Zelltherapie mit Granulozyten, Lymphozyten und ... - Hämotherapie

❯❯Zelltherapie mit Granulozyten,Lymphozyten und Natürlichen Killerzellen4Ausgabe 62006Prof. Dr. med. Hubert SchrezenmeierDr. med. Markus WiesnethDr. med. Peter ReinhardtInstitut für Klinische Transfusionsmedizinund Immungenetik Ulm undAbteilung Transfusionsmedizin,Universitätsklinikum UlmDRK-BlutspendedienstBaden-Württemberg-Hessen gGmbHHelmholtzstraße 10D-89081 Ulmh.schrezenmeier@blutspende.dem.wiesneth@blutspende.dep.reinhardt@blutspende.deDr. med. Torsten TonnProf. Dr. med. Erhard SeifriedInstitut für Transfusionsmedizinund ImmunhämatologieKlinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt am MainDRK-BlutspendedienstBaden-Württemberg – Hessen gGmbHSandhofstraße 1D-60528 Frankfurtttonn@bsdhessen.dee.seifried@blutspende.deGewinnung, Eigenschaften und KlinischeAnwendungEinleitungIn vorhergehenden Ausgaben der hämotherapie wurde ausführlich die somatischeZelltherapie beschrieben. Der Schwerpunkt lag auf den Stammzellen derHämatopoiese und anderen Stammzellarten zum therapeutischen Einsatz in derhämatopoietischen Stammzelltransplantation und zum regenerativen Gewebeersatz.Aber auch reife, ausdifferenzierte Zelltypen, die aus dem peripheren Blutdurch Zytapherese gewonnen werden können, spielen eine immer wichtigere RolleTransfusionen, welche in den letzten Jahren durch G-CSF eine Renaissance erleben,Spender-Lymphozyten-Infusionen, welche zunehmend Bedeutung in komplexenStammzelltransplantations-Verfahren erlangen, und natürlichen Killerzellen, welchenoch ein großes Entwicklungspotential für innovative Therapieansätze besitzen.in der Therapie maligner Erkrankungen und schwerer Infektionen bei immunkompromittiertenPatienten. Dieser Beitrag beschäftigt sich deshalb mit Granulozyten-GranulozytentransfusionenFunktion neutrophilerGranulozytenNeutrophile Granulozyten sindwesentliche Träger der Abwehrvon Bakterien- und Pilzinfektionen.Die Lebensdauer neutrophiler Granulozytenist kurz: Nach einer Entwicklungszeitvon 5-7 Tagen imKnochenmark, befi nden sie sichetwa 7 Stunden in Zirkulation imperipheren Blut und wandern dannins Gewebe und auf Schleimhautoberflächenaus. Dort überlebensie noch etwa 3 Tage in ihrer Funk-tion zur Infektabwehr. Die täglicheNeuproduktion bei Erwachsenenbeträgt etwa 10 11 neutrophile Granulozytenund kann bei Infektionenauf 10 12 pro Tag steigen. Der Blutpoolentspricht mit ca. 5 x10 10 Zellenetwa 50 % der normalen Tagesproduktion.Granulozyten wandern durchChemotaxis an den Ort von Entzündungenund Infektionen. Hierfürist eine komplexe Interaktionzwischen Oberflächenrezeptorender Granulozyten und Gefäßendothelienerforderlich, um die Adhäsion,das „Rolling“ und schließlichdie Diapedese ins Gewebe

❯❯❯zu vermitteln. Durch spezifi scheInteraktionen können die Granu-verschiedenen Ansätzen verfolgt.In den 60er Jahren wurden erstewicklungen in der Apheresetechnikkonnte das Blutprodukt Granu-5lozyten Partikel binden und pha-systematische Studien zur Leuko-lozytenkonzentrat entscheidendgozytieren. Die Phagozytose vonzytentransfusion bei neutropeni-verbessert werden, so dass nunBakterien wird durch Opsonisation(z. B. Bindung von Antikörpernschen Patienten durchgeführt. DieIndikation einer Granulozytentrans-Dosierungen erreichbar sind, diebeim Empfänger zu einem relevan-Ausgabe 62006oder Komplementfaktoren an diefusion ergibt sich besonders beiten Anstieg der GranulozytenzahlBakterien) verbessert. Die phago-Patienten mit schwerer Neutrope-auf >500/μl führen und einen klini-zytierten Organismen werdennie und lebensbedrohlichen Infek-schen Effekt erwarten lassen (2).durch nicht-oxidative Mechanis-tionen nach allogener Stammzell-men (Enzyme wie z. B. Elastase,transplantation oder nach intensi-Proteinase 3, Cathepsine, saurever Chemotherapie wie bei akutenGranulozytapherese:Phosphatase u. a.) oder oxidativeLeukämien. Trotz Therapie mit An-Vorbehandlung des Spen-Mechanismen (z. B. Bildung frei-tibiotika, Antimykotika und häma-ders und Durchführunger Sauerstoff-Radikale) abgetötet.topoietischen Wachstumsfaktorender AphereseDurch Sekretion von Zytokinensind Infektionen in der Neutrope-(Interleukin-8 [IL-8], IL-1, IL-6,niephase für etwa 40 % der Todes-Nur von Spendern mit einerTumor-Nekrose-Faktor) aktivier-fälle bei diesen Patienten verant-durch Vorbehandlung induziertenen die Granulozyten weitere anwortlich.neutrophilen Leukozytose kannder Entzündungsreaktion betei-mit einer Granulozytapherese eineligte Zellen (z. B. Makrophagen).Allerdings enthielten die bistherapeutisch ausreichende DosisFür einen therapeutischen EffektEnde der 80er Jahre verfügbarenvon Granulozyten gewonnen wer-transfundierter Granulozyten istGranulozytenpräparate nur etwaden. Zur Mobilisierung von neutro-es zwingend, dass diese komple-2-3x10 10 Zellen. Die transfundier-philen Granulozyten wird derzeitxen Funktionen der Granulozytenten, markierten Zellen konnten aufG-CSF alleine oder in Kombinationvon der Chemotaxis über Phago-den Schleimhautoberflächen, z. B.mit Corticosteroiden (z. B. Dexamet-zytose bis hin zu den oxidativenim Mund, nachgewiesen werden,hason) eingesetzt. Die bis in dieund nicht-oxidativen mikro-biozi-führten jedoch kaum zu einem sig-90er Jahre noch übliche alleinigeden Mechanismen intakt bleiben.nifi kanten Anstieg im peripherenGabe von Corticosteroiden ist in-Blut (1). Um die Zahl zirkulierenderzwischen obsolet, da die hiermitGranulozyten zumindest passagerinduzierbare Granulozytose desEntwicklung derin den Normbereich anzuheben,Spenders meist nicht ausreicht, umGranulozytentransfusionsind mindestens 4-6 x 10 10 Granu-ein Präparat mit der angestrebtenlozyten erforderlich. Erst durchZieldosis zu erhalten (Abbildung 1).Die Idee einer Granulozyten-verbesserte Vorbehandlung derIn randomisierten Studien wurdeTherapie bei neutropenischen Pa-Spender mit rekombinantem Gra-gezeigt, dass durch die Gabe vontienten wurde schon seit den 30ernulozyten-Kolonie stimulierendem5-10 μg G-CSF pro kg KG (alleineJahren des letzten Jahrhunderts inFaktor (G-CSF) und Weiterent-oder in Kombination mit Corticos-

