionierten Heparinen
bzw. von 0,1 – 0,5 % bei Gabe von niedermolekularen
Heparinen kein exotisches
Ereignis. 1) Bei HIT Typ2 können alle Antikörperklassen
auftreten, pathogen sind
allerdings fast ausschließlich die der
Klasse IgG. Für die Diagnostik ist daher
die sensitive und spezifische Erkennung
der IgG-Antikörper besonders wichtig,
um rechtzeitig therapeutische Alternativen
ergreifen zu können. Diese Anforderung
erfüllt der neue Test AsserachromT
HPIA IgG.
HIT Typ2 ist die kritischste Komplikation
einer Heparinbehandlung; Blutungen
sind meist nur in therapeutischen
Heparindosierungen klinisch relevant.
14
Ausgabe 30 • 10/2010

Ursache ist eine Immunreaktion gegen
den Komplex aus Plättchenfaktor 4
(PF4), der aus Thrombozyten sezerniert
wird und dem zugeführten Heparin. Es
entstehen große PF4 / Heparin-Komplexe,
die Thrombozyten über FCγIIa-
Rezeptoren quervernetzen und aktivieren.
Neben einer dadurch initiierten weiteren
Freisetzung von PF4 aus thrombozytären
Granula, entstehen bei der Thrombozytenaktivierung
auch prokoagulatorische
Mikropartikel (s.a. „Diagnostik im Dialog
29 “, Juli 2010). All diese Vorgänge führen
schließlich nicht nur zur Plättchenaggregation,
sondern auch zur Thrombin- und
damit Thrombusbildung. Die Symptome
der HIT Typ2 treten typischerweise zwischen
dem 5. und 14. Behandlungstag
auf. 1) Das Ausmaß der venösen und / oder
arteriellen Thrombosen bestimmt die
Schwere der Erkrankung. Das Letalitätsrisiko
der HIT Typ2 liegt bei 6 – 10 %;
ebenso hoch ist das Risiko für den Verlust
einer Extremität. 1)
Entscheidenden Einfluss auf den Verlauf
einer HIT Typ 2 haben die frühzeitige
Diagnose und die daraus abgeleitete
Therapie. Wird eine HIT Typ2 festgestellt,
muss die Gabe von Heparin sofort beendet
und der Patient mit einem alternativen
Antikoagulans therapiert werden. In
Frage kommen hierfür neben Danaparoid
(OrgaranT) die direkten Thrombin-Inhibitoren
Lepirudin (RefludanT) und Argatroban
(ArgatraT). Diese Medikamente
sind bei bestehender bzw. vermuteter HIT
Typ2 zugelassen.
Das individuelle Risiko eines Patienten
für eine HIT Typ2 wird mit dem sog.
4T-Score (Thrombocytopenia, Timing,
Thrombosis, oTher causes of thrombocytopenia)
abgeschätzt. 2) Bei hoher klinischer
Wahrscheinlichkeit (≥4 Punkte)
sollte die Therapieentscheidung über
einen sensitiven und spezifischen Labortest
unterstützt werden.
Testformate für die in-vitro-Diagnostik
Funktionelle Tests, wie der SRA (serotonin-release
assay) oder der HIPA (heparin-induced
platelet activation)-Test,
bestimmen ausschließlich die Plättchenaktivierenden
Antikörper. Der SRA-Test
ist der Goldstandard der HIT-Diagnostik,
jedoch ist die Durchführung technisch
sehr anspruchsvoll, zeitintensiv
und bedarf radioaktiver Teilchen. Auch
der HIPA-Test ist wenig routinetauglich,
deshalb bleiben beide Methoden Speziallaboren
vorbehalten.
1 3
PF4/Heparin Komplex
Mikrotiterplatte
2 Anti-PF4/Heparin IgG 4
aus der Patientenprobe TMB
Inkubation: 1 Stunde
Testprinzip von AsserachromT HPIA IgG
Immunologische Tests: Die ELISA-Methoden
sind deutlich schneller und technisch
einfacher durchzuführen (Abb.). Es gibt
sowohl Antigen-Tests, die unspezifisch
alle Antikörperklassen (IgG, IgM und
IgA) gegen den PF4 / Heparin-Komplex
detektieren, als auch Tests, die spezifisch
die pathogenen IgG-AK nachweisen. Der
neue ELISA-Test AsserachromT HPIA
IgG arbeitet mit vorbeschichteten Mikrotiterplatten
und erfasst im Gegensatz zu
AsserachromT HPIA ganz spezifisch nur
die HIT-Antikörper der Klasse IgG. Die
Spezifität für den Nachweis einer klinisch
relevanten HIT Typ2 liegt bei 92,7 %, die
Sensitivität bei 100 %. 3) Mit AsserachromT
HPIA IgG kann die Rate „falsch positiver
Ergebnisse“ – bezogen auf die klinische
Relevanz – im Vergleich zu AsserachromT
HPIA gesenkt werden, ohne erwarten zu
müssen, dass falsch negative Ergebnisse
auftreten.
AsserachromT HPIA IgG schafft auch
außerhalb spezialisierter Labore die
Chance, diagnostisch schnell und sicher
klinische Anzeichen einer möglichen HIT
Typ2 abzuklären, um die richtigen antikoagulatorischen
Therapieentscheidungen
treffen zu können.
