Mikrotom Vortrag Sartorius - Mikroskopfreunde-Nordhessen

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6. ttDie Gef riermethode und typische obj ekte dafürrtVortragende: Frl. RötticherNach der Gefriermethode wird Gewebegut geschnitten, von dem irr möglichstkurzer Zeit eine Diagnose benötigt wird. Es sollte stets in einer S/"igen Formalin-Lösungfixiert werden, wobei man eine halbe bis eine Stunde in einemWasserbad gut erwärmt" Die Schneidbarkeit hängt nicht von der Größe, sorrdernvon der Konsistenz des Gewebes ab, d.h. ob es fest oder lose und zetfallenist. Die Gefriermethode wird anderen auch deshalb gern vorgezogen'da bei ihr das Gewebe am besten erhalten bleibt, während die verschiedenenEinbettungsverfahren stets zu Schrumpfungen des Materials führen.Das abgespülte Gewebestück wird auf ein angefeuchtetes Filterpapier und beid.esgemeinsam auf den Gefriertisch des Mikrotoms gelegt. Dabei ist daraufzu achten, daß äußere Kapseln od.er Häute an der dem Messer zugewandtenSeite liegen, damit sie beim Schneiden nicht abgerissen werden" Muskelfasernorientiert man arn günstigsten quer zum Messer"Indem man in kurzen Abständen etwas Kohlensäure in den Gefriertisch einläßt'1äßt man das Gewebestück von unten her etwa 3 bis 4 mm hoch gefrieren. Derweiche ungefrorene Teil wird nun vorsichtig geschnitten, wobei rnan daraufachtet, daß das Mikrotommesser nicht in die härtere gefrorene Zote gerät.Niemals darf man von gefrorenen Objekten dicke Schnitte abschneiden, wennman nicht die Schneide des Me*e ers stark gefährden will" Die übliche Schnittstörkebewegt sich zwischen l0 und 20 1u,Miteinem Pinsel oder auch der Fingerkuppeüberträgt man den Schnitt in dine Schale mit Wasser" Wenn rnan denpinsel vorher rniiSOTigem Alkohol benetzt, streckt er sich besonders gut aufder .lMasseroberfläche. Von hier wird er mit einem Objektträger aufgenomrnenund mit einer feinen Nadel auseinandergezogen" Fettreiches Gewebe rnachtSchwierigkeiten, weil es leicht am Messer kleben bleibt" Hier hilft stets Alkoholoder Aether. Beides darf man jedoch nur nehmen, wenn kein Fettnachweiserbracht werden muß, da Alkohol und Aether das Fett zerstören. Sind Fettnachweiseerforderlich, so wählt rnan eine Gelatine-Einbettung. Die Gelatineblöckichen werden in ZO/"igem Formalin gehartet und dann im Gefrierzustand geschnitten"Das Aufkleben der Schnitte erfolgt rnit EiweißgLyzerin.Hat man einen Gefrierapparat mit einer Messerkühlvorrichtung,, so ist man auchin der Lage, völlig unfixiertes Material zu schneiden'Sollen Diagnosen in wenigen Minuten, d. h. noch während der Operation gestelltwerden, so wird das errtnornmene Gewebe in einer 5/oigen Formalinlösung starkerhitzt, und die Schnitte werden in eine angewärrrrte Farbe gebracht, da durchdas Erwärmen der Arbeitsgang erheblich abgekürzt wird" Er kann in 5 bis 10Minuten beendet sein.Auch in der Botanik ist die Gefriermethode sehr gut anwendbar' wenn es sichdarum handelt, sehr saftige und großzellige Gewebe zu schneiden. Sind diesejedoch sehr locker, so ist es zweckmäßiger, sie mit Gelatine zu durchtränken.Dazw bringt man sie zunächst in eine I?,S/oige Gelatinelösung in I)/"igem Karbolwasser,die im Thermostaten bei 3?oC stehen muß. Nach etwa 24 Stundenwird diese Gelatinelösung durch eine Z1/"ige ersetzt.Auch die Anfertigung von Papierschnitten ist sehr gut nach der Gefriermethodemöglich, wie von Jayme und Harders-steinhäuser angegeben wurde. Dabei wirdein schrnaler Papierstreifen, der nur 3 bis 4 mm hoch sein kann, mit der Pinzetteaufrecht in etwas Wasser gehalten, das rnan auf den Gefriertisch gebrachtbo W.
hat. Dann läßt man Kohlensäure einströmen, damit der Papierstreifen anfriertund'aufrecht steht. Nun wird nach und nach soviel Wasser dazugegeben,bis er völlig in Eis eingeschlossen ist" Statt in'W'asser, kann manPapier auch gut in Gummi-Arabicum-Lösung oder Gelatine einfrieren.Liegen weiche Papiersorten vor, die keine Benetzung vertragen, so tauchtman sie kurz in Paraffin, damit sich eine oberflächliche dünne Paraffinhautbildet. Dieses von einem Paraffinmantel umgebene Papier wird nachder oben geschilderten lr,{ethode eingefroren.
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