❯❯❯Bei repetitiven täglichen Gabenvon G-CSF (5 μg/kg, 12 Stundenvor Apherese) über 5 Tage undtäglichen Granulozytapheresenkonnte ein kontinuierlicher Anstiegder Gesamtleukozytenzahlsowie der Granulozytenausbeuteverzeichnet werden (4,9 x 10 10Granulozyten im Apheresat amTag 1 und 6,7 x 10 10 am Tag 5) (9).Granulozyten sollten von Anti-CMV negativen Spendern gewonnenwerden, da auch bei gesundenpositiven Spendern in einem Teilder Leukozyten Cytomegalievirennachweisbar sind und somit fürdie meist immunkompromittiertenEmpfänger ein hohes Risiko einerInfektionsübertragung besteht(10). Die Notwendigkeit einer ausschließlichenGewinnung der Granulozytenkonzentratevon CMVnegativenSpendern wird in einerneueren Studie hinterfragt (11, 12).Die Empfängersituation und diehohe Kontamination mit Lymphozytenerfordern grundsätzlich eineBestrahlung der Granulozytenpräparatemit 30 Gy zur Prophylaxeeiner transfusionsassoziiertenSpender-gegen-Wirt-Reaktion (6).Die Kryokonservierung vonGranulozyten mit ausreichenderViabilität nach Auftauen ist mit denderzeit zur Verfügung stehendenMethoden nicht möglich. Es wirdGranulozyten 10 9 /l Granulozyten 10 9 /l21, 510,5076543210empfohlen, Granulozytenpräparateunmittelbar nach Herstellungund Freigabe zu transfundieren.Die Hämotherapie-Richtlinien gebeneine Lagerungsdauer von maximal24 Stunden an (6). NeuereDaten zeigen jedoch, dass eineLagerung der Präparate von G-CSF +/- Dexamethason-vorbehandeltenSpendern bei Temperaturenvon +22±2 °C bis 48 h möglich ist,ohne dass die Granulozytenzahlim Präparat signifikant abnimmt(13). Auch das nach Transfusionerreichbare Inkrement der Granulozytenfällt bei bis zu 24 Stundengelagerten Präparaten nicht geringeraus, so dass insbesondere fürB. A., 3 Mon., Osteopetrose2 x 7,62 x 5,02 x 4,810 10 /m 2 10 10 /m 2 10 10 /m 20 5 10Tage nach PBSCTD. L., 12 Mon., AML, Haplo-PBSCT (PBSC = G-Spender)2 x 5,52 x 5,910 10 /m 210 10 /m 20 5 10Tage nach PBSCTAbbildung 2Verlauf der Granulozytenzahl im peripheren Blut bei einem Patienten mit Osteopetrose (oben) und AML (unten),welche in Neutropenie nach allogener peripherer Blutstammzelltransplantation (PBSCT) Transfusion von„Split“-Granulozytenpräparaten ( )aus jeweils einer Granulozytapherese erhielten.pädiatrische Patienten Doppelpräparatezur „Split-Transfusion”möglich sind (Abbildung 2). Fürdie verbesserte Lagerfähigkeitder Granulozyten ist möglicherweisedie G-CSF-Vorbehandlungentscheidend, da G-CSF die Apoptosein Granulozyten hemmt. Allerdingskommt es bei Präparaten mithoher Zellzahl bei zunehmenderLagerungsdauer zu einem deutlichenAbfall des pH-Wertes (pH < 6nach 48 Stunden) und zu einer Zytokinfreisetzung,die zu vermehrtenTransfusionsreaktionen führenkönnte (14). Die Konzentration vonIL-6 und TNF ändert sich bis zu einerLagerungsdauer von 48 Stun-7Ausgabe 62006

❯❯8Ausgabe 62006den nicht (13, 15). Dagegen kommtes während der Lagerung zu einemAnstieg der IL-1- und vor allemder IL-8-Konzentration (15). Da IL-8 zahlreiche Granulozytenfunktionen(Chemotaxis, Exozytose, „Respiratoryburst“) stimuliert, könntediese Veränderung auch von Vorteilsein. Die Lagerung muss bei+22±2 °C ohne Agitation erfolgen,da Kälte Adhäsionsmoleküle aktiviertund eine Spontanaggregationder Granulozyten fördert. KältegelagerteGranulozytenkonzentratezeigen eine geringere Chemotaxis,höhere Adhäsion an Endothel,geringere Wiederfi ndungsraten inder Zirkulation nach Transfusionund geringere Migration in-vivo(16, 17). Abbildung 3 zeigt beispielhaftViabilität und Wiederfi ndungvon kernhaltigen Zellen in einemGranulozyapherese-Präparat nach24-stündiger Lagerung.UnerwünschteWirkungen bei Vorbehandlungder GranulozytenspenderDie Vorbehandlung mit G-CSFwird von den Spendern in der Dosisvon 5 μg/kg meistens gut toleriert.Es kann zu unerwünschtenArzneimittelwirkungen des G-CSFmit Knochen- und Kopfschmerzenkommen, insbesondere wenn G- CSF wegen konsekutiven Apheresenüber mehrere Tage fortgesetztwird (18). Bei höherer Dosis vonG-CSF (10 μg/kg) bestand in einerklinischen Studie ein Trend zu häufigererund stärkerer Myalgie sowieArthralgie (3) (ausführlichereDarstellung der G-CSF-Nebenwirkungenim Beitrag „HämatopoietischeStammzelltransplantation“,hämotherapie 3/2004) (19). Der Zusatz von HES bei der Apheresekann Juckreiz verursachen.Diese dosisabhängige Nebenwirkungist einer der Gründe für dieBeschränkung der maximal zulässigenZahl von 4 Granulozytapheresenpro Jahr bei Einsatz von Sedimentationsbeschleunigern(6). Abbildung 3Viabilität (gemessen mit Propidium-Iodid-Färbung in Verbindung mit Doppelmarkierung mit CD45) und Wiederfi ndungkernhaltiger Zellen in Granulozytenkonzentraten nach 2 und 24 Stunden Lagerung bei +22 °C ohne Agitation.In einer multizentrischen Studieder DGTI erklärten 85 % der 183befragten Spendern, dass sie erneutGranulozyten spenden würden(18). Nachuntersuchungen (2-4Wochen und 2 Jahre nach Granulozytapherese)erbrachten keinenHinweis auf späte, G-CSF-bedingte,unerwünschte Wirkungen (18).UnerwünschteWirkungen bei Anwendungder GranulozytenkonzentrateDie Verträglichkeit von Granulozytentransfusionenwar in neuerenStudien sehr gut. Etwa 75-80 %der Empfänger zeigten auch bei

