GELELEKTROPHORESE VON PROTEINEN
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3. ARBEITSANLEITUNG<br />
3.1 REAGENZIEN<br />
4<br />
<strong>GELELEKTROPHORESE</strong> 2008<br />
Acrylamid-/Bisacrylamidmonomerlösung: 30%T, 2.7% C<br />
Trenngelpuffer: 1.5M Tris-Cl, pH 8.8<br />
Sammelgelpuffer: 0.5M Tris-Cl, pH 6.8<br />
10%-ige SDS Lösung<br />
TEMED (N,N,N‘,N‘-Tetramethylethylenamin)<br />
10%-ige Ammoniumpersulfat<br />
Denaturierungsmix (red. Bedingungen): 0.125M Tris-Cl, pH=6.8, 4% SDS, 20% Glycerin, 10% 2-<br />
Mercaptoethanol, 1% Bromphenolblau<br />
Elektrophoresepuffer nach Verdünnung: 0.025M Tris, 0.192M Glycin, 0.1% SDS, pH=8.3<br />
Färbelösung: 0.025% Coomassie Blau R-250, 40% Methanol, 7% Essigsäure<br />
Entfärbelösung I: 7% Essigsäure, 40% Methanol<br />
Entfärbelösung II: 7% Essigsäure, 5% Methanol<br />
3.1 GIEßEN <strong>VON</strong> ZWEI ISOKRATISCHEN GELEN IN EINER GELGIEßKAMMER<br />
Plastikblock<br />
Anpressschiene<br />
Abb 5: Gelgießkammer<br />
Gummidichtung<br />
Gelsandwichhalterung<br />
Castingbehälter<br />
Feststell-<br />
Schrauben<br />
1. Zerlegen Sie die Gelgießkammer (Abb. 5) und reinigen Sie diese gründlich mit<br />
Leitungswasser.<br />
Entfernen Sie dafür zunächst die schwarzen Feststellschrauben an der Seite des<br />
Castingbehälters und ziehen danach vorsichtig die Gelsandwichhalterungen heraus.<br />
ACHTUNG:<br />
Keine organischen Lösungsmittel, Säuren oder Basen zum Reinigen der<br />
Kammerteile verwenden!<br />
® Martina Marchetti, TU Wien, Chemische Technologien und Analytik
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