Inkubation: 1 Stunde
TMB
Farbentwicklung
bei 450 nm
Markierte
Anti-Mensch
IgG Antikörper
Literatur:
1) Greinacher et al: Orphanet Encyclopedia http://
www.orpha.net/data/patho/GB/uk-HIT.pdf, 2003
2) Lo et al.: J Thromb Haemost 2006; 4, 759-64
3) Elalamy et al: Poster GEHT, Toulouse, 2009
Ihr Ansprechpartner:
Dr. Frank Gast
Produktmanagement Gerinnung
(06 21) 7 59 46 18
frank.gast@roche.com
Ausgabe 30 • 10/2010 15

Produktnews
Übersicht über Neueinführungen und Produktverbesserungen
Produktlinie Produkt Geräte Anwendungszweck /
Produktverbesserung
Klinische
Chemie
Software 05-01 cobasT 6000 modular analyzer series • Anwenderdefiniertes Ausschleusen
einzelner Racks
• Spezifizierte Serumindex-Meldungen
Control Set Dat Clinical
cobasT modular platform:
cobas c 311 / cobas c 501 /
cobas c 502, cobas c 701
COBAS INTEGRAT
Roche Diagnostics / Hitachi
Immunologie cobas e 602 System Modul der cobasT 8000 modular
analyzer series
ElecsysT free βHCG beta
ElecsysT PAPP-A
cobasT modular platform:
cobas e 411 / cobas e 601
MODULAR
ElecsysT 2010
cobasT modular platform:
cobas e 411 / cobas e 601
MODULAR
ElecsysT 2010
Kontrollset mit häufig verwendeten
Cut-Offs für 9 Drogentests
System für die Heterogene Immunologie
N / U*
N
N
N
Status
verfügbar
verfügbar
verfügbar
Ersttrimester-Screening N verfügbar
Ersttrimester-Screening N verfügbar
Gerinnung AsserachromT HPIA IgG ELISA Reader IgG-spezifischer Nachweis von Typ
II-Antikörpern bei Heparininduzierter
Thrombozytopenie
Molekulare
Diagnostik
STAT-Liquid Anti-Xa
STAT R Evolution,
STAT Compact
Flüssigreagenz zur Bestimmung der
Anti-XA-Aktivität von UFH, LMWH
und Fondaparinux, inklusiv spezifischer
Kalibratoren und Kontrollen
cobasT TaqScreen DPX Test cobas s 201 System Blutspendentestung:
Duplex-Test für HAV-RNA qualitativ
und Parvovirus-B-19 DNA quantitativ
aus Plasma
Hospital POCT Accu-Chek T Safe-T-Pro Accu-Chek T Safe-T-ProT Uno Einmalstechhilfe mir geringerer Einstichtiefe
und optimierter Lanzette
Accu-Chek T Inform II Teststeifen
Accu-Chek T Inform II
Accu-Chek T Performa
Längere Haltbarkeit des Teststreifens,
bessere Performance
IT-Lösungen SWISSLAB Modul Pathologie SWISSLAB LIS Spezielles Modul zur Unterstützung
des gesamten Workflows der
Pathologie
Gewebe -
diag nostik
BenchMark GX System
Zahlreiche neue Antikörper und
Sonden
HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail
Assay
BenchMark GX,
BenchMark XT,
BenchMark ULTRA
BenchMark GX,
BenchMark XT,
BenchMark ULTRA
Vollautomatisiertes Färbesystem für
SISH-, Dual-SISH-, IHC-, ISH- und
FITC-Färbung
Testung zahlreicher Tumorgewebe in
IHC und ISH
Simultaner Nachweis von HER2-Gen
und Genkopien auf Chromosom 17
N
verfügbar
N Dezember 2010
N
U
U
N
U
N
N
verfügbar Ende
September
verfügbar
verfügbar
verfügbar
verfügbar
verfügbar
verfügbar
* N = Neueinführung / U = Umstellung
16
Ausgabe 30 • 10/2010

Labormarkt und Gesundheitspolitik
Krankenhäuser in Deutschland: Wettbewerbsfähig durch Effizienz und Qualität
Der Kostendruck auf Krankenhäuser in
Deutschland steigt. Doch die Situation ist
nicht für alle gleich: Während Private sich
am Kapitalmarkt bedienen können, um
Einsparungs- und Modernisierungsmaßnahmen
zu finanzieren, fehlt vielen öffentlich-rechtlichen
Krankenhäusern das
Geld. Studien belegen diese Entwicklung
und zeigen zugleich Wege aus der Krise.
Eine effiziente Labordiagnostik kann
dabei eine wichtige Rolle spielen.
„Survival of the fittest“ – Darwins Prinzip
der natürlichen Auslese hat auch im
Krankenhaussektor Einzug gehalten und
bereits merkliche Spuren hinterlassen.
Die Zahl der Krankenhäuser in Deutschland
sank zwischen 1998 und 2008 von
2 263 auf 2 083 – und Experten rechnen
damit, dass sich die Marktbereinigung
weiter fortsetzen wird. Einer aktuellen
Studie der Wirtschaftsprüfungsgesellschaft
Ernst & Young zufolge steigt der
finanzielle Druck im gesamten Krankenhaussektor:
1) Die Kosten sind seit 2000
jährlich um durchschnittlich 3 % angewachsen
und liegen heute bei 62 Milliarden
Euro pro Jahr. Über 80 % der von
Ernst & Young befragten Krankenhausmanager
rechnen damit, dass ihre Ausgaben
für Personal und Sachleistungen
in den kommenden zwei Jahren weiter
steigen werden. Beispielsweise wird sich
der Bedarf an Ärzten und Pflegekräften
erhöhen – bei gleichzeitig verschärftem
Wettstreit um qualifiziertes Personal.
Krankenhäuser stehen in einem harten
Wettbewerb und konkurrieren um
Patienten, die wachsende Ansprüche an
medizinische Leistung, Betreuung und
Ambiente stellen. Um konkurrenzfähig
zu bleiben, müssten viele investieren –
in medizinische Geräte, Gebäudesanierung
und mehr Personal. Aber oft fehlt
das Geld: 31 % der von Ernst & Young
befragten Krankenhausmanager beurteilen
die finanzielle Lage ihrer Häuser als
„eher schlecht“ oder sogar „sehr schlecht“.
Die Folge: Notwendige Investitionen werden
nicht getätigt. Der Investitionsstau
belief sich 2009 nach Schätzungen der
Deutschen Krankenhausgesellschaft auf
50 Milliarden Euro, und jährlich kommen
5 Milliarden Euro Neubedarf hinzu.
Ungleiche Chancen
Für private Krankenhäuser gestaltet sich
die Finanzierung laut Ernst & Young oft
einfacher als für Krankenhäuser in öffentlicher
Trägerschaft. Private sind beliebte
Kreditnehmer, da sie von Steuereinnahmen
unabhängig sind und ihr Geschäft
dadurch von Konjunkturschwankungen
weitgehend unberührt bleibt. Sie können
sich am Kapitalmarkt bedienen und
Investitionsvorhaben zügig umsetzen. Für
öffentlich-rechtliche Krankenhäuser ist
die Situation deutlich schwieriger. Denn
während die laufenden Betriebskosten
von den Krankenkassen übernommen
werden, kommt das Geld für Investitionen
von den Bundesländern – und weil
hier Finanznot herrscht, können unter
Umständen zehn Jahre vergehen, bis eine
Investition genehmigt wird. Die Wirtschaftskrise
hat die Situation verschärft;
infolge gestiegener Arbeitslosigkeit, Kurzarbeit
und Insolvenzen verzeichnen Länder
und Kommunen Steuerausfälle.