❯❯❯mehreren Transfusionen keine unerwünschtenWirkungen. Eine rou-gegeben wurden (z. B. Stammzelltransplantation,intensive Che-kein Erfolg. Diese früheren Berichtebezogen sich jedoch vielfach auf9tinemäßige Prämedikation wirdmotherapie). Etwa ein Viertel die-kleine Fallzahlen mit Heterogeni-daher nicht empfohlen. Bei den un-ser Patienten entwickelte Anti-HLA-tät in Bezug auf Grunderkrankungerwünschten Wirkungen handeltees sich vor allem um Fieber, Schüt-Antikörper und/oder Antikörpergegen humane neutrophile Anti-und begleitender antimikrobiellerTherapie. Vor allem aber lag dieAusgabe 62006telfrost und Exanthem, deren Inzi-gene (HNA) (18). Höhere Alloim-Granulozytenzahl weit unter dendenz und Schweregrad durch lang-munisierungsraten mit bis zu 78 %heute geforderten Zellzahlen.same Transfusionsgeschwindigkeitwurden bei Patienten mit aplasti-(1x10 10 Granulozyten pro Stunde)scher Anämie oder kongenitalenDurch mehrere Studien ist belegt,reduziert werden kann. PulmonaleGranulozytenfunktionsdefektendass durch die Transfusion ausrei-Komplikationen waren dagegen(chronische Granulomatose) be-chend hoher Granulozytenzahlenselten, wurden in früheren Jahrenrichtet (23). Neben der AB0- und(Empfehlung > 2 x 10 8 /kg KG) einjedoch insbesondere in Kombinati-Rhesus-Kompatibilität wegen desvorübergehender Anstieg der Gra-on mit Amphotericin B beschriebenrelevanten Erythrozytenanteils dernuloyztenzahl in den Normbereich(20).Präparate sollte deshalb bei Gra-erreicht werden kann (24). Diesnulozytentransfusionen zusätzlichführte in den neueren Studien zuUrsache für die niedrigere Neben-eine HLA-Kompatibilität angestrebtvielversprechenden Ergebnissen,wirkungsrate könnte die veränderteund zumindest bei Transfusionsre-auch bei Patienten mit langdauern-Expression von Membranglykopro-aktionen eine Granulozytenkreuz-der Neutropenie und schwerenteinen auf Granulozyten von G-CSFprobe mit Agglutinations- (GAT)bakteriellen Infektionen oder Pilz-vorbehandelten Spendern sein. Dieoder Immunfluoreszenztest (GIFT)infektionen, die unter anti-infektiö-G-CSF-Mobilisation scheint die kli-erfolgen.ser Therapie progredient waren.nische Wirksamkeit durch Steige-Trotz dieser ungünstigen Ausgangs-rung der Chemotaxis, Phagozytosebedingungen wurden durch Gra-und Bakterizidie zu verbessern, dieKlinische Wirkung dernulozytentransfusionen bei diesenHalbwertszeit der Granulozyten zuGranulozytentransfusionPatienten Ansprechraten von 40verdoppeln und die Alloimmunisie-bis 70 % erreicht (siehe Tabelle 2)rungsrate nach Granulozytentrans-Strauss hat 1995 insgesamt 32(24-32).fusion zu senken (21). InsbesondereStudien mit Granulozytentransfu-die L-Selektin Expression ist durchsionen bei neutropenischen Pati-die G-CSF-Vorbehandlung deutlichenten analysiert. 62 % der Patien-Indikationen für Granulo-vermindert (22).ten mit bakterieller Sepsis undzytentransfusionen83 % der Patienten mit lokalisiertenEine Alloimmunisierung trittbakteriellen Infektionen haben aufAufgrund der kleinen Fallzahlenbei etwa 25 % der Patienten auf,die Therapie angesprochen. Aller-und fehlender Vergleichsgruppenwenn Granulozytentransfusionendings fand sich bei 71 % der Patien-in den Studien kann die Wertigkeitnach starker Immunsuppressionten mit invasiven Pilzinfektionender Granulozytentransfusion der-

