Adipozyt - Universität zu Lübeck
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2 Material und Methoden<br />
Herstellung der gebrauchsfertigen Atorvastatinlösung. Atorvastatin wurde für jeden<br />
Versuchtag frisch in 100 % Methanol gelöst. Es wurde jeweils eine 10 mM Stocklösung in<br />
benötigten Mengen angesetzt. Diese wurde je nach benötigter Konzentration mit 100 %<br />
Methanol weiter verdünnt. Dann wurde Atorvastatin in das Zellmedium pipettiert und<br />
dabei 1:1000 verdünnt.<br />
Basalkontrolle. Als Basalkontrolle für alle Versuche wurde 0,1 % Methanol verwendet.<br />
Oil Red O Lösungen<br />
Substanz Konzentration/Menge<br />
Stocklösung<br />
Oil Red O<br />
Isopropanol<br />
Färbelösung<br />
Stocklösung<br />
aqua bidest<br />
Puffer für MTT<br />
0,5 g<br />
100 ml<br />
60 %<br />
40 %<br />
Substanz ad DMSO Konzentration<br />
Lysispuffer für MTT-Test<br />
SDS<br />
Eisessig<br />
Reagenzien für RNA-Nachweis und Isolation<br />
10 %<br />
0,6 %<br />
Substanz Konzentration<br />
TBE (pH 8,0)<br />
Tris Base<br />
Borsäure<br />
EDTA<br />
890 mM<br />
890 mM<br />
20 mM<br />
DEPC-Wasser. DEPC 1:1000 in aqua dest. (lichtgeschützt) 30 min rühren. Über Nacht<br />
lagern, dann autoklavieren.<br />
Agarose-Gel. 2 % Agarose in TBE aufkochen und kurz abkühlen lassen.<br />
Reagenzien für cDNA-Synthese<br />
Substanz ad aqua dest. Konzentration<br />
Primer-Mix für cDNA-Synthese<br />
Oligo-dt Primer<br />
dUTP<br />
dATP<br />
dCTP<br />
4 nM<br />
250 µM<br />
250 µM<br />
250 µM<br />
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