Nutzen leistungsfähiger Lösungen für die Diagnostik im Krankenhaus
Medizinischer
Wert
Effizienz
Behandlungsqualität
steigt
Ressourcenverbrauch
sinkt
Investition und Modernisierung werden
öffentlich-rechtlichen Krankenhäusern
auch durch strukturelle Nachteile
erschwert: Sie unterliegen beispielsweise
Tarifverträgen und müssen höhere Gehälter
zahlen. Außerdem sind sie meist von
der Kommunalverwaltung abhängig und
damit nicht frei von politischer Einflussnahme.
Im Gegensatz zu privaten Krankenhäusern
sind öffentlich-rechtliche
Häuser zudem nicht allein auf ökonomischen
Gewinn ausgerichtet, sondern
verfolgen darüber hinaus gesamtgesellschaftliche
Ziele, wie beispielsweise eine
umfassende medizinische Versorgung
der Bevölkerung oder die Schaffung und
Erhaltung von Arbeitsplätzen.
Erfolgsfaktoren für kommunale Krankenhäuser
Trotz dieser Herausforderungen können
kommunale Krankenhäuser nach Einschätzung
des Deutschen Krankenhausinstituts
(DKI) im Wettbewerb mit den
privaten Kliniken bestehen. 2) Mehr noch:
Sie werden auch in Zukunft eine tragende
Rolle im Gesundheitssektor spielen und
ihre Marktführerschaft behaupten. Kommunale
Häuser sind und bleiben führend
bei der Fall- und Bettenzahl sowie der
Zahl von Intensivbetten und Großgeräten.
Ihre Aufgabe liegt darin, strukturelle
Beeinträchtigungen zu überwinden und
gleichzeitig ihre Wirtschaftlichkeit zu
erhöhen, sodass sie wichtige Investitionen
realisieren und dennoch schwarze Zahlen
schreiben können.
Das DKI hat öffentlich-rechtliche Krankenhäuser
analysiert und die notwendigen
Voraussetzungen für ihren wirtschaftlichen
Erfolg identifiziert. Ein
wesentlicher Faktor ist zum Beispiel die
Umwandlung in eine private Rechtsform,
um den politischen Einfluss der Kommunen
zu mindern, effizientere Organisationsstrukturen
aufzubauen und schneller
auf Marktveränderungen reagieren
zu können. Wichtig ist auch eine klare
Aufgabenverteilung: So sollte etwa die
Patientenzufriedenheit
steigt
Weiterempfehlung
Image steigt
Personal-/Sachkosten
sinken
Höhere Leistungsfähigkeit
Höherer Output
Wettbewerbsdruck
Patientenerwartungen
steigen
Finanzieller Druck
steigt
Ausgabe 30 • 10/2010 17

letztgültige Entscheidungsbefugnis dem
kaufmännischen Leiter des Krankenhauses
obliegen, der auch gegenüber dem
Träger weitgehende Handlungsfreiheit
genießt. Der wirtschaftliche Erfolg ist
nicht nur für die medizinische Einrichtung
von Interesse – auch dem Patienten
ist er nicht egal. Die Ergebnisse des
Krankenhaus-Rating-Reports 2010 des
Rheinisch-Westfälischen Instituts für
Wirtschaftsforschung (RWI) zeigen, dass
die Wirtschaftlichkeit eines Krankenhauses
mit höherer Behandlungsqualität und
Patientenzufriedenheit korreliert. 3)
Moderne Labordiagnostik – Schlüssel
für mehr Effizienz
Höhere Behandlungsqualität, Patientenzufriedenheit
und Wirtschaftlichkeit
gehen Hand in Hand. Dieser Zusammenhang
mag auf den ersten Blick überraschen
– doch er lässt sich anhand von
Beispielen aus der Labordiagnostik veranschaulichen.
Dabei gilt generell: Je früher
eine präzise Diagnose gestellt werden
kann, desto eher können Patienten effizient
behandelt werden. Dies ist zum einen
ein wichtiger Faktor für die Patientenzufriedenheit,
zum anderen ist das Einleiten
angemessener therapeutischer Maßnahmen
zum frühest möglichen Zeitpunkt
immer auch kosteneffizient.
Beispielsweise unterstützen die Biomarker
PlGF und sFLT-1, die gefährliche
Schwangerschaftskomplikation Präeklampsie
sehr frühzeitig zu diagnostizieren
und von anderen, klinsch weniger
relevanten Hochdruckerkrankungen der
Schwangerschaft zu differenzieren. Vorsorgliche
Maßnahmen können ergriffen
und das Risiko schwerwiegender gesundheitlicher
Schäden bei Mutter und Kind
verringert werden. Ein weiteres Beispiel
ist der konsequente Einsatz des Markers
NT-proBNP: Er kann eine kardiale
Erkrankung sicher nachweisen bzw.
ausschließen, was u.a. kostenintensivere
Echokardiografien reduziert. Zusätzlich
eignet sich NT-proBNP nicht nur zur
Therapiesteuerung, sondern auch zur
Abschätzung der Prognose unter der
gewählten Therapie. Auch das erweitert
den klinischen Handlungsspielraum.
Ein riesiges medizinisches und ökonomisches
Problem für Krankenhäuser
sind Infektionen. Jeder Sepsis- oder
MRSA-Fall lässt die Behandlungskosten
in extreme Höhen schießen. Und jedes
Krankenhaus, in dem sich ein Patient
mit MRSA infiziert hat, wird seine Reputation
im persönlichen Umfeld dieses
Patienten verlieren. Entscheidend für das
richtige klinische Handeln ist, die Diagnose
so früh wie möglich zu haben. So
können rechtzeitig wirkungvolle Antibiotika
verabreicht bzw. notwendige
Hygienemaßnahmen festgelegt werden.