❯❯10zeit nicht defi nitiv beurteilt werden.Es besteht in der Literatur Konsens,gillose in der Anamnese und❯ erneuter intensiver Therapieherrscht werden konnten (34)(siehe auch Abbildung 4).dass eine Indikation in folgenden(Hochdosis-Chemotherapie;Ausgabe 62005Situationen gegeben sein kann:1. Therapeutische Granulozyten-Stammzelltransplantation) mitschwerer Neutropenie vonmindestens 10 Tagen.Ausblicktransfusion bei Patienten mit(33)Die G-CSF-Mobilisation der❯ lebensbedrohlichen InfektionenGranulozytenspender hat zu einer(pulmonale Infi ltrate, Weichteil-Eine besondere Situation ist diequantitativen und qualitativen Ver-infektionen wie nekrotisierenteneonatale Sepsis. Auch hier sindbesserung der Granulozytentrans-Fasziitis, neutropenische Typhli-die Daten insgesamt aufgrund klei-fusion geführt. Die neueren klini-tis, gramnegative Sepsis) undner Fallzahlen inkonklusiv, aberschen Daten sind deshalb vielver-❯ Resistenz auf anti-mikrobielleeinzelne Berichte sprechen für ei-sprechend und weisen darauf hin,Therapie undnen Vorteil von Granulozytentrans-dass die Granulozytendosis ein❯ schwerer Neutropeniefusion im Vergleich zur Immunglo-wichtiger Faktor für die Wirksam-(< 0.2 - 0.5 x 10 9 /μl) undbulin-Therapie (31).keit von Granulozytentransfusio-❯ voraussichtlich weiterer Neutro-nen ist. Es fehlen allerdings pros-penie-Dauer von zumindest 5Auch bei der seltenen septisch-pektive randomisierte Studien mitTagen.en Granulomatose, einer angebo-großer Fallzahl, um die Indikation(24-32)renen Störung der Sauerstoffradi-und die optimale Granulozyten-kalbildung in den Granulozyten,gabe zu defi nieren. In klinischen2. Prophylaktische Granulozyten-wurde beschrieben, dass durchStudien muss die Wirksamkeittransfusion bei Patienten mitGranulozytentransfusionen schwe-bei verschiedenen Indikationen❯ invasiver pulmonaler Asper-re infektiöse Komplikationen be-(prophylaktische/therapeutischePatienten Granulozyten- Granulozyten Ansprechen LiteraturTransfusionen pro Transfusion (n/n Patienten)(Anzahl) (Anzahl)30 301 0,5 x 10 9 /kg KG 21/30 Überleben Peters et al., 199919/30 Kontrolle der Infektion19 165 82 ± 2,3 x 10 9 * 8/11 Besserung der invasiven bakteriellenInfektion oder Pilzinfektion Price et al., 2000❯Tabelle 2Klinische Studienmit G-CSF Dexamethason-mobilisiertenGranulozyten beiPatienten mitNeutropenie13 70 31 x 10 9 ** 9/15 Infektionsepisoden Besserung oderÜberwindung der Infektion Cesaro et al., 200125 55 66 x 10 9 *** 10/25 Insgesamt Besserung der4/16 bakteriellen Infektion6/9 Pilzinfektionen Lee et al., 200132 120 82 x 10 9 *** 19/32 Ansprechen der Infektion Lee et al., 2004* Mittelwert +/- Standardabweichung ** Leukozytenzahl (mit ca. 90-95 % Granulozyten); Median *** Mittelwert

❯❯❯vor Abbildung 4Leberabszesse vor und nach Granulozytentransfusionen beieinem Patienten mit septischer GranulomatoseLymphozyten des Stammzellspendersfür den Transplantatempfänger,leichtert und die Eradikation derrestlichen malignen Zellen den11spielen in der modernen Stammzell-transplantierten oder in Form vontransplantationsmedizin hämato-/Spenderlymphozyteninfusionennachonkologischer Patienten eine zunehmendwichtigere Rolle. Spen-applizierten Lymphozyten überlassen.Die damit verbundene Ri-Ausgabe 62006derlymphozyteninfusionen könnensikoreduktion macht die allogeneeine effektive Transplantat-gegen-Stammzelltransplantation inzwi-Leukämie bzw. Tumor („graft-ver-schen auch für ältere Patienten zu-sus-leukemia“; GvL) Reaktion ver-gänglich.mitteln, die zu einer lang anhaltendenVollremission führt, aber aucheine Transplantat-gegen-Wirt-Re-Spenderlymphozyten:aktion („graft-versus-host disease“;Gewinnung durch Voll-Gabe; Bakterien-/Pilzinfektionen)GvHD) hervorrufen.blutspende oder Aphereseweiter evaluiert werden. Wichtig istdabei auch, prädiktive Faktoren für1990 berichteten Kolb et al. (36)Grundsätzlich bestehen zweidas Ansprechen auf die Therapieerstmalig über die klinische An-Möglichkeiten Spenderlymphozy-zu entwickeln. Die kürzlich berich-wendung von DLI zur Behandlungten zu gewinnen:tete Beobachtung, dass die szinti-von Rezidiven der chronischen my-graphisch nachgewiesene Anrei-eloischen Leukämie (CML) nach1. durch Isolation der incherung von 99mTc-HMPAO-mar-hämatopoetischer Stammzelltrans-einer Vollblutspende (500 ml)kierten Granulozyten in Pilzinfek-plantation. Seitdem sind Spender-enthaltenen Leukozyten (Buffytionsherden mit dem Ansprechenlymphozyten fester Bestandteilcoat) oderkorreliert, bietet hierzu einen inter-vieler allogener hämatopoetischer2. durch eine selektiveessanten Ansatz (35).Progenitorzell-Transplantations-Anreicherung mononuklearerprotokolle (37, 38). In den letztenLeukozyten aus dem zirkulie-Jahren sind Therapiekonzepte mitrenden Blut durch eine Leuko-Spenderlymphozyteninfusionreduzierter, nicht myeloablativerKonditionierung des Patienten entwickeltworden, welche vor allemzytapherese.Der Vorteil der Vollblutspendeauf einer Immunsuppression desliegt in der Einfachheit der Entnah-Entwicklung derEmpfängers basieren, ohne re-me und dem geringen AufwandSpenderlymphozyten-siduelle Tumorzellen zwingendund Spenderrisiko. Allerdings istTherapiebeseitigen zu wollen (39). Durchdie Menge der therapeutisch ver-dieses Konzept wird eine lang dau-fügbaren Lymphozyten bei diesemSpenderlymphozyten („Donorernde Aplasie vermieden, die Re-Entnahmemodus sehr begrenzt,Lymphocyte Infusions“; DLI), i. e.konstitution der Hämatopoiese er-da technisch bedingt nur ca. 60 %

❯❯12Ausgabe 62006der in den 500 ml Vollblut vorhandenenLeukozyten separiertwerden können. Wegen der großenMenge an Granulozyten undErythrozyten im Buffy coat ist zurHerstellung eines Lymphozytenkonzentratesein weiterer Aufreinigungsschritt(z. B. mit einem Dichtegradienten)erforderlich, der ineinem GMP-gerechten Reinraumdurchgeführt werden muss. Aus500 ml Vollblut eines Spenders mitLeukozyten von z. B. 5 G/l und 30 %Lymphozyten können etwa 1-2 x 10 8CD3 + T-Zellen gewonnen werden.Für DLI-Therapieansätze mit Dosiseskalationist diese Menge bei Erwachsenenunzureichend.Bei der Leukozytapherese kanndirekt eine angereicherte Lymphozytenpopulationaus dem zirkulierendenBlut des Spenders entnommenwerden (Abbildung 5 und 6).Hierbei wird etwa das 1,5-2fachedes Gesamtblutvolumens desSpenders über einen geeignetenZellseparator prozessiert, so dassnach ca. 180 Minuten ein GMPgerechthergestelltes Präparat mit0,5 bis 1,5 x 10 10 Leukozyten vorliegt.Bei adäquater Einstellungdes Verfahrens enthält ein solchesPräparat (Abbildung 7) zwischen50-65% CD3 + T-Lymphozyten,etwa 10-13 % CD19 + B-Lymphozyten,ca. 8-12 % CD56 + NK-Zellen,10-25 % Monozyten und nur 1-4 %Granulozyten sowie einen Erythrozytenanteilvon 0,2-2 % HK (Abbildung8).Bei diesen Präparaten ist ohneweitere Manipulation direkt einetherapiegerechte PortionierungAbbildung 5Blutbild eines gesunden Lymphozytenspenders vor AphereseAbbildung 6Blutbild des selben Lymphozytenspenders nach AphereseAbbildung 7Histogramm und zelluläre Zusammensetzung des DL-Apheresepräparates des selben Zellspenders.Auffällig ist die fast reine mononukleare Population im rechten Histogramm bei nahezu vollständigerAbreicherung granulozytärer Zellen im Vergleich zu den Blutbildern in Abbildung 4 und 5.

