eisenaufnahme in astroglia-reichen primärkulturen - E-LIB ...

ERGEBNISSE
verursacht zu sein. Aufgrund der vorliegenden Ergebnisse, wurde 100 µM FAC als
Standardkonzentration für die weiteren Untersuchungen zur Eisenakkumulation in DMEM
gewählt.
Eisengehalt (nmol/mg)
600
500
400
300
200
100
0
A
[FAC] (µM)
150
150
150
250
0 1 2 3 4
Inkubationszeit (h)
LDH-Freisetzung (%)
100
80
60
40
20
0
C
Eisen-Akkumulationsgeschwindigkeit
(nmol/(mg·h))
160
140
120
100
80
60
40
20
0
[Eisen] (µM)
B
0 30 50 80 100 150 250 500
0 100 200 300 400 500
[Eisen] (µM)
Abb. 3.2.2: Konzentrationsabhängigkeit der Eisenakkumulation von APKs in DMEM
APKs wurden in DMEM mit bis zu 500 µM Eisen (als FAC) für bis zu 4 h inkubiert. A: Spezifische
zelluläre Eisengehalte B: Eisenakkumulationsgeschwindigkeiten bestimmt durch lineare Regression
aus dem Anstieg der spezifischen Eisengehalte zwischen 1 und 4 h. C: LDH-Aktivität im
Zellüberstand (Freisetzung) nach 4 h Inkubation in Prozent der initialen zellulären LDH-Aktivität.
3.2.2 Einfluss von Citrat und Isocitrat
Zur Charakterisierung des zellulären Prozesses der Eisenakkumulation in Astrogliazellen,
wurde zunächst der Einfluss von Citrat bzw. Isocitrat auf den zellulären Eisengehalt nach
Gabe von Eisen als FAC experimentell untersucht. Hierzu wurden APKs mit 100 µM FAC in
Gegenwart und Abwesenheit eines 10-fachen molaren Überschusses entweder von
Ammoniumcitrat, Natriumcitrat oder Natriumisocitrat für bis zu 3 h inkubiert.
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