Neue Labormethoden auf PCR-Basis,
der LightCyclerT SeptiFast Test und der
LightCyclerT MRSA ADVANCED Test
bieten einen wichtigen Zeitvorteil gegenüber
herkömmlichen mikrobiologischen
Verfahren.
Nicht nur Laborparameter, auch leistungsfähige
und dem Bedarf angepasste
Laborsysteme mit hoher Ergebnissicherheit
tragen zu mehr Effizienz und Qualität
in Krankenhäusern bei. Das modulare
Systemkonzept für den Serumarbeitsplatz
cobasT modular platform von Roche
bietet mit seinen 48 verschiedenen Systemkonfigurationen
jedem Labor eine
individuelle Möglichkeit, Arbeitsabläufe
qualitativ und ökonomisch zu optimieren.
Fazit
Sowohl öffentlich-rechtliche als auch
private Krankenhäuser müssen sich an
Kriterien wie Effizienz, Qualität und Patientenzufriedenheit
messen lassen. Eine
moderne Labordiagnostik kann dabei in
zweifacher Hinsicht unterstützen: Zum
einen steigert sie mit einer frühen und
präzisen Diagnose die Behandlungsqualität
und die Patientenzufriedenheit, weil
Patienten schneller die richtige Therapie
erhalten. Zum anderen führt sie zu mehr
Effizienz, weil der Ressourcenverbrauch
gesenkt und die Leistungsfähigkeit gesteigert
werden (Abb.). Damit können Krankenhäuser
einen großen Schritt in Richtung
Kosteneinsparungen tun.
Literatur:
1) Ernst & Young: „Krankenhauslandschaft im
Umbruch“, 2010, www.ey.com/DE/de/About-us/
Publikationen_Studien_2010
2) Deutsches Krankenhausinstitut: „Das erfolgreiche
kommunale Krankenhaus“, 2010, www.dki.de/index.
php?TM=0&BM=2&LM=149
3) Rheinisch-Westfälisches Institut für Wirtschaftsforschung:
„Krankenhaus Rating Report 2010“, Pressemitteilung,
www.rwi-essen.de/presse/
Ihr Ansprechpartner:
Henning von Eicke
Leiter Marketing Professionelle Labordiagnostik
(06 21) 7 59 20 47
henning.von_eicke@roche.com
HERAUSGEBER:
Roche Diagnostics Deutschland GmbH,
Harald Borrmann, Leiter Vertrieb Professionelle Labordiagnostik
CHEFREDAKTION:
Ute Reimann und Henning von Eicke, Konzept-Marketing Labordiagnostik
„Diagnostik im Dialog“ können Sie jederzeit über eine kurze Mitteilung per E-Mail
abbestellen. Es fallen selbstverständlich keine weiteren als die für Sie üblichen
Online-Gebühren an. Nutzen Sie dafür, ebenso wie für mögliche Rückfragen, gerne
folgende Newsletter-E-Mail-Adresse:
mannheim.diagnostik-im-dialog@roche.com
Die dargestellten Informationen geben die subjektive Einschätzung der Autoren
wieder. Die Roche Diagnostics Deutschland GmbH übernimmt keine Gewähr für
die Richtig keit der im Newsletter dargestellten Informationen. Die Weitergabe der
Daten in jedweder Form bedarf der schriftlichen Zustimmung der Roche Diagnostics
Deutschland GmbH.
© 2010 Roche Diagnostics. Alle Rechte vorbehalten.
ACCU-CHEK, BENCHMARK, COAGUCHEK, COBAS, COBAS C, COBAS E, COBAS INTEGRA, COBAS S, COBAS and TAQSCREEN, ELECSYS, GS FLX,
LIFE NEEDS ANSWERS, LIGHTCYCLER & MRSA, MRSA ADVANCED, MODULAR, SYMPHONY, TINA-QUANT, VANTAGE und VENTANA sind
Marken von Roche. Andere Marken sind Marken der jeweiligen Eigentümer.
18
Ausgabe 30 • 10/2010

Nachrichten aus der Gesundheitspolitik
Die Koalition hat sich auf eine Finanzreform der gesetzlichen Krankenkassen (GKV)
geeinigt, die zum 1.1.2011 in Kraft treten soll. Die verabschiedeten Eckpunkte schließen
zusammen die voraussichtliche Finanzlücke der GKV 2011 in Höhe von ca.
11 Milliarden Euro. Hauptkritikpunkt ist, dass die beschlossenen Maßnahmen nur zu
einer kurzfristigen Entlastung der Krankenkassenfinanzen beitragen, und die Versicherten
zukünftige Ausgabensteigerungen allein über Zusatzbeiträge finanzieren müssen.
Die Beschlüsse im Einzelnen:
Beitragssatz wird
angehoben
Variable Zusatzbeiträge
Ausgabenkürzungen
auf breiter Front
Der Beitragssatz zur GKV wird von 14,9 auf 15,5 % angehoben – also auf das Niveau vor der
Senkung durch das Konjunkturpaket II. Der nur vom Arbeitnehmer zu zahlende Beitrag von
0,9 % bleibt erhalten. Somit zahlen Arbeitnehmer künftig 8,2 % und Arbeitgeber 7,3 % des
Bruttoeinkommens.
Der Arbeitgeberbeitrag wird bei 7,3 % eingefroren. Damit wird die beabsichtigte Abkoppelung
der Steigerung der Gesundheitskosten von den Lohnnebenkosten umgesetzt. Künftige Ausgabenzuwächse
im Gesundheitswesen sollen durch Zusatzbeiträge finanziert werden, die der
Arbeitnehmer allein trägt.
Die Krankenkassen können in Zukunft allein entscheiden, welchen Zusatzbeitrag sie bei
ihren Versicherten erheben wollen. Die bisherige Deckelung bei 1 % des beitragspflichtigen
Einkommens wird aufgehoben.
Sollte der durchschnittliche Zusatzbeitrag aller GKV mehr als 2 % des Einkommens betragen,
ist zur sozialen Abfederung eine sogenannte Überforderungsklausel, d.h. ein Ausgleich über
Steuermittel vorgesehen (der Differenzbetrag wird dem Versicherten ausgezahlt).
Die Koalition geht davon aus, dass
• durch die Festlegung auf den durchschnittlichen Zusatzbeitrag der GKV die Wechselbereitschaft
der Versicherten erhalten bleibt.