❯❯❯Abbildung 8 Zelluläre Zusammensetzung von DL-Apheresepräparaten und Kryokonservierung möglich,es sei denn, dass Lymphozyten-Subpopulationen mit z. B. Immunmagnetverfahrenan- oder abgereichertwerden sollen. Dank desgeringen Granulozytengehaltes 13Ausgabe 62006liegt die Viabilität solcher Präparatenach Kryokonservierung zwi-vorwiegend auf zitratbedingte,Milz ersetzt werden. Es gibt bis-schen 89 und 97 % bei einer Wie-passagere Elektrolytverschiebun-her klinisch keine Hinweise aufderfi ndungsrate von 92 bis 97 %.gen und den Lymphozytenverlusteine kurzfristige oder chronischeEin DLI-Apheresepräparat decktbegrenzen. Bis auf eine leichteBeeinträchtigung der Immunitätmeist vollständig den Bedarf einerReduktion der Thrombozyten umdes Lymphozytenspenders. Aller-kompletten Spenderlymphozyten-ca. 20 % entspricht das Blutbild nachdings liegen bislang auch keinetherapie ab, die oftmals in halblo-Apherese weitestgehend dem Aus-systematischen Untersuchungengarithmischen Schritten eskalie-gangsbefund (Abbildung 5 und 6),zu potentiellen Verschiebungenrend von 1 x 10 6 bis 1 x 10 8 CD3 +obwohl ca. 8 x 10 9 Lymphozyteninnerhalb der Lymphozytensub-T-Zellen/kg KG des Empfängersbei einer DLI-Apherese entnommenpopulationen nach Lymphozyta-geplant ist.werden. Bei einem hypothetischenpherese und deren Reaktionsspek-Gesamtblutvolumen eines Spen-trum auf unterschiedliche StimuliUnerwünschteWirkungen beimLymphozytenspenderders von 5 l, Leukozyten von 5 G/lund 30 % Lymphozyten entsprechen8x10 9 Lymphozyten etwa107 % der zirkulierenden Lympho-vor. Deshalb sollten Lymphozytapheresespendenvorerst nur einmalbzw. nur nach langen, klinischunauffälligen Intervallen erfolgen.zytenmenge und bedeuten somitEntsprechende umfassende klini-Inzwischen werden über 70 %ein vollständiges Abschöpfen allersche und labortechnische Untersu-der Spenden allogener hämato-zirkulierenden Lymphozyten. Nachchungen des Spenders zum Schutzpoietischer Stammzellen durchder Apherese sind die Absolutwer-des Spenders als auch des Empfän-Apheresen und nicht durch Kno-te für Leukozyten jedoch praktischgers sind Voraussetzung.chenmarkentnahmen gewonnen.unverändert und auch die relativenDie meisten DLI-Spender kennensomit das Verfahren der Zytapheresebereits aus eigener Erfahrung.Eine G-CSF Mobilisation wiebei der Stammzellspende ist nichtWerte im Differentialblutbild zeigenbis auf eine geringe Reduktionder Lymphozyten von 2 bis 5 % keineVeränderungen. Es ist also anzunehmen,dass im Rahmen einesUnerwünschteWirkungen bei derAnwendung der Spenderlymphozytenerforderlich, so dass die Spenderi-physiologischen Fließgleichge-siken denen anderer unstimulierterwichts, die entnommenen zirku-Bei dem GvL-Effekt handelt esApheresen wie z. B. der Thrombo-lierenden Lymphozyten durch Re-sich um eine zytotoxische, durchzytapherese entsprechen und sichzirkulation aus Lymphknoten undSpenderlymphozyten vermittelte