• die in der Koalitionsvereinbarung vorgesehene Rückübertragung der Beitragsautonomie an
die Krankenkassen damit umgesetzt wird.
• die GKV mit der Weiterentwicklung des Zusatzbeitrags eine Finanzierungsgrundlage erhalten,
die langfristig stabil ist.
Nahezu alle Bereiche im Gesundheitswesen müssen sich auf Null- oder sogar Minusrunden
einstellen. Das Einsparvolumen bei Krankenkassen, Krankenhäusern, Ärzten sowie in der
Pharmaindustrie beläuft sich laut Koalition im Jahr 2011 auf ca. 3,5 Milliarden Euro. 2012 soll
die Summe ca. 4 Milliarden Euro betragen.
Im ambulanten ärztlichen Bereich sollen 350 Millionen Euro eingespart werden. Ziel ist, das
Vergütungsniveau bei den Hausarztverträgen auf das im KV-System gültige Honorarniveau zu
senken. Dadurch verspricht man sich noch einmal Einsparungen in Höhe von ca. 500 Millionen
Euro.
Für Hausarztverträge, die vor dem Kabinettsbeschluss unterschrieben werden, gelten die
zuvor ausgehandelten Bedingungen (Bestandsschutz).
Ihr Ansprechpartner
Dr. Fank Deickert
Leiter Gesundheitsmarkt
(06 21) 7 59 31 39
frank.deickert@roche.com
Ausgabe 30 • 10/2010 19

Medizin von morgen
Auf die richtige Kombination kommt es an – Mehrfachfärbungen erweitern die
Möglichkeiten der Tumordiagnostik
Der gleichzeitige Nachweis von zwei Biomarkern
an einem Gewebeschnitt kann
für die Prognose des Patienten oder die
richtige Therapieauswahl oft wesentlich
mehr Fragen beantworten als die Summe
von zwei Einzelfärbungen. Ist ein therapierelevanter
Marker nur in einer be -
stimmten Tumorzellpopulation vorhanden?
In welchem Verhältnis stehen zwei
Proteine im Gewebe zueinander, die im
Hinblick auf ihre biologische Funktion in
Wechselwirkung stehen könnten? Sind
sie ko-lokalisiert, also in identischen
Bereichen eines Tumors nachweisbar,
oder werden sie von verschiedenen Anteilen
gebildet? Die räumliche Beziehung
zwischen Gewebebiomarkern zu kennen,
kann das Verständnis der Wirkmechanismen
neuer zielgerichteter Therapien entscheidend
verbessern.
Die genaue Lokalisation von Biomarkern
im Gewebe und deren Zuordnung
zu bestimmten Differenzierungs- oder
Aktivierungszuständen der Tumorzellen
ist besonders dann von Bedeutung, wenn
diese Marker nicht von allen Tumorzellen
gleichermaßen gebildet werden,
der Tumor also heterogen ist. Maligne
Tumoren können aus unterschiedlichen
Zellpopulationen zusammengesetzt sein,
die zwar einen gemeinsamen genetischen
Fingerabdruck besitzen, aber dennoch
ganz unterschiedliche Funktions- und
Differenzierungszustände aufweisen. Ein
Beispiel sind die sogenannten „Tumorstammzellen“,
eine kleine Anzahl von
Zellen, die hinsichtlich ihrer Regenerations-
und Teilungsfähigkeit besondere
„stammzellähnliche“ Eigenschaften
besitzen und sich darin von der Masse
der Tumorzellen unterscheiden. Ein weiteres
Beispiel für ein heterogenes Erscheinungsbild
von invasiv wachsenden Tumoren
sind Unterschiede zwischen dem
Tumorzentrum, wo Tumorzellen weitgehend
von ihresgleichen umgeben sind,
und dem Tumorrand, wo sich maligne
Zellen in direktem Kontakt mit nichtmalignem
Umgebungsgewebe befinden.
Schließlich kann es sogar eine gewisse
genetische Heterogenität innerhalb von
Tumoren geben, oder Entzündungszellen
verändern die Expression von Biomarkern
im Tumor.
Gewebeschnitte sind Spiegelbilder des
Tumors
Im Verständnis dieser „Tumorheterogenität“
liegt der besondere Vorteil der
mikroskopischen Untersuchung gegenüber
proteinbiochemischen oder RNAbasierten
Nachweisverfahren an zerkleinertem,
homogenisiertem Tumorgewebe.
Wenn Gewebe zerkleinert und vermischt
wird, spiegeln die Untersuchungsergebnisse
einen Mittelwert der Biomarkerexpression
in allen Zellen der Probe wider.
Ein Marker, der zwar stark, aber nur in
wenigen Tumorzellen exprimiert wird,
kann durch Verdünnungseffekte das gleiche
Signal ergeben wie ein schwach, aber
von vielen Zellen produziertes Protein.
Gefärbte Gewebeschnitte zeigen dagegen
nicht nur die einfache Anwesenheit oder
Gesamtmenge eines Biomarkers, sondern
auch dessen Bezug zu Struktur und Nachbarschaft
des Tumors.
Die wichtigste Methode für den Proteinnachweis
im Gewebe ist die Immunhistochemie,
ein mehrstufiger Färbeprozess,
bei dem die spezifische Bindung
eines sogenannten „Primärantikörpers“
an den nachzuweisenden Biomarker
mit verschiedenen Detektionsreagenzien
sichtbar gemacht wird. Dabei wird
entweder mit chemischen Farbreaktionen
(„Chromogenen“) gearbeitet, die
in herkömmlicher Hellfeldmikroskopie
sichtbar sind, oder mit Fluoreszenzfarbstoffen,
die Licht in einem gut definierten
Wellenlängenbereich emittieren und mit
speziellen Mikroskopen sichtbar werden.
In der Routinediagnostik kommen vorwiegend
Einfachfärbungen mit chromogenen
Detektionssystemen zum Einsatz.
Dies hat vor allem pragmatische Gründe:
Chromogene Färbungen können mit
Routinemikroskopen ausgewertet werden
und bleichen nicht aus – sie können
daher im Hellen gefärbt, transportiert,
analysiert und archiviert werden. Wenn
eine größere Anzahl von Markern erfor­
derlich ist, wie z.B. bei der Immunphänotypisierung
maligner Lymphome oder
Bestimmung von Hormonrezeptor- und
HER2-Status von Brustkrebsgewebe, werden
mehrere Färbungen oft an konsekutiven
Schnitten durchgeführt.
Mehrfachfärbungen unterstützen die
Entwicklung neuer Krebstherapien
Das beschriebene Vorgehen ist für
Tumormarker, die homogen im ganzen
Tumor exprimiert werden, gut etabliert
und ausreichend. Mit den immer stärker
zielgerichteten Ansätzen zur Krebstherapie
(„Personalisierte Medizin“) wachsen
auch die Ansprüche an die Histopathologie.
Mehrfachfärbungen erweitern den
Informationsgehalt noch einmal erheblich,
weil sie die für einen Biomarker positiven
Tumorzellen oder deren Umgebung
innerhalb des Gewebeverbandes genauer
charakterisieren. Doppel- und Mehrfachmarkierungen
werden daher immer öfter
für Biomarkeranalysen in klinischen Studien
angefragt. Denn je präziser Tumorzellen
charakterisiert sind, desto zielgerichteter
kann an neuen Wirkstoffen
gearbeitet werden. Beispielsweise kann
es um folgende Fragen gehen:
O Wird ein neuer Biomarker in allen
Tumorzellen exprimiert, oder nur
in Subpopulationen am invasiven
Tumorrand, oder in Tumorzellen mit
stammzellähnlichen Eigenschaften?
O Wie greift das Immunsystem des Patienten
den Tumor unter einer neuen
Therapie an?
O In welchen Bereichen werden Signalproteine
der Zelle unter Behandlung
vom Zytoplasma in den Zellkern verlagert?
Früher konnten nur aufwendige Fluoreszenzmarkierungen
an relativ wenigen
Proben diese Fragestellungen beantworten.
Neue Technologien ermöglichen es
jedoch, bisher bestehende Grenzen zu
durchbrechen und Mehrfachmarkierungen
auch mit chromogenen Farbstoffen in
größerem Umfang durchzuführen, selbst
wenn diese Farben für das menschliche
Auge kaum unterscheidbar sind.
20
Ausgabe 30 • 10/2010

Eine dieser neuen Technologien ist die
Bearbeitung mikroskopischer Bilder
durch Multispektralanalyse. Der Computer
erfasst die spektralen Eigenschaften
von Farbstoffen und stellt die Farbintensität
für getrennte Farbkanäle dar.
Diese können anschließend mit speziellen
Bildverarbeitungsprogrammen analysiert
und in einer für das menschliche Auge gut
erkennbaren Weise dargestellt werden.
(Abb.). Der grundsätzliche Ansatz dieser
histopathologischen Bilddatenanalyse ist
ähnlich der Technologie für das „in-vivo
Optical Imaging“, einer Methode, mit der
Tumorantigene durch fluoreszenz-markierte
Antikörper nicht-invasiv im Versuchstier
nachgewiesen werden können.
Interdisziplinäre Zusammenarbeit als
Motor
Die Multispektralanalyse und das „in-vivo
Optical Imaging“ gehören zum technologischen
Repertoire am Roche Standort
Penzberg. Die in dieser Technik erfahrenen
Wissenschaftler der onkologischen
Forschung und das Pathologie-Team
arbeiten eng zusammen und stellen so die
Verbindung her zwischen experimenteller
Forschung und der Anwendung neuer
Biomarker in frühen klinischen Studien.
Interdisziplinäre Zusammenarbeit wird
auch nach der mikroskopischen Gewebeuntersuchung
bei der statistischen
Analyse der Bilddaten groß geschrieben:
Biostatistiker, Bioinformatiker und
Naturwissenschaftler kooperieren mit
dem Team der experimentellen Pathologie
schon in frühen Phasen der Test­
entwicklung, damit die Auswertung von
histologischen Schnittpräparaten von
Anfang an so robust und reproduzierbar
wie möglich gemacht wird.
Der Brückenschlag von der experimentellen
Pathologie in die frühe klinische Forschung
ist ein wichtiger Schritt in der Biomarkerentwicklung.
Das langfristige Ziel
aber ist die Anwendung gewebebasierter
Nachweismethoden in großen klinischen
Studien und letztendlich in der klinischpathologischen
Diagnostik. Von Anfang
an arbeiten dafür bei Roche in Penzberg
Pathologen und Naturwissenschaftler der
globalen Funktion „Translational Research
Sciences“ zusammen mit Kollegen von
Roche Tissue Diagnostics / Ventana.
Das „Joint Histopathology Laboratory“
wurde eigens aufgebaut, um zukünftig
das Potenzial von Biomarkern aus onkologischen
Forschungsprojekten für die
breite Anwendung in der pathologischen
Routinediagnostik nutzbar zu machen.
Arbeitsabläufe innovativer Lösungen für
Mehrfachmarkierungen in der Gewebediagnostik
sollen unmittelbar an automatisierte
Protokolle der Ventana-Färbeautomaten
angepasst werden. Das sind die
besten Voraussetzungen für einen späteren
hohen Probendurchsatz.
A
C
Abb.: Der Computer detektiert mittels Multispektralanalyse Farbunterschiede, die für das
menschliche Auge kaum erkennbar sind. In einer chromogenen Doppelfärbung wurde ein Marker mit
einem braunen Farbstoff, und ein weiterer mit einem roten Farbstoff nachgewiesen. Die linken Bilder
(A&C) stellen zwei unterschiedliche Tumorschnitte dar und zeigen jeweils die Ansicht im Lichtmikroskop,
bei der das menschliche Auge den Unterschied zwischen braun und rot nur unzureichend erkennen kann.
Die rechten Bilder (B&D) zeigen das jeweils entsprechende Ergebnis der Multispektralanalyse, bei der die
ursprünglich braune Färbung leuchtend grün dargestellt wird. Die zunächst blassrote Markierung wird in
ein leuchtendes Rot umgewandelt, und die im Original blassblauen Zellkerne erscheinen in einem kräftigen
Dunkelblau. Damit wird sichtbar, was man mit dem konventionellen Mikroskop nur ahnen konnte: Während
die beiden Marker im Lichtmikroskop (A&B) eher in getrennten Arealen nachweisbar sind, zeigt die Multispektralanalyse
(C&D) eine Vermischung der Farbkanäle in ein gelbliches Grün, was auf Kolokalisation hinweist.