❯❯14Reaktion gegen residuelle Empfänger-Tumorzellen.Der Unter-Klinische Wirkungder Spenderlymphozyten-ko verbunden (Wiesneth/Hale). DieMöglichkeit periphere Blutstamm-schied zur GvHD liegt lediglichtherapiezelltransplantate primär von T-Zel-Ausgabe 62005in der Zielzelle. Ein GvL-Effektist zwar nicht zwingend mit einerGvHD verbunden, dennoch istDie größten Erfolge mit DLI wurdenbisher in der Behandlung vonlen zu reinigen (43, 70) und zu einemspäteren Zeitpunkt T-Zellen desStammzellspenders bzw. T-Zellsub-bei der Gabe von Spenderlym-allogen transplantierten CML-Pati-populationen gezielt zu transfundie-phozyten mit einer begleitendenenten erzielt. Hierbei ließen sich beiren, erlaubt eine gestaffelte allogeneGvHD zu rechnen. Der Schwere-beginnenden Rezidiven in 60 bisTransplantation mit Reduktion dergrad dieser unter Umständen le-80 % der Fälle Vollremissionen er-transplantationsassoziierten Risikenbensbedrohlichen unerwünschtenreichen (41). Auch bei akuter myeloi-und Beibehaltung des Graft-versus-Wirkung hängt sowohl von der Men-scher Leukämie, multiplem Myelom,Tumor-Effektes. Abbildung 9 zeigtge infundierter T-Zellen, vor allemmalignem Lymphom, Nierenzellkar-ein Beispiel für eine sequentielleder CD8-positiven T-Zellen, alszinomen und Brustkrebs zeigen DLITransplantation mit primär gemisch-auch von der Anzahl und Ausprä-eine Erfolgsrate von ca. 30 bis 40 %tem Chimärismus nach Transplanta-gung der HLA-Inkompatibilitäten(42). Ein deutlich schlechteres An-tion und anschließend komplettemzwischen Spender und Empfängersprechen weisen Patienten mit aku-Chimärismus im peripheren Blutab.ter lymphatischer Leukämie auf.nach zusätzlicher DLI-Gabe.Die Wahrscheinlichkeit eineVoraussetzung für die AnwendungGvHD zu entwickeln ist bei einemvon DLI ist eine begleitende oderIndikationen fürHLA-identen Familienspender ge-vorherige allogene TransplantationSpenderlymphozyten-ringer als bei HLA-identen Fremd-mit den Stammzellen des Lympho-therapiespendern oder Spendern mit HLA-zytenspenders, wobei nach Ange-Inkompatibilitäten. Um eine schwe-hen des Transplantats das GvHD-Indikationen für Spenderlympho-re GvHD, die mit einer hohen Mor-Risiko abnimmt. Neben der ag-zytentherapie bestehen in folgen-talität assoziiert ist, zu vermeiden,gressiven und myeloablativenden Situationen:werden bei Spenderlymphozyten-Konditionierung des Patienten, istgaben je nach Risiko langsam es-die Transplantat-gegen-Wirt-Reak-1. Therapeutische DLIkalierende Dosierungen von 1 x 10 5tion (GvHD) das größte Risiko fürbei Patienten mitbis 1x10 8 Lymphozyten pro kgden Empfänger einer allogenen❯ Rezidiven malignerEmpfängergewicht appliziert. BeiStammzell-Transplantation (40).hämatologischer Erkran-ausgeprägten HLA-Inkompatibili-kungen nach allogener Blut-täten kann als GvHD-ProphylaxeDie T-Zelldepletion des Trans-stammzelltransplantationggf. auch eine CD8-Depletion derplantats stellt die effektivste GvHD-(insbesondere CML, AML,Präparate durchgeführt werden,Prophylaxe dar, ist allerdings aufMultiples Myelom) (44, 45).ohne dass der GvL-Effekt verlorenGrund des reduzierten GvL-Effek-❯ Residuellen solidengeht (40).tes mit einem höheren Rezidivrisi-Tumoren nach allogener

❯❯❯ sprechenden Zellklonen über Kulturbankenhergestellt werden, wiedas Beispiel der NK-Zelllinie NK-9215zeigt (siehe Abbildung 11). Ausgabe 62006 Natürliche Killerzellen(NK-Zellen)Abbildung 9Sequentielle Chimärismus-Analyse nach allogener Blutstammzelltransplantation mit reduzierter Konditionierungsintensität und anschließenderLymphozyteninfusion (DLI). Die Analyse der „Single-Tandem-Repeats“ (STR) zeigt, dass bei initialer hämatopoietischerRekonstitution nach Transplantation sowohl Spender- als auch Empfängerzellen nachweisbar sind (gemischter Chimärismus) underst nach DLI-Therapie ein kompletter Chimärismus mit ausschliesslich spender-spezifi schen STRs erreicht wurde.Funktion vonNatürlichen KillerzellenTransplantation und ausgeschöpfterkonventionellerTherapie (z. B. Nierenzellkarzinom;Brustkrebs) (46, 47).2. Prophylaktische DLIbei Patienten mit❯ Hohem Rezidivrisiko beiallogener Transplantation(AML, CML, Multiples Myelom(42, 48) und /oder❯ Reduzierter, nicht myeloablativerKonditionierung vorallogener TransplantationAusblickSpenderlymphozyten stellen bereitsheute einen festen Bestandteilmoderner Therapiekonzepte mitallogener Blutstammzelltransplantationdar und leisten mit ihrem„Graft-versus-Tumor-Effekt“ undder Absicherung des Transplantatseinen wesentlichen Beitragzum verbesserten Langzeitüberlebendieser Patienten. ImmunmagnetischeSelektionsverfahren zurGewinnung von Subpopulationenwie CD4 + T-Helferzellen, CD4 + /CD25 + regulatorischen T-Zellenoder CD56 + / CD3 - natürlichen Killerzelleneröffnen ein weites Anwendungsspektrumbis hin zur haploidentenStammzelltransplantation.Eine vielversprechende Perspektivestellt die Generierung von Tumor-oder virusspezifi schen Zellen,wie Anti-CMV spezifischen zytotoxischenT-Zellen oder tumorspezifi -schen Killerzellen dar, die in-vitrokultiviert und expandiert werden.Zellen für solche Vakzinierungsstrategienkönnten von Spenderngewonnen, aber auch mit ent-Das Auftreten und die Progressionvon malignen Erkrankungenstehen in einem direkten Zusammenhangzur Fähigkeit des körpereigenenImmunsystems Tumorzellenzu erkennen und auszuschalten.Mechanismen, die es Tumorzellenerlauben, der körpereigenen Immunabwehrdurch natürliche Killerzellen(NK-Zellen) und andere Immunzellenzu entkommen, spieleneine entscheidende Rolle bei derMetastasierung und Progressionmaligner Erkrankungen (49, 50).NK-Zellen stellen eine Untergruppeder Lymphozyten dar und bildenals Teil des angeborenen Immunsystemsdie „erste Welle“ derkörpereigenen Immunabwehr gegenvirusinfi zierte Zellen und Tumore.Ihre Zytotoxizität ist nichtMHC-restringiert und NK-Zellenvermögen ihre Zielzellen spontanund ohne vorherige Sensibilisie-