Würde man die beiden Gewebeproben homogenisieren und eine Biomarkeranalyse am Lysat durchführen,
könnten durchaus ähnliche Messwerte resultieren. Die mikroskopische Lokalisation der Marker
gibt dagegen wichtige Hinweise auf den unterschiedlichen Funktionszustand der Zellen in den beiden
Tumorproben.
B
D
Die Expertise des Pathologen bleibt
unersetzbar
Mehrfachmarkierungen können die
diagnostischen Möglichkeiten erheblich
erweitern – die Expertise erfahrener
Pathologen in der Tumordiagnostik wird
jedoch durch zusätzliche Marker und
ausgefeilte computergestützte Analysemethoden
keinesfalls ersetzt. Außerdem
kann die beste Technologie zur Auswertung
von Färbeergebnissen nur so gut
sein wie das Ausgangsmaterial – die
Qualität der Gewebeprobe ist also einer
der Schlüsselfaktoren für die Diagnostik
aber auch zur erfolgreichen Entwicklung
neuer Biomarker. Ebenso wichtig wie die
Nutzung neuer Analyse werkzeuge ist
deshalb, dass klinisch tätige Ärzte, das
Personal im Operationssaal, Pathologen
in der Diagnostik und Wissenschaftler
im Forschungslabor gut zusammenarbeiten,
damit die therapieentscheidenden
biologischen Informationen aus
dem Tumorgewebe korrekt entziffert
werden können.
Ausgabe 30 • 10/2010 21

Ausblick
Doppelfärbungen werden derzeit noch
weitgehend in der experimentellen
Pathologie eingesetzt, sie sind in der Biomarkeranalyse
für klinische Studien aber
längst keine Zukunftsmusik mehr. Auch
eine Anwendung in der klinisch-pathologischen
Diagnostik rückt angesichts des
raschen technologischen Fortschrittes
im Bereich gewebebasierter Biomarker
in den Bereich des Möglichen. Mehrfachmarkierungen
aus der experimentellen
Pathologie in die klinische Praxis
zu „übersetzen“ ist ein wichtiger Beitrag
zur Weiterentwicklung der Personalisierten
Medizin.
Ihr Ansprechpartner:
Priv.-Doz. Dr. Friedrich Feuerhake
Leiter Experimentelle Pathologie
Pathology & Tissue Biomarker
Pharma Research and Early Development (pRED)
Translational Research Sciences (TRS)
(0 88 56) 60 70 60
friedrich.feuerhake@roche.com
Kongresse und Veranstaltungen
Die ATHENA-Studie – richtungsweisend für ein erfolgreiches HPV-Screening
Bei Frauen zwischen 15 und 44 Jahren ist
das Zervixkarzinom weltweit die zweithäufigste
Krebserkrankung. In nahezu allen
Fällen ist eine persistierende Infektion mit
humanen Papillomviren (HPV) die Ur sache.
Werden der Tumor bzw. seine Vorstufen
bereits im Frühstadium erkannt, ist in
100 % der Fälle eine Heilung zu erreichen.
Daher hat sich in vielen Industriestaaten
ein Früherkennungsprogramm etabliert,
das auf dem Zell abstrich und der nachfolgenden
sogenannten Pap-Zytologie
basiert. Die Grenzen dieser Methode sind
bekannt. Beim Roche-Symposium anlässlich
der 26. Internationalen Papillomviren-
Konferenz (IPV) in Montreal (Juli 2010)
wurden Strategien zur verbesserten Vorsorge
und erstmals die eindrucksvollen
Ergebnisse der „ATHENA-Studie“ vorgestellt
und diskutiert.
Die Möglichkeiten der Pap-Zytologie sind
bekanntermaßen limitiert. Deshalb stagniert
die Zahl der Krebserkrankungen und
Todesfälle seit den 90er-Jahren, obwohl
sich das Vorsorgeprogramm erfolgreich
durchgesetzt hat, so Warner Huh von der
University of Alabama in Birmingham. Der
Mangel an diagnostischer Präzision der
Zytologie sei unter anderem auf die subjektive
morphologische Interpretation und
die niedrige Sensitivität eines einzelnen
Pap-Tests zurückzuführen. Vielversprechender
für den Nachweis einer zervikalen
Dysplasie sei die gezielte Identifikation der
krebsverursachenden Viren.
Von den zurzeit 13 – 16 potenziellen Hochrisiko
(HR)-Typen, kommt HPV 16 und
18, die allein für ca. 70 – 75 % aller Zervixkarzinome
verantwortlich sind, eine
besondere Bedeutung zu. Internationale
Experten fordern einen Paradigmenwechsel
in der Gebärmutterhalskrebs-Vorsorge
hin zu einem HPV-Screening oder der
Screeningkombination aus HPV-Test und
Pap-Zytologie. Dieser Paradigmenwechsel,
so Warner Huh, sei medizinisch sinnvoll
und gesundheitsökonomisch tragbar.
Voraussetzung für die Zulassung eines
neuen HR-HPV-Tests zum Screening ist die
nachgewiesene vergleichbare Performance
gegenüber etablierten Assays. Sie muss
über große prospektive Studien oder nach
den Vorgaben eines internationalen Konsortiums
erfolgen. 1) Bereits während des
Roche-Symposiums anlässlich der EURO­
GIN 2010 in Monaco betonte Daniëlle Heideman
vom VU University Medical Center
Amsterdam, dass im Rahmen der VUSA-
Screen-Studie 2, 3) der neue cobasT 4800
HPV-Test die strengen Kriterien bezüglich
Sensitivität und Spezifität gegenüber dem
Referenztest Hybrid Capture 2 (hc2) klar
erfüllt. Der cobasT 4800 HPV-Test weist
insgesamt 14 HR-HPV-Typen nach und
identifiziert gezielt die klinisch relevantesten
Typen HPV 16 und 18. Er ist der einzige
zurzeit in den USA geprüfte Assay, der diese
Kombination aus HR-HPV-Paneltestung
und gleichzeitiger Genotypisierung von
HPV 16 und 18 bietet.
Die ATHENA-Studie
Die ATHENA-Studie (Adressing the Need
for Advanced HPV Diagnostics), eine prospektive,
kontrollierte, multizentrische
Doppelblindstudie, ist mit rund 47 000
Frauen die bisher größte FDA-Zulassungsstudie
im Bereich Zervixkarzinom.