❯❯16Ausgabe 62006Rezeptorrung durch Antigen-präsentierendeZellen (APC´s) zu zerstören.NK-Zellen töten die Tumorzellenvorrangig durch Freisetzung desEnzyms Perforin, welches die Zellmembrander Zielzellen zerstörtund den Zelltod durch die ebenfallsvon NK-Zellen freigesetzteEsterase Granzym B einleitet.Zusätzlich zu diesem direktenlytischen Effekt des Granzym/AktivierendeNK-Zellrezeptoren2B4NKp44NKp30NKp46CD16NKG2DNKp80DNAMInhibierendeNK-ZellrezeptorenILT2KIR3DL2KIR3DL1KIR2DL4KIR2DL1,2,3CD94LigandCD48Infl uenza/nicht bekanntnicht bekanntInfl uenza/nicht bekanntIgGMIC-A, MIC-Bnicht bekanntCD112/CD155MIC-A,-B,-GMHC-AMHC-BMHC-A,-B,-GMHC-CMHC-CTabelle 3Einige inhibitorische und aktivierende NK-Zellrezeptorenund ihre LigandenPerforin-Systems wird eine Abtötungder Zielzellen durch Moleküleder Tumor Nekrose Faktor (TNF)Familie vermittelt, wie z. B. FAS/FASL, TRAIL und TNF-alpha (Abbildung10). Die Aktivität der NK-Zelle gegenüber maligne entartetenZielzellen hängt von verschiedenenFaktoren ab, wie z. B. derBindung der NK-Zelle an die zulysierende Zielzelle durch Zelladhäsionsmoleküle(LFA-1/ICAM-1),der Regulation der NK-Zellaktivitätdurch eine Vielzahl aktivierenderund inhibierender Rezeptoren (Tabelle3), sowie der Sensitivität derTumorzellen gegenüber einer Perforinund Granzym vermitteltenLyse (51, 52). Nach der Bindung andie Zielzelle wird die Aktivität derNK-Zellen durch ein fein abgestimmtesGleichgewicht aktivierenderund inhibierender Rezeptoren reguliert.MHC Klasse I Moleküle aufZielzellen dienen als wichtigste Ligandenfür eine große Zahl inhibitorischerRezeptoren, die auf NK-Zellen klonal exprimiert werden.Während dieser Mechanismus dazudient, gesundes Gewebe vor einerZerstörung durch die körpereigenenNK-Zellen zu schützen,führt eine Hochregulation bestimmterMHC Klasse I Moleküle unterUmständen dazu, dass Tumorzellender Immunabwehr durch NK-Zellen entkommen können. Sokonnte z. B. für das monomorpheHLA-G Molekül gezeigt werden,dass dessen Expression auf sonstfür eine Lyse empfänglichen Zielzellenzu einer Resistenz gegenüberNK-Zellen führt (53, 54). ImGegensatz dazu führt ein Mismatchim HLA-C Locus bei haploidenterStammzelltransplantation zu einerlang anhaltenden Remission derLeukämie, was auf einen durch NK-Zellen vermittelten GvL-Effekt zurückgeführtwird (55).Gewinnung undIsolation von natürlichenKillerzellenIm Gegensatz zu Therapieansätzenmit T-Killerzellen bedürfenNK-Zellen keiner Sensibilisierunggegen spezifi sche Antigene durchAPC´s wie z. B. dendritische Zellen.Wie sich von ihrem Namen ableitenlässt, ist ihnen ihre Aktivitätgegen virusinfi zierte und maligneentartete Zellen „natürlich“ gegeben.Die Aktivität von NK-Zellenhängt allerdings von verschiedenenZytokinen ab, wobei insbesonderedas Interleukin-2 eine wichtigeRolle spielt (56, 57). In frühenklinischen Studien wurden NK-Zellenauch als Lymphokin-aktivierteKillerzellen (LAK) bezeichnet. Diesleitet sich davon ab, dass NK-Zellentypischerweise aus dem peripherenBlut isoliert wurden, indem

❯❯❯ 17 Ausgabe 62006 Abbildung 10Die Abbildung zeigt ein hypothetisches Schema über die potentielle Rolle von NK-Zellen in der Immunabwehr vonTumoren und die Interaktion mit Komponenten des Immunsystems.man mononukleäre Zellen unterZugabe von hohen KonzentrationenInterleukin-2 (IL-2) expandiert hat.Heute weiß man, dass die Mehrzahl(> 90 %) der unter diesen Bedingungenexpandierten Lymphozytenpolyklonale T-Zellpopulationen darstelltenund nur zu einem sehr geringenTeil aktivierte NK-Zellenenthielten. Die klinische Anwendungvon LAK Zellen mit einemhohen Gehalt an autologen T-Lymphozytenmacht nach dem heutigenKenntnisstand keinen Sinn, weilT-Lymphozyten ihre Wirkung nurnach vorheriger Sensibilisierungdurch APC´s entfalten können. Füreine allogene Anwendung sindLAK-Zellen grundsätzlich nicht geeignet,weil T-Lymphozyten im Gegensatzzu NK-Zellen alloreaktivsind und zur Ausbildung einer fürden Patienten lebensgefährlichenGvH-Reaktion führen würden. Inden letzten Jahren ist man daherdazu übergegangen, NK-Zellendurch immunmagnetische Verfahrenzu isolieren. Ausgangspunkt füreine solche Isolation von NK-Zellensind mononukleäre Zellpräparate,die durch Apherese gewonnen werden.Da NK-Zellen und T-Lymphozytengemeinsame Vorläuferzellenhaben und man sicherstellen möchte,dass bei der anschließendenAktivierung und Expansion der NK-Zellen mit IL-2 keine T-Lymphozytendie Zellkultur überwachsen,hat es sich als nützlich erwiesen,der Isolation von NK-Zellen durchCD56-spezifi sche, immunmagnetischgekoppelte Antikörper eineDepletion der CD3-positiven T-Lymphozyten vorzuschalten. Aufdiese Weise erhält man eine relativreine Population von CD3-negativen/CD56-positiven NK-Zellen (58).Klinische Wirkung vonnatürlichen Killerzellen:Verschiedene Studien untersuchtendie Wirkung von NK-Zellen beibösartigen Erkrankungen durchentweder endogene Aktivierungder patienteneigenen NK-Zellendurch Administration von z. B. Interleukin-2oder durch Rekonstitutionder NK-Zellantwort durchadoptiven Transfer von ex-vivo expandiertenautologen (59-62) oderallogenen (58, 63, 64) NK-Zellen. DieSicherheit und Effi zienz einer NK-Zelltherapie wurde hierbei bei solidenTumoren (60-63) und bei hämatologischenErkrankungen (58,64) untersucht. Bei der Behandlungvon Leukämien wurden NK-Zellenin Kombination mit einer Hochdosis-Chemotherapieeingesetzt, umeinen GvL-Effekt zu verstärken,ohne eine potentiell lebensgefähr-