Studienziele sind die Klärung medizinischer
und wissenschaftlicher Fragen zur
Wichtigkeit von HR-HPV-Tests für das
Screening sowie klinische Informationen
22
Ausgabe 30 • 10/2010

über spezifische HR-HPV Genotypen mit
höchstem Risiko. Die Auswertung lieferte
folgende Erkenntnisse: 4)
O 1 von 10 Frauen im Alter von 30 Jahren
und älter, bei denen der cobasT 4800
HPV-Test für die HPV-Genotypen 16
und / oder 18 positiv ausfiel, zeigte eine
Vorform von Gebärmutterhalskrebs,
obwohl ihr Pap-Test normal war.
O Die HPV-Genotypisierung ist für die
Risikobewertung von Gebärmutterhalskrebs
enorm wichtig, die Grenzen der
alleinigen zytologischen Untersuchung
wurden bestätigt. Frauen mit positiven
Ergebnissen für HPV 16 und / oder 18
sollten daher ein adaptiertes Patientenmanagement
erhalten, so Thomas
Wright von der College of Physicians
and Surgeons of Columbia University,
New York.
O In zukünftigen Vorsorgeprogrammen
sollte das Screening auf die beiden
Typen mit dem höchsten Risiko (HPV
16 und 18) Anwendung finden, um
prognostische Informationen über das
Risiko für Gebärmutterhalskrebs bzw.
seine Vorformen zu erhalten.
O Bereits jetzt, bevor das HPV-Screening
in offiziellen Vorsorgeprogrammen
verankert ist, sollten bei unklaren Zytologien
der Nachweis von HR-HPV und
die Genotypisierung von HPV 16 und
18 erfolgen, so Mark Stoler von der
University of Virginia Health System,
Charlottesville. Kann bei unklarer Zytologie
kein HR-HPV nachgewiesen werden,
ist die Gefahr einer verborgenen
Dysplasie sehr gering. Frauen mit einem
positivem cobasT 4800 HPV 16- oder
18-Ergebnis dagegen tragen das höchste
Risiko. Letztere sollten, so Stoler,
umgehend zu einer differenzialkolposkopischen
Untersuchung überwiesen
werden.
O Stoler betonte auch, dass der cobasT
4800 HPV Test in der Studie die geforderte
vergleichbare Performance zum
Referenztest Hybrid Capture 2 (hc2)
hinsichtlich Sensitivität und Spezifität
bewiesen hat. Der Test sei daher zum
Screening geeignet.
ATHENA ist eine richtungsweisende Studie,
die aufzeigt, wie innovative Metho­
den der in-vitro-Diagnostik die Grenzen
eines herkömmlichen Screenings überwinden
können. Ihre Ergebnisse belegen
eindrucksvoll die klinische Notwendigkeit
des cobasT 4800 HPV-Tests.
Literatur:
- Meijer C et al.: Int. J Cancer, 2009, 124: 516-520
- Diagnostik im Dialog, 2010, 28: 15-16
- Heidemann D et al: International Papilloma Conference,
Montreal, 2010, Abstract P-456
- Vorträge Roche Lunch Symposium, International
Papilloma Conference, Montreal, 2010
Ihr Ansprechpartner:
Dr. Frank Britz
Produktmanagement Molekulare Diagnostik
(06 21) 7 59 38 67
frank.britz@roche.com
Oktober 2010 – Januar 2011
Kundenveranstaltungen von Roche Diagnostics Datum Ort
Laborforum 2010
20. Oktober
27.-28. Oktober
27.-28. Oktober
03. November
25. November
Stuttgart
München
Würzburg
Frankfurt a. M.
Dortmund
MTA – Intensivkurse Hämostaseologie 28.-29. Oktober Mannheim
Innovation & Kompetenz in der Gewebediagnostik 10. November München
PCR-Symposium 11. November Basel
Ihre Ansprechpartnerin
Ute Reimann
Marketing Professionelle Labordiagnostik
(06 21) 7 59 40 78
ute.reimann@roche.com
Veranstaltungen verschiedener Organisationen Datum Ort
Gesellschaft für Laborberatung GmbH (DELAB): Fachtagung für Laborärzte 27.-28. Mainz
(www.delab-net.de)
November
25 Jahre Infektionsabteilung – 100 Jahre Poliklinik LMU München 16. Oktober München
Ausgewählte Kongresse & Messen Datum Ort Roche
Ausstellungsstand
33. Morphologie Histologie Tage (dvta) 15.-16. Oktober Kassel BenchMark XT und ULTRA;
Vantage Solutions
Herbsttagung der Dt. Diabetes Gesellschaft 4.- 6. November Berlin Accu-ChekT Produkte und Services
CLCP (Clinical Lung Cancer Project) 15.-16.
November
Köln
Diagnostische und therapeutische
Produkte zur Onkologie;
GS FLX und GS Junior
Kirchheim Forum Diabetes 21.-22. Januar Berlin Accu-ChekT und CoaguChekT
Produkte und Services
13. Bamberger Morphologietage 21.-23. Januar Bamberg BenchMark ULTRA
SYMPHONY
Roche
Satellitensymposium
„Vollautomatisierung und standardisierter
Workflow“
Moderne Diagnostik mittels HER2
Dual ISH
Ausgabe 30 • 10/2010 23

cobas T modular platform –
weil jedes Labor anders ist
niedriger Durchsatz
cobas T 4000 analyzer series
mittlerer Durchsatz
cobas T 6000 analyzer series
• 8 Systemmodule für 48 Systemkonfigurationen –
passend für jeden Serum arbeitsplatz
• Gleiche Bedieneroberfläche – flexibler Personaleinsatz
• Universelle Reagenzkassetten – einfache Handhabung,
einheitliche Ergebnisse
• Mehr als 180 Parameter – verfügbar auf einer Plattform
hoher Durchsatz
cobas T 8000 modular analyzer series
Roche Diagnostics Deutschland GmbH
Sandhofer Straße 116
68305 Mannheim
www.roche.de
COBAS und LIFE NEEDS ANSWERS
sind Marken von Roche.
©2010 Roche Diagnostics
Alle Rechte vorbehalten.