❯❯18 liche GvH-Erkrankung zu induzieren,welche vorrangig durchalloreaktive T-Lymphozyten ver-stimmter Leukämien beiträgt. Sozeigte eine retrospektive Studiebei Patienten, die zur BehandlungAusgabe 62006mittelt wird. Während sich die systemischeApplikation von IL-2 inden Dosierungen, welche für eineihrer akuten myeloischen Leukämie(AML) ein Stammzelltransplantateines Spenders mit einemimmunstimulatorische Wirkung„Missmatch“ im HLA-C Locus er-am Tumor benötigt werden, alshalten haben, eine lang anhalten-wenig tolerabel herausgestellt hat(62), führte die wiederholte i. v.de Remission ihrer Grunderkrankung.Bei NK-sensitiven Leukämien,Applikation von bis zu 10 11 NK-Zel-wie z. B. der AML, könnte der ad-len zu keinen Nebenwirkungenoptive Transfer von NK-Zellen desund wurde von den Patienten gutStammzellspenders daher einentoleriert (63). Allerdings ließ sichpotenten antileukämischen Effektnur bei einigen Patienten ein thera-vermitteln (55). Insbesondere impeutischer Teilerfolg erzielen (65).Rahmen von haploidenten Transplantationen,bei denen Spender-Einen neuen Aufwind hat dielymphozyten wegen der GefahrTherapie maligner Erkrankungeneiner GvH-Reaktion nicht angewen-mit NK-Zellen durch Beobachtun-det werden können, wurden dahergen erfahren, die darauf hinwei-mehrere klinische Studien initiiert,sen, dass die Fähigkeit von Leukä-die die Sicherheit und Effi zienz ei-miezellen einer Immunantwortner Immuntherapie immunmag-durch NK-Zellen zu entkommen,zu der schlechten Prognose be-netisch isolierter, CD3-negativerNK-Zellen untersuchen (58, 64). Esbleibt abzuwarten, ob die vorteil-Abbildung 11Konzept einer, vom Immunstatus desPatienten unabhängigen, Immuntherapiemit NK-92NK-92 sind eine immortalisierte NK-Zelllinie,die vom Immunstatus des Patienten unabhängig, imSinne einer passiven Immuntherapie intravenös verabreichtwerden kann. Zur Expansion von therapeutischen NK-92Dosierungen, wird eine Charge einer unter GMP-Bedingungenhergestellten Masterzellbank aufgetaut und die Zellen in biszu 20 L Kulturen expandiert.Vor einer Anwendung werden die Zellen durchZentrifugation auf ein Volumen von 300 ml eingeengtund mit 10 Gy bestrahlt. Hierdurch wird eine Proliferationder Zellen im Patienten verhindert. Die Zellen sind bei einerBestrahlung von 10 Gy noch bis zu 72 h aktiv. Die Testungzur Freigabe der Präparate umfasst Untersuchungen zurZellzahl, Funktion der NK-Zellen und die Untersuchung aufkontaminierende Pathogene (Bakterien/Mykoplasmen)hafte Prognose der transplantiertenAML Patienten mit einem HLA-C Mismatch in klinisch effi zienteZelltherapien unter der Verwendungvon NK-Zellen mündet.Klonale NK-Zelllinien zuradoptiven ImmuntherapieDa die Aktivität von NK-Zellenzwar durch MHC Klasse I reguliert,Fortsetzung auf Seite 19

HarnblasenkarzinomAbbildung 12In-vitro Aufnahme von NK-Zellen, die ein Spheroid eines Harnblasenkarzinoms (RT-Zelllinie) umlagern, um es anschließend zu zerstören.(Aufnahme: Dr. W. Glinke, Universitätsklinikum Frankfurt am Main)❯❯❯Natürliche Killerzellenaber ihre Antwort nicht MHC restringiertist, lassen sich NK-Zellenpotentiell auch ohne besondereBerücksichtigung des HLA-Phänotypseines Patienten ungerichteteinsetzen. Vor diesem Hintergrundwären NK-Zelllinien geeignet, einein Bezug auf den Patienten ungerichteteZelltherapie zu ermöglichen.Zudem braucht man nicht aufdie patienteneigenen NK-Zellen zurückgreifen,die durch die immunsuppressivenBehandlungen derGrunderkrankung, wie z. B. Bestrahlungund Chemotherapie, oftmalsin ihrer Funktion stark eingeschränktsind. Idealerweise würdensich für derartige ZelltherapienNK-Zelllinien anbieten, weil dieseeine standardisierte und zentralisierteHerstellung des Zellpräparateserlauben würden (Abbildung11). Bisher konnten jedoch nur wenigeNK-Zelllinien von Patientenmit Lymphomen der NK-Zellreiheals stabile Zellkultur etabliert werdenund diese unterscheiden sichstark in ihrer noch erhaltenen zytotoxischenAktivität gegenübervirusinfi zierten und maligne entartetenZellen (66, 67). Für zelltherapeutischeAnwendungen erscheintdie Zelllinie NK-92 besonders geeignet,da sie eine hohe Aktivitätgegen eine Reihe solider (Harnblasenkarzinom,malignes Melanom)und hämatologischer (AML, Lymphome)Tumore aufweist. NK-92-Zellen wurden in den letzten Jahrensystematisch für eine klinischeAnwendung weiterentwickelt undstellen die einzige NK-Zellliniedar, welche derzeit in klinischenStudien Anwendung findet (68).Der Mechanismus, der es NK-92-Zellen erlaubt, maligne entarteteZellen effektiv zu erkennen und abzutötenohne allogenes, gesundesGewebe oder Zellen anzugreifen,ist nicht bekannt. Man nimmt jedochan, dass der besondere Phänotypvon NK-92-Zellen zu diesenEigenschaften beiträgt. So weisenNK-92-Zellen zwar eine hohe Dichteaktivierender NK-Zellrezeptorenauf ihrer Oberfläche auf, die meisteninhibierenden Rezeptoren werdenjedoch nicht exprimiert.AusblickIn ersten klinischen Studien habensich wiederholte Gaben vonbis zu 10 10 NK-92-Zellen als überausverträglich erwiesen und führtenbei den behandelten Patientenzu keinerlei Nebenwirkungen. Indiesen derzeit noch laufenden PhaseI Studien wurden nur Patientenmit fortgeschrittenen Tumoren eingeschlossen,dennoch ließ sich dieProgredienz der Erkrankung teilweiseaufhalten. Die NK-92-Zellestellt auch eine ideale Plattform füreine zielgerichtete NK-Zelltherapieim Sinne eines „Retargetings“durch Expression tumorspezifi -scher chimärer Antigenrezeptorendar. Die Expression von chimärenAntigenrezeptoren in NK-Zellenführt zu einer effi zienten ZytolyseNK-resistenter Tumorzellen (69).Die genetische Manipulation derNK-Zelllinie NK-92 ermöglicht eineeffektive Kombination zellulärerund antikörperbasierter Tumortherapienunter Erhalt der Vorteile,die eine – in Bezug auf den Patientenungerichtete – Herstellung, Gewinnungund Anwendung im Sinneeines Fertigarzneimittels mit sichbringt.Die Literaturhinweise fi nden Sie imInternet zum Downloadwww.drk.de/blutspende19Ausgabe 62006